多表位基因工程疫苗的研究进展

多表位基因工程疫苗是运用重组DNA技术将多个编码抗原表位的DNA序列片段进行串联组合,然后重组入原核、真核表达载体或者病毒构建重组子,并进一步表达重组蛋白而制成的疫苗.多表位基因工程疫苗是最具开发前景的疫苗之一,在细菌、病毒、寄生虫等新型疫苗的研究中取得了很大的进步.本文就多表位基因工程疫苗的研究进行综述.     

非洲猪瘟病毒p72蛋白抗原表位预测分析及多表位疫苗的构建

为了预测非洲猪瘟病毒2018/AnhuiXCGQ株p72蛋白的T、B淋巴细胞抗原表位,并完成多表位疫苗的构建。试验采用生物信息学技术ExPASy、SOMPA、PSIPRED Server、DNASTAR及Phyre对该蛋白的理化性质、二级结构、三级结构进行初步预测分析,运用ABCpred Prediction、Scratch、NetCTL及IEDB预测其T、B淋巴细胞表位,最终设计构建得到多表位疫苗。依据各生物学方法分析预测,得到B淋巴细胞优势表位:110～120、77～88、45～55、12～18、27～37位置;T淋巴细胞优势表位298～307、520～531、203～212位置,并设计得到T、B淋巴细胞表位表达盒,ExPASy预测表示该表位盒为亲水性蛋白。以此多表位表达盒为目的基因,以pET-28a构建设计多表位疫苗。表明该蛋白有多个潜在抗原表位,并可依据预测得到的蛋白二级结构、三级结构等参数信息及多个预测抗原位点构建ASFV多表位疫苗,表达纯化用于免疫试验。     

多表位疫苗的研究进展及应用

多表位疫苗（multiepitope vaccine）也称鸡尾酒式疫苗,是同时携带多个与目标抗原相关的及辅助性表位的疫苗。多表位疫苗是由基于抗原表位的氨基酸序列制备的,是近年发展起来的一种独特的疫苗设计思路,代表了一种疫苗设计的新方向,对它的研究是基因工程疫苗研究领域里的热点之一。与传统疫苗相比,多表位疫苗有很多优势：能被具有多种遗传背景的MHC分子识别、结合,从而得到高效的递呈;在细胞免疫方面具有独特的优势,可有效应对病原微生物的变异和免疫反应中的诸多不利因素。文章综述了多表位疫苗的研究进展及应用。     

羊痘病毒多表位核酸疫苗的构建及表达

结合文献报道并通过计算机软件分析筛选出羊痘病毒(SGPV) A4同源核蛋白和A27、A33、B5、L1同源膜蛋白基因的T、B细胞优势抗原表位共6段,采用人工合成的方法将各抗原表位以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头串联成一条全新的多表位嵌合基因E.将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pcDNA3.1-E质粒.用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;提取转染细胞总RNA,RT-PCR方法检测目的基因的转录.结果所构建的真核表达质粒在BHK-21细胞中能表达目的蛋白,RT-PCR方法检测到目的基因的转录;表明表达产物能与相应抗体特异性结合,具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗SGPV的核酸疫苗.     

表位疫苗设计、优化策略及在动物疫苗研究中的应用

表位疫苗是依据抗原表位来设计的一种新型疫苗。由于具有安全性好、诱导产生特异性免疫反应强,在抗感染免疫、免疫逃避、抗肿瘤免疫中具有良好应用前景。本文就表位疫苗的设计、构建、优化及其在动物疫苗中的应用研究作一综述。     

表位疫苗研究进展

表位疫苗是近年来发展起来的一种新型疫苗,相对传统疫苗,拥有较多优势。表位疫苗设计的关键是筛选表位,表位的筛选包括蛋白质降解法、肽探针扫描技术、随机肽库技术、计算机表位预测。表位疫苗需要借助一定的载体才能发挥免疫作用,包括脂质载体、蛋白载体、佐剂等。目前国内外学者还采用多种方法如串联重复、MAP空间模式及表位修饰等方法增强表位疫苗的免疫效果。表位疫苗主要包括病毒表位疫苗、细菌表位疫苗和寄生虫表位疫苗。尽管表位疫苗的研究发展迅速,但仍然面临一些问题亟待解决。     

猪流感病毒多表位抗原的小鼠黏膜免疫试验

为探讨经黏膜途径免疫接种猪流感病毒(SIV)多肽疫苗的可行性,选择STV主要结构蛋白血凝素(HA)的T、B抗原表位,将多个表位片段串联,定向克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,对串联表达的重组猪流感病毒蛋白SIV-ep1、SW-ep2、SIV-el2进行了小鼠免疫试验。重组蛋白以包涵体形式表达,经洗涤定量后,采用灌胃途径免疫6周龄KM小鼠,检测免疫小鼠抗体及细胞免疫水平。结果发现三免后各免疫组血清IgG抗体与PBS对照组差异极显著(P<0.01);黏膜分泌型IgA抗体,所有免疫蛋白组与PBS组差异均极显著(P<0.01);细胞免疫检测,所有免疫组小鼠外周血T淋巴细胞增殖明显;猪流感病毒血凝抗体检测,SIV-ep1免疫组、SIV-ep2免疫组、SIV-ep1与LT蛋白免疫组抗SIVH1N1亚型HI效价达1:1024,SIV-el2蛋白免疫组HI效价达1:512。结果表明,猪流感病毒重组多表位抗原灌胃免疫小鼠,能产生理想的黏膜免疫抗体和血清抗体。     

口蹄疫表位疫苗的研究进展

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物发生的一种急性、烈性传染病,给发病地区的畜牧业造成巨大的损失,目前应用疫苗来防控口蹄疫仍是最主要的手段。作为一种新型疫苗,表位疫苗是用病毒相关抗原表位制备,可同时携带多个抗原表位及辅助性表位的疫苗,具有安全性好、易操作和可控等优势,受到人们密切的关注。近些年来,对于口蹄疫表位及疫苗的研究取得了很大的进展,现对口蹄疫病毒相关的细胞表位及其以此为基础的表位疫苗的最新进展进行综述,为研制更加安全有效的口蹄疫疫苗提供参考。     

流感病毒抗原表位的研究进展

流感病毒抗原表位的研究,不仅是对流感病毒致病机理和机体免疫系统反应的探究,还能很好地指导对流感的防治。作者从抗原表位的特点,流感病毒抗原表位的特点、研究进展及流感病毒抗原表位疫苗的应用几个方面进行了综述。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原表位研究进展

根据病毒表位与受体细胞结合部位的差异可分为B细胞抗原表位和T细胞抗原表位。对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗原表位的研究已有大量报道,论文根据PRRSV的基因组结构蛋白和非结构蛋白基因编码区特点,对鉴定的PRRSV相关抗原表位进行简要综述,为进一步开发PRRSV快速鉴别诊断方法和多表位疫苗奠定基础。     

副流感病毒5型载体研究进展

负链RNA病毒的反向遗传学技术是一种新兴的分子生物学技术,作为负链RNA病毒的副流感病毒5型(parainfluenza virus 5,PIV5),是一种极具应用潜力的重组病毒活载体。现结合PIV5病毒载体特征,对其重组病毒的反向遗传学及其应用等做简要综述。     

鸭坦布苏病毒病的研究进展

鸭坦布苏病毒最早是在马来西亚发现的,于2010年首次传入我国,给我国养鸭业带来巨大经济损失。该病是一种能够引起鸭减料、产蛋下降并伴有一定死淘率的传染病。本文从该病的发生、发展、病原学、流行情况、诊断方法及防控措施等方面对近几年来该病的研究情况进行了详细阐述。     

O型FMDV复合多表位在毕赤酵母中的表达与鉴定

将O型FMDV复合多表位CTB-TEpi与FMDV结构基因P1-2A(P1/2A)连入毕赤酵母表达载体pPIC9K,经SacⅠ线性化后,利用电转化法整合到毕赤酵母(Pichia pastoris)基因组中。通过G418浓度梯度筛选得到高拷贝阳性转化子GS115/P1/2A-CTB-TEpi。经甲醇诱导表达后,目的蛋白在毕赤酵母中获得成功表达,并在FMDV自裂解片段2A的作用下裂解为P1/2A和CTB-TEpi 2个片段,相对分子质量分别为81 800和39 400,占上清液中可溶蛋白的比例为25%。Western blotting分析表明,表达蛋白的2部分均可被抗O型FMDV的血清所识别,而且含有CTB片段的CTB-TEpi条带可以被兔抗霍乱毒素血清识别,证明表达的蛋白具有抗原活性,为进一步研究O型FMDV复合多表位亚单位疫苗的免疫效果打下了基础。     

Human and bovine respiratory syncytial virus vaccine research and development

Human (HRSV) and bovine (BRSV) respiratory syncytial viruses (RSV) are two closely related viruses, which are the most important causative agents of respiratory tract infections of young children and calves, respectively. BRSV vaccines have been available for nearly 2 decades. They probably have reduced the prevalence of RSV infection but their efficacy needs improvement. In contrast, despite decades of research, there is no currently licensed vaccine for the prevention of HRSV disease. Development of a HRSV vaccine for infants has been hindered by the lack of a relevant animal model that develops disease, the need to immunize immunologically immature young infants, the difficulty for live vaccines to find the right balance between attenuation and immunogenicity, and the risk of vaccine-associated disease. During the past 15 years, intensive research into a HRSV vaccine has yielded vaccine candidates, which have been evaluated in animal models and, for some of them, in clinical trials in humans. Recent formulations have focused on subunit vaccines with specific CD4+ Th-1 immune response-activating adjuvants and on genetically engineered live attenuated vaccines. It is likely that different HRSV vaccines and/or combinations of vaccines used sequentially will be needed for the various populations at risk. This review discusses the recent advances in RSV vaccine development.     

预防禽病的多价重组马立克氏病疫苗研究进展

随着基因重组技术在控制动物疾病方面的应用 ,马立克氏病病毒被用作病毒载体构建多价重组疫苗。本文就重组马立克氏病病毒生长非必需区的发现 ,重组病毒在细胞和鸡体内的生长以及免疫效果的研究进展进行综述。     

转基因植物疫苗的研究进展

转基因植物疫苗作为一种新型的基因工程疫苗,和其他疫苗相比,具有生产简便、成本低廉、安全性好、可食性等优点。本文就当前转基因植物疫苗的研究进展作一简要综述,对其优缺点及发展方向进行分析。     

猪痘病毒研究进展

猪痘是由猪痘病毒或痘苗病毒引起的猪的一种急性、热性和接触性传染病,近年来,国内外在猪痘病毒的分子水平的研究方面取得了较大进展。论文在综述了猪痘病毒的理化特征的基础上,着重介绍了猪痘病毒分子特征以及不同类型的编码蛋白、作为疫苗载体、诊断和防控方面的研究进展。