DNA疫苗及其在水产养殖中的应用研究进展

1990年，Wolff等发现将质粒DNA（裸露的DNA）注射给小鼠能引起外源基因的长期表达，接着Ulmer等进一步证实将病毒蛋白基因注射给动物能引起免疫反应，便诞生了DNA免疫技术。此后研究证明，编码病毒、细菌和寄生虫等不同种类抗原基因的质粒DNA能引起鸡、鼠、牲畜、灵长类和鱼等物种强烈而持久的免疫反应，它成为继减毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗和重组多肽疫苗之后又一新型疫苗。     

DNA疫苗及其在水产养殖中的应用研究进展

1990年，Wolff等发现将质粒DNA（裸露的DNA）注射给小鼠能引起外源基因的长期表达，接着Ulmer等进一步证实将病毒蛋白基因注射给动物能引起免疫反应，便诞生了DNA免疫技术。此后研究证明，编码病毒、细菌和寄生虫等不同种类抗原基因的质粒DNA能引起鸡、鼠、牲畜、灵长类和鱼等物种强烈而持久的免疫反应，它成为继减毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗和重组多肽疫苗之后又一新型疫苗。     

疫苗研制的新进展

随着生物技术的不断创新,继减毒苗、灭活苗、基因工程苗、合成肽苗、抗独特型抗体苗之后,科研工作者又先后研制出核酸疫苗、转基因植物疫苗和高分子微球疫苗,本文对后三种疫苗作一简介。1核酸疫苗所谓的核酸疫苗又称基因疫苗,就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上,然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体免疫系统,引起免疫应答。用DNA作为免疫原的称DNA疫苗,用RNA作为免疫原的称RNA疫苗。核酸免疫是近几年基因治疗研究中衍生发展的一个新领域,有人将核酸疫苗看作是继全菌减毒疫…     

核酸疫苗在传染性疾病中的应用

核酸疫苗又称基因疫苗和DNA疫苗,是将编码某种抗原蛋白的外源基因与质粒重组后,直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白免疫应答,以达预防和治疗疾病的目的（1,2）。核酸疫苗既能产生细胞免疫又可诱导体液免疫,因此免疫效果优于亚单位疫苗和灭活疫苗;安全性,没有减毒疫苗可能引起的致病作用;长效性,质粒DNA可在细胞内存在两个月;生产简便、成本低廉稳定性好且贮运方便。正是核酸疫苗这些特点,使之在预防病毒、寄生虫、细菌等传染性疾病方面显示出巨大的潜力。本文将重点介绍核…     

DNA疫苗及其应用

DNA疫苗是90年代初发展起来的新的免疫学技术，被誉为第三次疫苗革命。DNA疫苗是指直接把带有目的抗原基因的重组质粒转染或注射到动物细胞中，使之在细胞内持续表达出天然的抗原物质。这些目的蛋白质经正确的糖基化修饰等加工处理后，与主要组织相容性复合物抗原形成复合物并被提到细胞表面，诱导特异性体液免疫应答和细胞免疫应答，使动物获得保护。DNA疫苗的免疫机制已被多数学者所接受，其应用潜力也得到世界各国的重视。美国已批准流感、结核、疟疾、乙肝等数种DNA疫苗做临床实验，其中结核和疟疾DNA疫苗已获准生产。我国也有10…     

HAV表位抗原与HBV核心抗原融合基因的原核表达

为探讨甲肝DNA疫苗的可行性,利用DNA重组技术将甲肝病毒（HAV）复合多表位抗原基因VPx插入到乙肝病毒核心抗原（HBcAg）基因中,得到CVPx融合基因。将CVPx克隆到原核表达载体pET-28a（＋）中,并在大肠杆菌中进行表达,表达的蛋白进行Western Blot及ELISA检测,结果表明：融合蛋白具有甲肝病毒表位抗原的反应原性。     

核酸疫苗研究新进展

核酸疫苗是90年代初从基因治疗研究领域发展起来的一种全新疫苗,又称为DNA疫苗或基因疫苗,它是把编码免疫原或与免疫原相关的外源基因克隆到真核质粒表达载体上,然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内,使外源基因在动物体内表达,产生的抗原激活机体的免疫系统,引发免疫反应,从而达到预防和治疗疾病的目的.与传统的灭活或弱毒疫苗、亚单位疫苗相比,核酸疫苗以具有高效性、安全性和制备简单、易于贮存运输等优点,而受到全世界的普遍关注,具有广阔的发展前景.     

鸡新城疫病毒F基因高效真核表达质粒的构建

为进一步研究基因疫苗的免疫机制和基因疫苗的免疫效果 ,应用 DNA重组技术 ,根据载体 pc D-NA4 .0 / His Max的多克隆位点设计引物 ,对含有 NDV保护性抗原基因 F的质粒 PCR扩增。将得到的目的片段插入到载体的启动子下游 ,成功得到含有 NDV F基因的真核表达质粒载体 PC4 F的基因疫苗。     

犬细小病毒病DNA疫苗的研究进展

犬细小病毒病是犬的一种具有高度接触性的烈性传染病。近年来,在犬细小病毒新型疫苗研究方面取得了新的进展,特别是DNA疫苗,笔者就犬细小病毒DNA疫苗的作用机理、抗原基因、载体选择、分子佐剂的研究进展方面进行系列论述。     

鸡柔嫩艾美耳球虫三价DNA疫苗的构建及鉴定

[目的]构建含鸡柔嫩艾美耳球虫3-1E和CDPK抗原基因及鸡IFN-γ基因的三价DNA疫苗。[方法]应用SOE-PCR将3-1E、CD-PK和鸡IFN-γ共3个基因通过2个（GGGGS）3连接子相连,扩增出IFN-γ/3-1E/CDPK三价融合基因,将其克隆入真核表达载体proVAX中构建三价融合真核表达质粒proIEC,后用双酶切和PCR进行鉴定。阳性重组质粒提取纯化后体外转染PK-15细胞,通过间接免疫荧光技术检测目的基因在转染细胞中的表达情况。[结果]经双酶切和PCR鉴定证实鸡柔嫩艾美耳球虫三价DNA疫苗构建成功,且在PK-15细胞中获得了成功表达。[结论]鸡柔嫩艾美耳球虫IFN-γ/3-1E/CDPK三价DNA疫苗构建成功,为进一步探讨其免疫保护性奠定了基础。