花椰菜高频再生系统的研究

本文研究了BA、NAA、AgNO_3、子叶龄、培养密度以及Km对花椰菜子叶再生系统的影响,建立了一个高频再生系统,使再生频率达100%,其最佳各成分的配比是:MS BA4.5mg/L NAA0.1mg/L AgNO_35.0～10.0mg/L.     

花椰菜叶片离体再生技术的研究

本研究通过对培养基中激素组成及其质量浓度,不同取材部位均能影响外植体的芽分化频率等因素的探讨,,获得了花椰菜叶片离体培养芽的高效再生,其芽分化率达95%。     

花椰菜组织培养获得再生植株

<正> 花椰菜(Brassica oleracea Var.botrytis)采种难是长期存在的一大难题,利用无性繁殖的方法,繁育采种株,又因多数品种不发生腋芽而难以实现。因此,组织培养技术被人们视作繁育花椰菜采种株的有效途径。 笔者从1993年9月开始花椰菜组织培养的研究,成功地从花序柄和花球组织块上诱导出再生植株,并收到了种子,试种后,花球正常,不亲和指数未降低。     

花椰菜再生体系的优化

以子叶和上胚轴为外植体,研究了不同激素浓度下花椰菜离体培养的再生体系.结果表明,上胚轴作为外植体时不定芽分化率较高,在不加IAA或添加0.5 mg/L IAA的培养基上均能达到100%,最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA.子叶作为外植体时不定芽分化率低,最高为40%.     

松散型花椰菜小孢子植株再生研究

以松散型花椰菜子叶型小孢子胚为外植体,研究冷处理、活性炭及AgNO3对小孢子植株再生的影响。结果表明:对小孢子胚进行3 d的4℃冷处理培养,能提高其胚芽诱导率和胚芽数;培养基中添加1.0 g·L-1的活性炭对提高小孢子胚芽诱导率没有明显效果,但能有效减轻胚芽的玻璃化;添加5.0～7.0 mg·L-1的AgNO3对小孢子胚芽诱导有显著效果。     

花椰菜叶片离体再生技术的研究

以花椰菜叶片为外植体,经消毒处理后在不同激素浓度的培养基上进行诱导再生。结果表明:在附加3mg/L6-BA和0.2mg/LNAA的MS培养基上培养,芽分化率最高,达100%,平均每块外植体产生5.71个芽。     

花椰菜再生苗去玻璃化试验

为克服花椰菜再生苗玻璃化程度高,难以分化成正常植株的问题,开展优化培养基配方试验.结果表明,切取0.5～0.7 cm长的“秋雪珠”花椰菜组培无菌苗的下胚轴,以MS为基本培养基加入6-BA 1 mg/L＋AgNO320 mg/L＋4%蔗糖＋0.5%phytgal,不定芽诱导率可达89.57%,玻璃化苗发生率仅13.21%,再生植株移栽成活率达95%～100%.     

花椰菜高效再生体系建立及农杆菌介导的遗传转化研究

以栽培品种"银峰80天"的下胚轴与子叶为外植体,建立花椰菜高效组织再生体系,并研究卡那霉素浓度、侵染时间和共培养时间等因素对花椰菜愈伤组织分化的影响。结果表明:以MS+TDZ 0.2 mg/L+NAA0.1mg/L作为分化培养基时,下胚轴的分化频率达88.9%,子叶的分化频率达97.6%;农杆菌介导花椰菜遗传转化时,OD600=0.4,下胚轴和子叶的侵染时间为1 min,下胚轴和子叶分别共培养1 d和3 d后进行筛选,有利于花椰菜再生芽的分化获得抗性苗。     

西瓜高频再生系统的研究

以西瓜栽培种中育 1号为材料对影响西瓜组织培养的多个因素进行了研究 ,建立了西瓜茎尖、子叶块的高频再生系统。结果表明无菌苗子叶呈淡绿色时不定芽诱导率最高 ,茎尖和子叶块适于直接诱导不定芽 ,其中茎尖的诱导率稍高于子叶块 ,MS 6 -BA 1 0 IBA 0 5可较好的诱导子叶块分化不定芽 ,MS 6 -BA 1 0 IBA 0 1对茎尖较为合适 ,低浓度的IAA有利生根 ,低温、高湿可提高移栽的成活率     

提高花椰菜游离小孢子胚胎植株再生率研究

以花椰菜小孢子球型胚胎为供试材料,进行提高球型胚胎植株再生率研究。结果表明:球型胚胎成活率与胚胎的日龄、培养基的水分状况和添加活性炭有关。20 d的球型胚胎转移到MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+琼脂7 g/L+活性炭100 mg/L时,胚胎成活并形成愈伤组织的频率最高。激素组合6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最适宜花椰菜胚胎愈伤组织分化出再生植株,分化率达到100%,平均每块愈伤组织胚芽分化数量达到6.52个。     

大岩桐高频再生体系的研究

采用大岩桐叶片为试验材料,研究了不同培养基对大岩桐的愈伤组织诱导、分化、增殖以及生根培养的影响。结果表明:大岩桐叶片在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基上的出愈率最高,为93.4%;在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上既生长愈伤组织又生长较少的不定芽,其芽的再生率最高,为83.3%;在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上很少或不形成愈伤组织,而直接形成不定芽。生根培养用1/2MS培养基较好,生根速度快,生根平均为24.3条。     

花椰菜下胚轴培养和高频率芽再生技术的研究

以“春秋”花椰菜为试验材料 ,研究了影响下胚轴再生的若干因子。结果表明 ,6 d苗龄的下胚轴在附加 2～ 3m g/ L 6 - BA和 1.0 m g/ L NAA的 MS培养基上培养 ,芽分化率最高 ,达 93.33% ,平均每个外植体产芽5 .71个 ;Ag NO3对下胚轴的细胞生长有明显的促进作用 ;下胚轴的下端比上端产芽早 ,并且较易产生不定芽。     

洋桔梗高频再生系统的建立及其卡那霉素敏感性测定

以Double Mariachi Pink洋桔梗叶片为外植体,研究了切割方式、培养基中6-BA与NAA配比对其不定芽分化的影响以及叶片不定芽分化对卡那霉素(Km)的敏感性。结果表明:五刀切与三刀切对不定芽分化数量的影响无显著性差异;MS 1.0 mg/L6-BA为叶片不定芽分化的最适培养基,不定芽分化率达100%,在1.0 cm×1.0 cm叶块上的不定芽分化数平均达25.4;25 mg/L Km为抑制叶片不定芽分化的最低浓度。     

大花蕙兰高频再生体系优化研究

为研究大花蕙兰(Cymbidium hybridum)的高频快繁再生体系,以大花蕙兰无菌原球茎、分化苗为材料,应用正交试验进行不同激素和添加物的优化筛选。结果表明院在1/2 MS+0.3 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1 g/L活性炭的培养基上大花蕙兰的原球茎增殖效果最好,新增原球茎呈深绿色、形状饱满,增殖倍数达11倍;在1/2 MS+0.1 mg/L6-BA+0.4 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1g/L活性炭的培养基上茎叶分化效果最好,分化丛生芽数量最多、颜色深绿色、生长健壮,分化倍数达6.1倍;在1/2 MS+0.2 mg/L GA3+1.0mg/L NAA+0.2 mg/L IBA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1 g/L活性炭的培养基上生根效果最好,生根数最多,平均生根数达4条,根系生长强健。     

早熟花椰菜小孢子高效胚胎发生及植株再生

以7个早熟花椰菜F1杂交品种和1个中熟花椰菜杂交品种为供体材料，对早熟花椰菜小孢子培养的胚胎发生及植株再生进行了研究。结果表明，供试材料绝大多数能诱导出胚，其胚状体产量与供体基因型有关，最高每花蕾胚状体产量达到112个。其中，‘厦雪40天’的平均每花蕾胚产量最高，达到45．6个，而‘早花45天’未能诱导出胚。小孢子胚状体萌发率一般在30％左右，其中高的达到80％，但有未能诱导出再生苗的。小孢子再生植株间在生育期及育性上存在较大变异。     

青花菜高频离体再生体系的研究

以青花菜04J-20、04J-19和04J-21带柄子叶为外植体,研究其高频离体再生体系.比较了不同基因型、不同质量浓度植物生长调节剂、不同时期苗龄外植体对不定芽再生频率的影响.结果表明:04J-20 8 d苗龄外植体不定芽的再生频率最高为100%(MS 0.10 mg·L-1 NAA 6.0 mg·L-1 6-BA 8 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),继代培养增殖系数达8～9(MS 0.2 mg·L-1 NAA 2.0 mg·L-1 6-BA 7 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),生根培养诱导生根率为100%(1/2MS 0.1 mg·L-1 NAA 7 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),驯化移栽成活率达95%,获得增殖200倍的田间再生植株.     

出口花椰菜安全生产技术的研究

通过对花椰菜新品种的品种筛选、育苗技术、配方肥使用技术、以及病虫害防治等关键技术的系统研究,基本明确了能适应本地区生产,品质佳、产量高的出口花椰菜新品种及其安全生产栽培技术。出口花椰菜安全生产标准化示范结果表明,安全生产标准化技术示范区,较常规生产对照区,出口花椰菜产品的商品率提高10.6￣14.8个百分点;化肥用量减少22.37%￣32.16%;农药用量减少23.08%￣42.05%;增加收入3600￣4380元/hm2。取得经济效益3874.5万元;出口花椰菜安全生产示范区生产的产品中,重金属、化学农药、硝酸盐或亚硝酸盐等12种有毒有害物质残留量检测,结果表明各项检验结果显著地低于标准要求。     

籼稻遗传转化高频再生体系的建立

选用21个籼稻品种进行成熟胚离体培养试验，结果发现大多数品种可通过添加一定配比的外源植物激素使愈伤组织诱导率大大提高，继代培养基中添加KT NAA可明显改善愈伤组织的生长状况；连续继代可显著提高愈伤组织的再分化率；预分化培养后转入再分化培养可显著提高愈伤组织再分化率，建立了一套适于籼稻遗传转化的高频再生离体培养体系。