大肠埃希菌生物被膜研究进展

细菌生物被膜指多个细菌黏附于机体或物体表面,分泌胞外多聚物将其自身包裹其中而形成的结构。研究表明人类许多细菌感染与生物被膜有关,生物被膜具有极高的抗药性和免疫逃逸能力,这也是许多细菌感染难以根除的重要原因之一,近年来已成为医学界关注的热点。大肠埃希菌是最重要的条件致病菌之一,论文从大肠埃希菌生物被膜的形态结构、检测方法、耐药机制、应对策略4个方面综述了大肠埃希菌生物被膜研究的进展。     

9种抗菌药物对大肠埃希菌最小抑菌浓度的测定

畜禽养殖中会用到一些抗菌药物,而药物选用需要进行药物敏感性试验,目前市售的药敏纸片多为人用抗菌药物,为了制备兽用抗菌药物的药敏纸片,需要对药物的最小抑菌浓度(MIC)进行测定。该研究筛选了国家兽用药物名录中规定的、兽医临床上常用6类共9种抗菌药物(头孢噻呋钠、硫酸链霉素、强力霉素、土霉素、氨苄西林、氟苯尼考、替米考星、硫酸新霉素、青霉素),以大肠埃希菌为指标菌,通过微量肉汤稀释法分别测定了9种常用抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,头孢噻呋钠、硫酸链霉素、强力霉素、土霉素、氨苄西林、氟苯尼考、替米考星、硫酸新霉素、青霉素对指标菌的MIC值分别为为2、4、4、16、8、16、64、32、250μg/mL。研究结果为这些药物的临床应用和药敏纸片的研制提供了基础资料。     

猪源性大肠埃希氏菌对抗菌药物的敏感性测定

多甘肃省１３个地区（州、市）规模化猪场场和专业户猪场分离出大肠埃希氏菌１１８析,安世界卫生组织（ＷＨＯ）推荐的Ｒｉｒｂｙ－Ｂａｕｅｒ氏方法,用１８种抗菌药物对其敏感性进行了测定。结果,抑菌作用最强为诺氟沙星,高效菌株占８９．０％;抑菌作用最差为四环素,耐药菌株占１００％。     

中草药对大肠埃希氏菌的抑菌试验

笔者将采于梵净山地区的二十四种中草药作大肠埃希氏攻的抑菌试验,发现“红花酢浆草”抑菌作用较强。     

新疆不同动物源大肠埃希菌耐药性比较

为了比较新疆不同动物源大肠埃希菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,从猪场、羊场和牛场分别分离猪源大肠埃希菌454株、羊源大肠埃希菌638株和牛源大肠埃希菌89株,用微量肉汤法对上述细菌进行临床常用β-内酰胺类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类和酰胺醇类抗菌药物最小抑菌浓度测定。结果表面,猪源大肠埃希菌对氨苄西林(67.0%)和阿莫西林/克拉维酸(63.7%)耐药率较高,其他药物耐药率在10.4%~41.2%之间;羊源大肠埃希菌对安普霉素(33.9%)和阿莫西林/克拉维酸(21.2%)耐药率较高,其他药物耐药率在3.1%~15.6%之间;牛源大肠埃希菌对氨苄西林(24.4%)和阿莫西林/克拉维酸(8.9%)耐药率较高,其他药物耐药率在1.1%~6.7%之间。多药耐药结果,猪源大肠埃希菌以2耐~5耐为主,羊源大肠埃希菌以0耐~2耐为主,牛源大肠埃希菌以0耐~1耐为主。新疆猪源大肠埃希菌对临床常用抗菌药物耐药情况最严重,羊源菌次之,牛源菌最轻;猪源大肠埃希菌多药耐药现象严重。     

绵羊大肠埃希菌生物被膜形成及相关基因的检测

检测绵羊大肠埃希菌中的XJ10生物被膜(biofilm,BF)形成情况并确定与BF形成相关基因的携带情况。采用96孔聚苯乙烯微孔板培养XJ10观察BF的形态和测定OD值分析XJ10BF在不同的时间段形成的情况,采用PCR方法检测BF 12种形成相关基因的分布情况。结果表明,在37℃,BF的OD值从2 h开始逐渐升高,24 h左右接近最高峰,维持至36 h后,OD值开始缓慢下降,直至72 h仍维持较高水平,在整个检测时间段内XJ10BF OD值显著高于对照组,且差异显著(P0.05);6 h时BF形成初具形态,8 h～10 h呈现不完整的网格结构,12 h时BF形成较明显的网状结构,24 h～36 h形成有序的较为密集的网格结构,48 h后网状结构开始解离和脱落。同时在XJ10中检测到了其中8种与BF形成相关的基因,测序结果与GenBank公布的相应序列同源性为97.2%以上。试验表明XJ10具有形成BF的能力,但形成能力较弱,且携带8个与BF形成相关的基因。     

流浪犬源大肠埃希菌对氟喹诺酮类和氨基糖苷类药物的耐药性检测

为选择有效治疗流浪犬大肠杆菌病药物,从成都市双流爱之家动物救助中心采集流浪犬粪便进行细菌分离与鉴定,测定其对6种临床常用氟喹诺酮类(二氟沙星、诺氟沙星、沙拉沙星)和氨基糖苷类(阿米卡星、安普霉素和卡那霉素)抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,分离的267株大肠埃希菌对二氟沙星、诺氟沙星和沙拉沙星耐药率分别为56.2%、46.7%和22.1%;对阿米卡星、安普霉素和卡那霉素的耐药率分别为6.0%、6.7%和30.7%;分离菌株对沙拉沙星和阿米卡星最敏感,可优先选择沙拉沙和阿米卡星进行流浪犬大肠杆菌病防治。     

克拉维酸强化的阿莫西林对致病性大肠埃希氏菌体外抑菌试验

克拉维酸是一种β-内酰胺酶抑制剂，与阿莫西林同时应用时使得通过产生β-内酰胺酶对阿莫西林耐药的大多数细菌重新成为敏感菌。对来源于鸡、猪的共31株致病性大肠埃希氏菌最小抑菌浓度（MIC）测定表明，70%以上菌株对阿莫西林耐药；克拉维酸与阿莫西林联合使用使MIC显著下降；与单一使用阿莫西林相比，头孢氨苄青霉素对大多数分离菌的MIC较低。     

12种抗菌药物抗大肠埃希氏菌的增效剂筛选试验

筛选氟苯尼考等12种临床常用抗菌药物的抗大肠埃希氏菌增效剂.采用微量稀释法分别测定12种抗菌药物和丁香酚等8种可能成分的最小抑菌浓度(MIC);棋盘稀释法测定可能成分与抗菌药物联用抑菌浓度(FIC)指数,确定可能成分对抗菌药物的协同或相加、无关或拮抗作用.根据MIC和FIC指数分析发现,丁香酚、尼泊金酯钠、羧甲壳聚糖、...     

4味中药及其与抗菌药的复方制剂的MIC测定

用改进的试管两倍稀释法测定了黄连、鱼腥草、大青叶和苦参4味中药及其相互配伍（1：1）对标准大肠杆菌的最小抑菌浓度和4味中药与抗菌药配伍（1000：1）对临床分离鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度。结果表明，4味中药及其相互配伍对大肠杆菌标准株有一定的抑制作用，其MIC值介于3．91—62．50mg／mL之间，其中大青叶和鱼腥草以1：l配伍对大肠杆菌抑菌效果最好，MIC为3．91mg／mL；对临床分离株，单方药中黄连抑菌效果最好，MIC为31．25mg／mL，24种复方药中，黄连和盐酸多西环素或加替沙星以1000：1配伍的抑菌效果最好，其MIC为3．91mg／mL。     

猪源大肠杆菌O157:H7体外氟苯尼考耐药诱导及对抗菌药物敏感性变化研究

为初步研究猪源大肠杆菌O157:H7 (E.coli O157:H7)对氟苯尼考耐药性的产生和消除机制,本研究采用亚抑菌浓度体外耐药诱导的方法将两株猪源大肠杆菌O157:H7诱导成氟苯尼考高度耐药菌株,采用无氟苯尼考压力下连续传代培养的方法将获得的氟苯尼考耐药菌株的氟苯尼考耐药性消除,检测耐药诱导菌和耐药消除菌对抗菌药物的敏感性,并检测菌株质粒携带的耐药基因。结果显示,经氟苯尼考耐药诱导,猪源大肠杆菌O157:H7对氟苯尼考、阿莫西林、头孢唑啉、头孢拉定和头孢噻吩由敏感变为耐药,对头孢噻肟的敏感性由敏感变为中介,对氧氟沙星、环丙沙星和阿奇霉素由中介变为耐药;而经耐药消除后,菌株恢复对上述药物的敏感性;在菌株的质粒中检测到氟苯尼考耐药基因、喹诺酮类耐药基因和β-内酰胺酶基因,与耐药表型相符。结果表明,在氟苯尼考压力的长期存在下,猪源大肠杆菌O157:H7对氟苯尼考产生耐药,且对青霉素类、头孢类和喹诺酮类药物产生交叉耐药,在去除氟苯尼考压力下连续培养,可消除菌株的部分耐药性。     

豫北地区临床分离鸡大肠杆菌的体外药物敏感性测定

为了有效地治疗鸡大肠杆菌病,采用微量倍比稀释方法测定了17种抗菌药物对临床分离的豫北地区15株鸡大肠杆菌的体外最小抑菌浓度(MIC),并根据其MIC及MIC范围(MICRange)使用SPSS 13.0中Probit过程计算出17种抗菌药物的MIC50和MIC90.结果表明:多粘菌素B的抑菌作用最强,MIC50、MIC90分别为0.11、0.87 μg/mL;加替沙星的抑菌作用次之,MIC50、MIC90分别为2.53、3.88 μg/mL,其它3种药物恩诺沙星、左氧氟沙星、环丙沙星的抑菌作用相当,但不及加替沙星,MIC50、MIC90分别为10.11～11.79 μg/mL、15.16～21.13 μg/mL;多西环素和阿莫西林等12种抗菌药物的抑菌作用较小,MIC50、MIC90分别为18.53～388.50 μg/mL和30.59～713.42 μg/mL.     

苍术油对四种细菌最小抑菌浓度的研究

本研究通过试管2倍稀释法测定了苍术油对大肠杆菌(44102)、金黄色葡萄球菌(26003)、枯草芽孢杆菌(63501)和沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果:苍术油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为:117.2μg/ml、625μg/ml和312.5μg/ml,而对沙门氏菌没有任何抑菌作用。研究证明苍术油对部分细菌具有良好的抑制作用。     

中药水提物及其复方对大肠杆菌的体外抑菌效果

为了评价中药及其复方对大肠杆菌的体外抑菌效果,取乌梅、五倍子、山茱萸、黄芩等30种中药,通过试管二倍稀释法测定中药水提物对大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）与最小杀菌浓度（MBC）,并筛选出抗菌作用较强的中药水提物与其他中药水提物组成复方,测定中药复方对大肠杆菌的体外抑菌效果。结果表明,五倍子、乌梅、金银花、大青叶、黄芩、薄荷、五味子、青蒿、秦皮对大肠杆菌有明显的抑制作用,其中五倍子对大肠杆菌的抑菌活性最强（MIC为6.25 mg/mL）,而五味子和乌梅对大肠杆菌杀菌活性最强（MBC为50 mg/mL）。选取9种中药水提物作为主药与其他中药水提物分别组成复方后,大部分复方对大肠杆菌的抑制作用明显增强。     

大肠杆菌对中草药敏感性试验及其方法研究

用平板法、管碟稀释法检测大肠杆菌、沙门氏杆菌、芽胞杆菌对23种单味中药、复方清热解毒类中药的敏感性、管碟法结合试管法，具浓度高、准确性好和平板法显示稳定的优点，比较适合中药MIC的测定。结果表明黄芩、秦皮、黄连、大黄、连翘、金银花、夏枯草、石榴皮等具有清热解毒、泻火燥湿功用的药物抑菌效果比较明显；以三黄汤为基础方的清热解毒类复方中草药抑菌作用明显，对大肠杆菌的MIC为125-500mg/ml，复方中草药比单味MIC高。同时还观察了中草药对有益菌的影响，选用了乳杆菌SM0101、芽胞杆菌007作为对照，结果表明，不同的菌株药敏性有明显差异，这是中草药特异性治疗的基础。