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将pESI经EcoRI酶解后回收纯化的含有苏云金芽胞杆菌cryI基因高保守区的EcoRI-F片段重组到pSELECT-1的EcoRI位点,通过DIG体外标记转录制备高灵敏度、背景清楚的RNA探针,并利用该探针进行苏云金芽胞杆菌8010杀虫基因定位.结果表明,该菌株编码杀虫晶体蛋白的基因位于相对分子质量37×106的质粒上 相似文献
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利用PCR片段延伸连接技术将cry1E的原启动子准确地更换与cry3A启动子,重组cry1E经载体PHT315克隆至枯草芽胞杆菌无芽胞突变株IS8和苏云金杆菌以色列亚种无晶体突变株4Q7,获得重组菌3A1EBs和3A1EBt。聚丙烯酰胺凝胶电泳和生物测定表明,克隆改造后的cry1E可表达,表达的Cry1E对海灰翅夜蛾有毒。 相似文献
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根据苏云金杆菌(Bacilusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了cryⅠ基因5′端特异引物和3′端共同引物,利用PCR扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物,通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型.本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的20个菌株进行了cryⅠA(a~c)基因类型的PCR鉴定.结果表明:4个菌株含有cryⅠA(a)、cryⅠA(b)和cryⅠA(c)基因,2个菌株含有cryⅠA(a)和cryⅠA(c)基因,其余菌株不含所鉴定的基因类型. 相似文献
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用电激转化法构建杀虫防病荧光假单胞菌 总被引:2,自引:0,他引:2
以广寄主范围质粒PUCP18和PUCP19为载体,用电激转化法,将苏云金杆菌杀虫蛋白基因CrylA(c)片段导入了荧光假单胞菌P303菌株。Southem印迹分析和Westem印迹分析分别证实CrylA(c)基因的导入和晶体蛋白在P303中的表达。 相似文献
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本文描述了苏云金杆菌8010菌株(简称Bt8010)营养体、芽胞和伴胞晶体在扫描电子显微镜(SEM)下所看到的形态特征,并讨论了伴胞晶体的形态与其杀虫特异性的关系;再对8010菌的生化反应特性进行了鉴定与比较分析;并以4-5龄家蚕幼虫为供试虫,对来自瑞士、美国及我国湖北、河北和福建省的6种苏云菌杆菌制剂进行室内致病力的测定与比较。 相似文献
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根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了cryⅠ基因5‘端特异引物和3’端共同引物,利用PCR扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物。通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型。本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的20个菌株进行了cryⅠA(a-c)基因类型的PCR鉴定。 相似文献
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苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫第2期幼虫的毒力 总被引:1,自引:1,他引:1
苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫第2期幼虫的毒力王祥,姚宝安(华中农业大学畜牧兽医学院,武汉430070)关键词苏云金芽胞杆菌,伴胞晶体毒素,捻转血矛线虫,第二期幼虫THETOXICITYOFBacillusthuringiensisCRY... 相似文献
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利用对流干燥试验台,就苏云金芽胞杆菌8010粉剂(Bt 8010)对流干燥进行了风温、风速和物料层厚度的正交试验。分析了上述三因素对干燥时间和干燥后芽胞数目的影响的显著水平。同时还得出干燥时间、芽胞剩余率的回归方程及降速干燥阶段曲线方程,提出了较佳的干燥工艺参数。 相似文献
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利用对流干燥试验台,就苏云金芽胞杆菌8010粉剂(Bt8010)对流干燥进行了风温、风速和物料层厚度的正交试验.分析了上述三因素对干燥时间和干燥后芽胞数目的影响的显著水平.同时还得出干燥时间、芽胞剩余率的回归方程及降速干燥阶段曲线方程,提出了较佳的干燥工艺参数. 相似文献
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应用超滤技术分离Bt8010发酵液 总被引:2,自引:1,他引:2
在生产生物农药的过程中,应用超滤技术对苏云金杆菌Bt8010发酵液进行分离,排除水分83%,发酵浓缩达5.7倍,超滤通量为22L.(m^2.h)^-1,孢子截留率达100%,结果表明,用超滤技术对苏云金杆菌发酵液进行分离以生产生物农药,具有工艺简单,成本低、质量好等特点,可以代替通常采用的吸附-压滤工艺。 相似文献
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在生产生物农药的过程中.应用超滤技术对苏云金杆菌Bt8010发酵液进行分离,排除水分83%,发酵浓缩达5.7倍,超滤通量为22L·(m2·h)-1,孢子截留率达100%.结果表明,用超滤技术对苏云金杆菌发酵液进行分离以生产生物农药,具有工艺简单、成本低、质量好等特点.可以代替通常采用的吸附—压滤工艺. 相似文献
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用选择性培养基从舞毒蛾(Lymantriadispar)死虫体中分离到苏云金芽孢杆菌新菌株B-61,经分类鉴定属苏云金芽孢杆菌达姆斯塔特亚种(Bacillusthuringiensissubsp.darmstadiensis),简称Btd61.该菌株有8种质粒,4种晶体蛋白,合成二锥体小晶体和不规则大晶体2种伴孢晶体颗粒,对大蜡螟(Galeriamelonela)和舞毒蛾皆具强毒性.Btd61携带B1型的溶原性噬菌体,但又对B1型的Tb10噬菌体有抗性.Southern杂交实验结果表明Btd61所含的晶体蛋白基因属cryⅠ基因型 相似文献
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杨树冰核细菌溃疡病寄主树栖伴生细菌的研究 总被引:3,自引:2,他引:3
对感病寄生A100、A15和美×青杨树枝、干、根、叶上的细菌进行了分离、纯化和鉴定、结果表明伴生细菌有10种。它们是:嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrioguka)、恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)、荧光假单胞菌(P.fluorescens)、丁香假单胞菌(P. syringae)、成团肠杆菌(Enterbacter agglomerans)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、栗褐芽孢杆菌(B. badius)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、腊状芽孢杆菌(B.cereus)地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)。这些细菌在感病杨树不同部位出现的频率各异,在韧皮部细菌种群较多.在心材则较少。 相似文献
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通过分析伴孢晶体、芽孢、培养基及发酵液等的氨基酸比例,初步得到一些有关氨基酸参与代谢的资料.在发酵过程中,氨基酸既有累积又有消耗,特别是谷氨酸明显地被消耗;不同原料的氨基酸比例相差很大.这很可能是培养基影响杀虫毒力的主要原因之一.同一出发菌株8010(Bacillusthuringiensisvarkurstaki8010,简称8010)分离得到的3号、5号和72号菌株氨基酸比例稍有不同,它们与有关资料报道的其它菌株的氨基酸比例有较大不同.伴抱晶体和芽孢之间的氨基酸比例明显不同.Bt8010菌种发酵需要供给较多的谷氨酸. 相似文献
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利用电脉冲交质粒pHT3101和pHE-4D分别转入大肠杆菌和苏云金杆菌,结果显示大肠杆菌DNA的转化率为10^4-10^5.μg^-1,苏云金杆菌的DNA的转化率为10^2-10^3.μg^-1,同时利用该法消除Escherichia coli菌株TG1和Bt菌株ISP78/11中的pHT3101质粒,消除率分别为88.6%和66.4%。比较了转化和质粒消除的条件并构建了一个工程菌。 相似文献
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真菌杀虫剂剂型的研究现状(综述) 总被引:15,自引:1,他引:15
王成树 《安徽农业大学学报》1996,23(3):375-380
真菌杀虫剂剂型的研究现状(综述)王成树(安徽农业大学森林利用学院,合肥230036)1虫生真菌制剂的发展随着微生物防治的日益发展,病原微生物的生产规模向制剂化及其商业化方向发展。50年代,苏云金杆菌(Bacillusthuringlensis)开始深... 相似文献
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醋菌纤维素高产菌株筛选和菌物鉴定 总被引:8,自引:0,他引:8
从150份自然材料中分离得到了26个产纤维素菌株。其中,Ax-1、Ac-Ⅱ两高产菌株初步鉴定为巴氏醋杆菌木醋亚种(Acetobacter pasteutinus Subsp.Xylinum)和汉森醋杆菌(A.Hansenii)。该二菌株在28℃~5d静态培养中,从50g/L蔗糖(或葡萄糖)培养液中产出14g/L或16g/L纤维素,并初步测试了该纤维素的基本特性。 相似文献
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BtMP—342菌株的生物学特性分析及毒力测定 总被引:1,自引:1,他引:0
1992年,从自然死亡尺蠖幼虫体内分离出BtMP-342菌株,经对落叶松毛虫室内外生测证明,该菌株是高毒力的优良菌株。1995年7月-8月期间,采用PCR技术分析了BtMP-342菌株特异性,该菌株含有CryIAa、CryIAc、CryⅡA、CryⅡB以及CryV等五种毒蛋白基因。质粒电泳图谱分析表明,BtMP-342菌株由9个质粒构成,其中CryⅠAa和ⅠAc基因位于151.3Md和146.8M 相似文献