精原干细胞研究进展

精原干细胞是雄性哺乳动物精子发生过程的起始细胞,是一群具有自我更新和分化潜能的细胞。自大鼠精原干细胞异体移植获得成功以来,精原干细胞一直是干细胞研究的热点。本文根据国内外相关研究进展,对精原干细胞的生物学特性、功能调控因子、体外培养和移植等作一综述。     

精原干细胞研究进展

精原干细胞位于雄性哺乳动物的曲细精管生精上皮基膜内侧,是一群具有高度自我更新能力和分化潜能的细胞,它能向子代传递遗传信息,在哺乳动物中一般是指未分化的A型精原细胞。在精子发生这一特殊的细胞分化过程中,精原干细胞的地位极其重要,它既具有自我更新生成新的干细胞能力,又能够不断的增殖分化形成各阶段的生殖细胞,并最终分化产生精子,承载起向下一代传递遗传信息的使命。精原干细胞凭借其特有的生物学特性,在医学、畜牧业生产等领域都有着广阔应用前景。本文就精原干细胞的生物学特征、分离纯化、培养和移植技术等研究概况作简要概述。     

精原干细胞的体外培养及其潜在治疗应用价值

精原干细胞(SSCs)能够自我更新,产生大量分化的生殖细胞并在出生以后形成精子,将遗传信息传递给下一代。因为所有雌性生殖干细胞在出生前已停止增殖,所以SSCs是成年哺乳动物唯一的生殖干细胞。将有生育能力的雄性供体睾丸细胞移植到不育症雄性睾丸细胞中,不育症的雄性可以重新进行精子发生和恢复生育能力。这项移植技术已经用来研究SSCs的生物学特性。研究发现,精原干细胞可以在小鼠的曲细精管进行复制,然后迁移,精原干细胞所需自我更新的生长因子保存在哺乳动物中。因此相信该培养技术很快会被应用于人类的精原干细胞中。本文讨论了现有的和潜在的运用移植技术和体外培养精原干细胞的方法。由于辅助的生殖技术能使精子细胞进入卵母细胞使之受精,所以在体外培养分化精原干细胞使之成为成熟生殖细胞的技术,将会促使人的临床精原干细胞的应用得到长足发展。     

利用高科技不生育无角多赛克公羊当“爹”

<正>无角多赛克公羊与蒙古母绵羊共同产下6只小羔羊,仅有1只是无角多赛克的后代,5只是纯正的蒙古羊后代。内蒙古大学近日披露,该校吴应积教授的研究团队利用精原干细胞移植技术取得世界首例绵羊精原干细胞移植产生供体公绵羊的后代。精原干细胞移植是一种以雄性生殖系为基础的新的哺乳动物繁殖技术,在精原干细胞精子发生过程研究、医学研究及转基因     

哺乳动物精原干细胞体外培养研究进展

作者综述了哺乳动物精原干细胞体外培养的研究现状、程序及方法,并从细胞化学、免疫组织化学等方面客观评定精原干细胞体外培养的形态、结构及特征,另外,还对其体外的纯化、鉴定、应用和未来的发展方向结合自己的试验体会作了逐一说明,旨在为其体外长期培养及建系提供条件.     

动物生殖细胞移植术和睾丸组织异种植皮术的研究进展

哺乳动物精子的发生是精原干细胞增殖和分化的过程.在雄性动物的生殖周期中,精子的产生的数量是无限制的,这种系统的基础就是精原干细胞具有一种独有的自我更新的潜能和最终形成精子的子细胞具有的分化能力.     

GDNF对体外培养小鼠精原干细胞增殖的影响

为了研究胶质细胞原性神经营养因子(GDNF)对体外培养小鼠精原干细胞增殖与分化的影响,试验采用差速贴壁法分离小鼠精原干细胞(SSCs)和支持细胞(sertoli),以sertoli为饲养层接种精原干细胞,用免疫荧光染色法对精原干细胞进行鉴定,并将精原干细胞分为2组,试验组培养基中加入GDNF,对照组不加,测定精原干细胞的生长增殖情况,检测精原干细胞生长周期。结果表明:共培养6,9,12,15天时,试验组精原干细胞吸光度值明显高于对照组(P<0.05或0.01)。随着共培养时间的延长,试验组精原干细胞S期染色质含量逐渐增多,然后又逐渐下降,开始另一个分裂周期;与试验组比较,对照组精原干细胞S期染色质含量增长缓慢(P<0.05)。说明GDNF能促进体外分离培养的小鼠精原干细胞的更新增殖。     

野外采集牦牛睾丸组织的冷冻保存及其生精细胞的复苏培养研究

采用玻璃化冷冻方法对野外采集的牦牛睾丸组织进行冷冻,通过HE(hematoxylin-eosin)染色分析发现玻璃化冷冻后的牦牛睾丸组织曲细精管结构保存较完好,曲细精管可见大量形态完好的各类生精细胞。采用台盼蓝染色检测细胞活率,发现冷冻复苏后细胞活率可达80.20%。分别通过生精细胞和精原干细胞标志蛋白DDX4和GFRA1免疫荧光染色发现复苏后培养14天后的生精细胞和精原干细胞的数量明显减少。通过RT-qPCR对复苏后不同实验处理组牦牛睾丸细胞标志基因的表达分析,发现培养30天的生精细胞中的精原干细胞标志基因Thy1和UCHL1的表达量显著增高。因此,玻璃化冷冻保存的牦牛睾丸组织中曲细精管及其生精细胞得到了较好的保护,该方法对于其他哺乳动物生精细胞的长久有效保存具有重要的参考价值。     

精原干细胞移植技术研究进展

精原干细胞位于雄性哺乳动物体内曲细精管生精上皮基膜内，在复杂且高度有序的精子发生过程中占有极其重要的地位。它一方面自我更新生成新的干细胞；另一方面源源不断的增殖分化形成各阶段的生殖细胞直至精子；更重要的是它能向下一代传递遗传信息。1994年，美国宾夕法尼亚大学兽医学院的Brinster等人首次将可育供体雄性小鼠的精原干细胞注射到不育小鼠的曲细精管中，结果受体鼠产生了具有受精能力的精子并产出了正常后代［2，3］。1996年，他们又将大鼠的精原干细胞移入10只免疫缺陷性小鼠曲细精管中，在小鼠的睾丸中产生了大鼠的精子［4］；更另人震惊的是，在1999年同类实验中Brinster等人又使得兔和狗的精原干细胞在小鼠睾丸中增殖并分化。这些成果被视为“跨物种产生精子中的重大突破”。在干细胞领域稳定向前发展的今天，精原干细胞移植技术的发展和应用为深入探讨精子发生、干细胞状态的维持、自我更新的方式、自增殖及分化过程的启动和调控等的生物学机制的研究提供了优良的途径，可能成为一种极为有用的生物方法。本文简要概述了这项技术的主要方法以及最新进展和成果。     

精原干细胞标记及活体追踪的研究进展

研究表明,精原干细胞（spermatogonial stem cells,SSCs）具有重建不育个体精子发生的能力。采用细胞标记试剂标记精原干细胞,可以活体追踪移植至睾丸的精原干细胞命运,即在发育过程中的增殖、运动及分化情况。标记和追踪精原干细胞将有助于了解精子发生恢复的机理并选择最优的移植策略。     

牛精原干细胞研究进展

精原干细胞（SSCs）是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基底膜上,具有自我更新和定向分化的潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命过程中进行自我更新并能将基因传递至子代的惟一成体干细胞.本文在阐述精原干细胞发生的基础上,通过分析犊牛精原干细胞分离纯化、培养鉴定、冷冻保存和诱导分化的现状,分析了牛精原干细胞研究领域目前存在的主要问题,展望了牛精原干细胞的应用前景,以期为精原干细胞的研究提供参考.     

精原干细胞体外培养的研究进展

精原干细胞是体内唯一的能在细胞水平进行识别并增殖、分化及调控的成体干细胞,是位于精曲小管基膜上,既能自我更新,维持自身群体数量恒定,又能定向分化产生精母细胞的一类原始精原细胞,其前体是原始生殖细胞(primord ial germ cells,PGCs)。近年来,随着精原干细胞鉴定,体外培养及冻存等技术的发展,精原干细胞的应用成为可能。文章对精原干细胞形态特征、分离纯化、体外培养及影响因素等进行综述。1精原干细胞的形态、特性及其增殖分化精原干细胞相对数量极少,仅占生殖细胞的0.02%~0.03%。睾丸中大部分的精原细胞并非干细胞,而是处于分化…     

精原干细胞移植技术研究进展

精原干细胞位于雄性哺乳动物体内曲细精管生精上皮基膜内，在复杂且高度有序的精子发生过程中占有极其重要的地位，它一方面自我更新生成新和干细胞，另一方面源源不断的增殖分化形成各阶段的生殖细胞直至精子，更重要的是它能向下一代传递遗传信息，1994年，美国宾夕法尼亚大学《兽医学院的Brinster等人首次将可育供体雄性小鼠的精原干细胞注射到不育小鼠的曲细精管中，结果受体鼠产生了具有受精能力的精子并产出了正常后代^[2,3]，1996年，他们又将大鼠的精原干细胞移入10只免疫缺陷性小鼠曲细精管中，在小鼠的睾丸中产生了大鼠的精子，更另人震惊的是，在1999年同类实验中Brinster等人又使得兔和狗的精原干细胞在小鼠睾丸中增殖并分化，这些成果被视为“跨物种产生精子中的重大突破”，在干细胞领域稳定向前发展的今天，精原干细胞移植技术的发展和应用为深入探讨精子发生，干细胞状态的维持，自我更新的方式，自增殖及分化过程的启动和调控等的生物学机制的研究提供了优良的途径，可能成为一种极为有用的生物方法，本文简要概述了这项技术的主要方法以及最新进展和成果。     

精原干细胞研究进展

精原干细胞（spermatogonial stem cells,SSCs）是各种雄性动物生殖细胞的母细胞,是一群具有自我更新和分化潜能的细胞,并且在雄性个体中精原干细胞与下一代的遗传背景密切相关。因此,精原干细胞在细胞生物学、医学、转基因等领域的研究有着广阔的应用前景。文章根据国内外相关研究进展,对精原干细胞的生物学特性、分离纯化与培养、移植等作一概述。     

精原干细胞移植的研究进展

精原干细胞移植原理与其它细胞移植原理相似,主要利用显微注射法,将供体的精原千细胞移入受体睾丸内,使其能够继续进行生精过程。结合精原干细胞分离培养、纯化、冷冻,该技术开创了基因工程和家畜生产的新途径。本文对精原干细胞的分离培养、纯化、冷冻,以及同源移植和异源移植进行了简要综述。     

精原干细胞体外培养及影响因素

影响精原干细胞体外培养的主要因素有温度、饲养层细胞、细胞因子包括分化抑制因子(LIF)和生长因子(SCF和bFGF)等。本文拟对其研究进展和精原干细胞体外培养所涉及到的精原干细胞的鉴定和分离纯化技术的研究进展进行综述。     

小鼠精原干细胞的形态结构及其细胞化学和免疫组化特性

应用光镜、电镜观察了 ７～８ ｄ 小鼠精原干细胞的形态结构特点;应用细胞化学、免疫组织化学方法研究了体外培养小鼠精原干细胞的细胞化学和免疫组织化学特性。结果显示,精原干细胞呈圆形,直径（９±１） μｍ ,核大,呈圆形或轻微卵圆形,胞质较少;核内常染色质占绝对优势,异染色质极少;胞质内核糖体、线粒体较丰富,其他细胞器不发达;精原干细胞 Ａ Ｋ Ｐ染色呈阳性或强阳性,胞质内脂滴很少或没有;精原干细胞表达特异的 ｃｋｉｔ 受体;体外培养的小鼠精原干细胞常呈不完全的胞质分裂,细胞间由细胞间桥相连而呈链状或团状的细胞群丛,细胞群常由偶数细胞组成。     

哺乳类精原干细胞体外培养影响因素

精原干细胞为体内天然干细胞，如能体外培养建系或建立其长期培养系统，将会极大地促进精原干细胞移植，转基因等技术的实际应用，也会给体外研究细胞的发育分化提供很好的材料，影响精原干细胞外存活，增殖的因素很多，该文主要综述了基本培养基的选择、血清和添加剂，激素和维生素的应用及SCF、LIF、bFGF等生长因子的作用等，以期促进精原干细胞的研究。     

奶水牛精原干细胞异种移植进展

中国是水牛数量居第二位的国家,与牛相比,水牛的基因改造尤其是遗传进展更依赖于新兴动物繁殖生物技术,特别是在干细胞领域,其中精原干细胞介导的转基因技术为水牛的遗传改良带来了广阔的发展空间,而精原干细胞移植是检测精原干细胞功能活性的一项重要技术手段。本文对畜禽精原干细胞移植进行了综述,特别对近几年奶水牛精原干细胞方面的研究进行了重点介绍。尽管跨物种的精原干细胞移植没有提供直接的实际应用,但是它是对分离得到的生殖细胞进行干细胞潜能评定的唯一生物模型,同时有利于探索雄性生殖系干细胞和睾丸生物学功能,以及雄性不育的潜在原因。