多糖对烟草花叶病毒（TMV）的抑制作用研究

【目的】筛选对烟草花叶病毒(TMV)有良好抑制作用的多糖。【方法】采用半叶法,测定了云芝、金针菇、姬松、杏鲍菇、双孢蘑菇、灵芝、猪苓菌、蜜环菌、黑木耳、虫草、白桦茸和平菇等12种真菌多糖在枯斑三生烟(Nitcotiana tabacumvar.Samsun NN)上对TMV的抑制作用,并测定了其对烟草(普通烟NC-89)生长的影响。【结果】云芝多糖、猪苓菌多糖、虫草多糖和蜜环菌多糖对TMV均有较好的抑制效果,其中1g/L云芝多糖对TMV具有良好的预防作用,提前48h多糖处理的预防效果高达92.12%。云芝多糖对烟草具有促生作用,1g/L云芝多糖处理烟苗的地上部鲜质量和最大叶面积增效最为显著,分别较对照提高30.98%和19.74%。田间小区试验表明,经云芝多糖处理后,NC-89烟株健壮整齐,烟叶浓绿光滑,茎围、最顶部叶片面积、产量及上中等烟比例均有所增加,其中1g/L云芝多糖处理烟株的最顶部叶面积、茎围和上中等烟比例分别较对照增加13.51%,9.88%和17.20%。【结论】云芝多糖能有效抑制TMV,并可促进烟苗生长,提高烟叶产量及品质。     

抗烟草花叶病毒(TMV)转基因烟草的初步选育

 病毒病是云南烤烟生产上的重要病害,目前尚无有效的防治手段,本研究试图采用植物基因工程技术,将TMV54KD蛋白基因转人云南烤烟栽培品种,获得抗TMV的转基因植株,减少由TMV危害造成的重大经济损失,用携带植物抗病毒基因表达载体的根癌农杆菌LBA4404菌株转化云南烤烟栽培品种红花大金元,获得了大量转基因植株,戴体质粒上含有卡那霉素抗性标记基因(NPTII)和CaMV35s启动子控制的烟草花叶病毒(TMV) 54KD蛋白基因,烟草叶片与携带载体质粒的根癌农杆菌共培养后,将其转移到含50μg/ml卡那霉素(Km)的MS+2.0mg/m16-BA+0.1mg/LNAA培养基上培养筛选,2-3周后分化出芽,切下小芽转移到含50μg/ml卡那霉素的MS+0.2mg/ml NAA的培养上进一步培养基筛选并使转化体生根,再对生根植株叶片进行Km抗性鉴定,结果表明,Km抗性标记基因(NPTII)在烤烟植株中已得以表达,间接证明TMV54KD蛋白基因已整合到烤烟植株的基因组中,抗性鉴定结果表明,转基因植株对TMV摩擦接种表现出明显抗性,选择抗性植株,单株收种子,以对其后代抗性的遗传稳定性研究.     

新疆番茄烟草花叶病毒(TMV)株系分化研究

对新疆番茄281份样本进行病毒种类鉴定,结果表明,100%的样本感染了烟草花叶病毒(TMV).对其中52个具有代表性的TMV分离物,按照番茄抗TMV的基因类型划分为0株系、1株系、1-2株系、1株系+2^a株系、2株系+2^a株系和1-2株系+2^a株系6种类型,其感染率分别为1.9%、61.5%、1.9%、26.9%、1.9%和5.8%,表明危害新疆番茄的TMV存在着株系分化现象,并已出现了强株系.     

天然产物抗烟草花叶病毒(TMV)研究进展

综述了来自植物、微生物、动物和海藻的天然产物抗烟草花叶病毒(TMV)的效果,并对在生产实践中利用不同来源的天然产物防治烟草花叶病毒病进行了展望。     

植物源抗病毒制剂VA对烟草花叶病毒（TMV）体外钝化作用的？…

用植物源抗病毒制剂ＶＡ与烟草花叶病毒（ＴＭＶ）混合,经枯斑半叶法接种,结果证明,ＶＡ对ＴＭＶ有较强的体外钝化作用,体外钝化后的枯斑抑制率为８０．０％;用苯酚氯仿法提取ＴＭＶ的核酸后,按一定的比例与ＶＡ混合,经枯斑半叶法接种测得枯斑抑制率为４３．８％～７７．９％;ＴＭＶ与ＶＡ混合后用ＲＮａｓｅ处理,测得侵染率为７８．６％,比未用ＲＮａｓｅ处理的对照降低２１．４％,由此说明ＶＡ具有一定的体外脱衣壳作用     

17个烟草品种（系）的烟草黄瓜花叶病毒抗性鉴定

烟草花叶病对烟草种植危害极大,推广应用高抗病品种是有效应对烟草花叶病危害的有效途径。为湖南省烟区筛选对烟草黄瓜花叶病抗性较好的烟草品种（系）提供参考,以17个烟草品种（系）为材料,对其进行烟草黄瓜花叶病毒（CMV）的人工接种,并于病毒接种后第14天、第21天、第28天、第38天调查其烟草黄瓜花叶病发病情况,鉴定其对烟草黄瓜花叶病的抗性。结果表明：17个烟草品种（系）在病毒接种后第14天的CMV抗性均表现为抗病。病毒接种后第21天,CZ-67、HC2030、C81-3-5、CZ-66的CMV抗性表现为抗病,YZ2008等12个品种（系）的CMV抗性表现为中抗;病毒接种后第28天,CS08、CS12、YZ10、M87的CMV抗性表现为感病,CZ-67等12个品种（系）的CMV抗性表现为中感;病毒接种后第35天,YZ2008、K326(CK1)、HC2032、CS12、YZ09、Ti245的CMV抗性表现为中感;CZ-67、CS08、云烟87(CK2)、HC2030、SY146-1、YZ10、M87、C81-3-5、CZ-66、G28的CMV抗性表现为感病。CS19对CMV的抗性在病毒接种后...     

烟草花叶病毒系统诱发抗性的研究

用烟草花叶病毒诱发接种4种枯斑寄主:心叶烟、三生NN烟、珊西NC烟和蔓陀罗,可使接种植物对烟草花叶病毒、烟草蚀纹病毒及马铃薯X病毒的侵染表现很强的诱发抗性.这种抗性主要表现为处理的枯斑直径及枯斑数目比对照减少50%～75%.诱发抗性具有非特异性和广谱性.抗性在诱发接种后2～4天开始出现,7～8天达到最高抗性水平,且至少保持25天以上.     

烟草不同时期接种烟草花叶病毒后的种子带毒率比较

烟草种子带毒一直对烟草生产危害较大.烟草品种K326、云烟85和云烟87在不同时期分别接种烟草花叶病毒(TMV)后收集烟株种子,采用三抗体夹心法(TAS-EKLISA)检测TMV带毒情况,结果表明,接种TMV后病株上采收的种子的平均带毒率超过50%,但不同时期接种和不同品种间烟草种子带毒率存在明显差异.     

侵染姜的烟草花叶病毒的鉴定

从莱芜市莱城区大田表现严重花叶的姜上分离到一种病毒,接种到１３ 科４３ 种鉴别寄主上,能侵染５ 科２５ 种植物。该病毒分离物的钝化温度为９５ ～９８ ℃,稀释限点为１０ － ７ ～１０ － ８ ,体外存活期为１２８ｄ 以上。提纯病毒呈典型的核蛋白吸收,最大吸收峰为２５８ｎｍ ,最小吸收峰在２４３ｎｍ , Ａ２６０／ Ａ２８０ ＝ １ ．３２ 。病毒外壳蛋白分子量为１７ ．３ Ｋ Ｄ,杆状粒体长度为３００ｎｍ ,该分离物与烟草花叶病毒的抗血清有明显的阳性反应。根据这些特性,该病毒分离物属于烟草花叶病毒属的烟草花叶病毒。     

侵染西瓜的烟草花叶病毒的鉴定

从莘县一株表现蕨叶、花叶的西瓜上得到了分离物Ｗ－ＳＸ。Ｗ－ＳＸ经人工接种可侵染茄科、葫芦科、苋科、藜科的１７种（或品种）植物。钝化温度为９２℃，稀释限点１０－７～１０－８。病毒汁液在室温下保存５０ｄ仍有侵染活性。Ｗ－ＳＸ不能由蚜虫传播。病毒粒子杆状，长３００ｕｍ。提纯病毒的最大吸收在２６０ｕｍ，最小吸收在２４６ｕｍ。Ａ２６０／Ａ２８０＝１．２９９。在琼脂中与烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的抗血清产生明显的沉淀线。这些结果表明Ｗ－ＳＸ应为ＴＭＶ的一个分离物。ＴＭＶ在所有西瓜病样分离物中占８．６５％。这是ＴＭＶ侵染西瓜的首次报道，其对西瓜的为害性有待于进一步研究。     

应用DIBA法检测侵染辣椒的TMV与CMV的研究

采用斑点免疫结合法(Dot Immunobinding Assay,DIBA)检测侵染辣椒的TMV与CMV均具有极强的专化性.在可检测的感染叶片的汁液稀释范围内,用TMV与CMV的抗血清分别交叉检测CMV与TMV,均未出现阳性反应.检测感染叶片粗汁液的最高稀释度TMV为1:5 120;CMV为1:2560.利用3种不同封闭系统[TBST,TBST+3%牛血清白蛋白(3%BAs),TBST+3%酪蛋白(3%Casein)]检测,比较结果表明;采用TBST+3%BAS与TBST+3%Casein封闭效果较好:与免疫电镜(ISEM)检测TMV与CMV相比较,DIBA敏感性分别高出15与7倍.     

菌克毒克防治烟草花叶病效果研究

研究菌克毒克对烟草花叶病的防治效果,结果表明:菌克毒克(8%宁南霉素水剂内销品)对烟草花叶病有较好的防治效果,平均防治效果达66.7%,可促进烟株的生长,经济效益显著。     

高效靶向降解烟草花叶病毒核酸的dsRNA筛选与大量制备

[目的]筛选高效靶向降解烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的dsRNA,实现其大量制备,并探究其作用机制.[方法]以TMV编码的CP、MP、RdRP功能基因为靶序列,体外转录合成相应的dsRNA,浸润本氏烟(Nicotiana benthamiana),24 h后接种TMV,于接毒后2、3...     

安顺烟区苗期烟草普通花叶病的带毒率检测

为了解安顺烟区苗期烟草普通花叶病（TMV）的带病情况,于2010-2013年应用抗原直接包被 ELISA 法,对安顺烟区所有烤烟育苗点6247个烟苗样品进行了 TMV 检测。结果表明,所有检测烟苗样品均有一定的带毒率,不同年度间烟苗 TMV 阳性检出率有较大差异,且烟苗带毒率与育苗集中度、检测时期、剪叶次数等密切相关。育苗集约化程度提高、苗龄和剪叶次数增加,烟苗 TMV 阳性检出率提高,感染TMV 的风险增大。     

烟草漂浮育苗剪叶传播烟草花叶病毒的特点

 采用三抗体夹心法（TAS-ELISA）研究了烟草漂浮苗中烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus, TMV）通过剪叶操作传播的特点。试验表明,剪一次TMV新鲜病叶的带毒剪刀连续剪10棵健康烟苗,剪叶后第30 d花叶病的平均发病率为12.7%。苗盘试验表明, 每剪1盘苗后用漂白粉消毒剪刀1次的情况下,在每盘苗加入6株TMV病苗,剪刀剪叶1次,剪叶后第10 d平均发病率为13.0%~18.3%, 发病株数增加3.5~4.9倍,无症烟苗移栽后15 d,花叶病发病率可达65%~80%。在第1次剪叶前7 d,每盘苗挑选6株用稀释1.0×10^-6倍的TMV病叶汁液摩擦接种,第1次剪叶后13 d（接种后20 d）留下病苗和拔走病苗处理带毒率分别为57.8%和37.8%。第3次剪叶后13 d（接种后47 d）带毒率都达到95.6%。在存在病株的情况下,剪叶传播烟草普通花叶病的效率很高。人工气候箱中,剪叶接种1.0×10^-6 TMV病叶汁液,接种后11~12 d TAS-ELISA可检测出阳性,接种后20~24 d表现花叶症状。     

ChIFN-α基因在烟草中的表达及转基因烟草对TMV的抗性

动物α干扰素具有高效广谱的抗病毒作用,通过农杆菌介导法将35S驱动的干扰素基因ChIFN-α转化烟草,Southern杂交和Western杂交进行目的基因的转化、表达检测,重组蛋白的数量通过ELISA测定,对获得的转基因烟草植株进行TMV接种实验,结果表明ChIFN-α基因的转化赋予了转基因烟草对TMV的抗性,进一步的荧光定量PCR差异表达检测结果表明,该抗性可能与转基因烟草体内防卫基因PR-la、抗病N基因和信号转导MAPK基因受到上调表达有关。     

烟草花叶病毒的检测方法研究进展

烟草花叶病毒(TMV)的寄主范围相当广泛,给农业生产带来重大损失,加强对该病毒的检测具有重要意义。在查阅近年来国内外文献的基础上,总结了对烟草花叶病毒的检测方法如直接观测法、电子显微镜检测法、生物学测定法、血清学检测和分子生物学检测法等的研究进展。随着植物种质资源的引进和生态条件的改变,对检测TMV方法提出了更高的要求,因此在实际应用中要综合运用各种检测方法提高检测的准确性。     

烟草品种对普通花叶病的田间抗性鉴定

[目的]进一步了解中烟90、黄筋蔸、OX2028、RG8、V2、云烟201、云烟87烟草品种对普通烟草花叶病的感病性。[方法]大田抗性鉴定。[结果]中烟90、黄筋蔸、OX2028、RG8、V2、云烟201、云烟87烟草品种对普通烟草花叶病病情指数分别为40.33、15.50、0.17、20.50、26.50、0.33、13.33。[结论]OX2028和云烟201可进行示范性推广。     

贵州烟草漂浮苗的花叶病毒带毒率

为了培育无病毒烟苗,做好预防工作及应急补救措施,降低烟草花叶病毒(TMV)大田危害风险,采用酶联免疫法对2011年贵州毕节、赫章、松桃、盘县、普安、思南、大方、金沙、遵义、务川、凤冈、德江12个县市的烟草漂浮苗916个样品TMV带毒率进行了检测.结果表明,大方、金沙、遵义、务川、凤冈和德江6县烟苗的TMV检出率为0,毕...