葡萄花器官体细胞胚的诱导和植株再生

通过探索感病葡萄体细胞胚发生途径建立再生体系,为葡萄抗病基因转化提供受体材料与理论依据。通过对小孢子显微观察确定最佳取样时期,取雌蕊、雄蕊和小花蕾作为外植体,用2种消毒方法消毒后,对比污染率,接种于4种不同的愈伤诱导培养基中,将诱导出的愈伤全部转移到体胚诱导培养基中,对体胚的不同发育时期进行观察,并比较4种不同培养基对...     

柑桔体细胞胚胎高频发生及再生植株的研究

柑桔体细胞胚胎高频发生及再生植株的研究＊洪勇何永睿陈善春张进仁（中国农业科学院柑桔研究所重庆４００７１２）基因工程的快速发展为柑桔品种改良开辟了一条新途径,但在转基因过程中,较低的出芽频率及难以生根致使实际成株率并不高［１］,从而影响了基因工程研究进...     

德国核桃‘No.120'幼胚胚轴与子叶体细胞胚胎发生及其植株再生

核桃 (Juglansregia)‘No . 12 0’品系授粉 7～ 8周的幼胚胚轴与子叶在含不同植物生长调节剂组合的诱导培养基上培养 4周后转移至无植物生长调节剂的继代培养基上培养 ,不同发育时期的体细胞胚直接形成于胚轴与子叶表面。子叶与胚轴分别在KT 2mg/L BA1mg/L IBA 0 .0 1mg/L与 2 ,4 D 2mg/L KT 1mg/L的组合的诱导下体细胞胚胎发生频率最高。体细胞胚经 3～ 5℃低温处理 2个月 ,31.6%的体细胞胚能发育成正常生长的植株     

河套蜜瓜子叶诱导形成体细胞胚的研究

 以河套蜜瓜成熟种子子叶为外植体, 研究体细胞胚途径再生培养的主要影响因子, 并对体胚发生过程进行了观察。结果表明; 体细胞胚发生对培养基糖源浓度要求较高, MS附加60 g/L的糖源效果最好; 最佳植物生长调节剂组合为2,4-D 2.0 mg/L + 6-BA 1.0 mg/L; 1日苗龄子叶为最佳外植体源; 在诱导培养基上经暗培养1周、光培养1周, 再转入胚发育培养基, 有利于成熟胚的产生; 体细胞胚可产生在愈伤组织内部或表面、外植体表面、不定根上及外植体维管束的束中分生组织等部位。     

无子西瓜郑抗4号的体细胞胚诱导及植株再生(英文)

以无子西瓜(CitrulluslanatusMansfeld)郑抗4号无菌苗子叶为外植体,进行了体细胞胚发生及植株再生的研究,结果表明,无菌苗应先进行3d暗培养,然后采取光照16h/d和黑暗8h/d培养3d;将子叶的叶面朝下放置于培养基上的愈伤组织诱导率高于叶面朝上的培养方式;子叶诱导胚性愈伤组织的最适培养基配方为MS+6-BA2.0mg/L+KT1.0mg/L+GA31.0mg/L;诱导需要在黑暗条件下启动,进行7d暗培养,而生长分化于光照16h/d和黑暗8h/d条件下培养7d;继代3次得到的胚性愈伤组织最多;最适生根培养基配方为1/2MS+IBA0.3mg/L。体细胞胚胎诱导率最高为25%。胚性愈伤组织经进一步培养发育为成熟的体细胞胚胎,生根成为完整植株。     

‘过山香’香蕉多芽体的诱导及其体细胞胚的发生

 以我国重要香蕉种质‘过山香’ (AAB) 为材料, 研究了香蕉多芽体诱导、多芽体茎尖薄切片即分生组织性的表层结构物( scalp) 愈伤组织诱导和体细胞胚发生的合适条件。结果表明, 该品种单个不定芽茎尖在P4培养基(含BAP 100 μmol·L ^{- 1}和IAA 1 μmol·L ^{- 1} ) 中继代5个周期后可诱导获得类似花椰菜结构的多芽体。从30 μmol· m ^{- 2} ·s^{- 1}光强, 光/暗周期(16 h /8 h) 培养的多芽体所获得的scalp在添加2,4-D 5μmol·L ^{- 1}和Zeatin 1 μmol·L ^{- 1}的愈伤组织诱导培养基中黑暗培养, 45 d后愈伤组织诱导率可达97.6%。诱导20 d后黄色分生小球体类结节状愈伤组织开始发生, 90～120 d后在分生小球体局部可获得白色或浅黄色松散的胚性愈伤组织(诱导率为17.5% ) 。从胚性愈伤组织诱导的体细胞胚在成熟培养基上培养60 d后体胚萌发率和植株转化率分别为14.5%和11.1%。     

猕猴桃体细胞胚状体的诱导及植株再生

叶片及叶柄在NM+2,4—D_(0.5-2.0)+ZT_(0.2-2.0)+3％蔗糖及PH5.8的培养基上诱导产生胚性愈伤组织,并获得了分化胚状体及幼株的能力。胚性愈伤组织在NM+ZT_(0.5-2.0)+3％蔗糖培养基中分化胚状体,胚状体进一步发育并萌发成幼株。NM基本培养基适合壮苗培养。     

欧洲葡萄体胚诱导及农杆菌介导的遗传转化研究

以欧洲葡萄(Vitis vinifera L.)品种无核白(‘Thompson Seedless’)、佳利酿(‘Carignane’)、红地球(‘Red Globe’)的雄蕊、雌蕊和花蕾为外植体,对花器官体细胞胚诱导及农杆菌介导的转芪合成酶基因进行研究。结果表明:所采用的5种胚性愈伤组织诱导培养基中,MC培养基较适于雄蕊胚性愈伤组织的诱导,无核白、佳利酿和红地球雄蕊的胚性愈伤组织诱导率分别为1.7%、0.3%和11.8%;PIV培养基可诱导无核白和佳利酿雌蕊胚性愈伤组织形成,诱导率分别为4.0%和3.2%,而红地球雌蕊在MC培养基上诱导率最高,达5.6%;仅红地球的花蕾在MS1培养基上可诱导产生胚性愈伤组织,诱导率为0.5%。改良X6液体培养基较有利于次生胚的诱导;B培养基有利于体细胞胚萌发成苗。转基因材料经抗性筛选和植株再生,获得了2株无核白抗性苗,经PCR和PCR-Southern检测表明,目的基因被整合到转基因植株中。     

唐菖蒲体细胞胚发生和植株再生

唐菖蒲体细胞胚发生和植株再生师素恩（译）一、概述在ＭＳ培养基上获得了４个品种的唐菖蒲的松脆胚性愈伤组织和体细胞胚。培养基附加不同浓度的生长素，外植体如下：球茎切片、幼叶基部和整叶，完整的小植株。体细胞胚转移到无激素的ＭＳ培养基上后再形成小植株。所有体...     

朱顶红‘Red Lion’胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

以‘Red Lion’朱顶红(Hippeastrum vittatum)的鳞片为外植体进行体细胞胚诱导和形态学与组织学的胚性鉴定。结果表明,鳞片在MS+2 mg·L~(-1) BA+1 mg·L~(-1) NAA+2 mg·L~(-1) TDZ+30 g·L~(-1)蔗糖培养基上胚性愈伤组织诱导率可达90.63%,而不添加TDZ的培养基上胚性愈伤组织诱导率为0。胚性愈伤组织可呈白色松散、透明膨松、透明致密、微棕色松脆和翠绿色松脆等类型;非胚性愈伤组织呈微棕色致密状。胚性愈伤组织中可明显观察到球形胚、心形胚和棒状胚3个发育时期。体细胞胚在不添加植物生长调节剂的MS培养基上可发育形成芽和根,长成完整小植株。     

山核桃间接体细胞胚发生和植株再生

 以山核桃（Carya cathayensis Sarg.）自然授粉后10周的幼胚为外植体,对影响胚性愈伤组织和体胚发生的主导因子（基本培养基、植物生长调节物质等）进行了比较分析;对影响体胚萌发的脱水处理时间进行了比较;并采用石蜡切片法对幼胚脱分化产生胚性愈伤组织及体胚发生发育过程进行了组织细胞学观察。结果表明,幼胚胚轴和子叶接种在基本培养基1/2 MS上,胚性愈伤组织诱导率显著高于其它处理,达45.3%。接种于基本培养基DW中的幼胚体细胞胚诱导率显著高于其它培养基处理,达16.7%。显微镜下可观察到球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚。培养基添加1.0 mg · L-1 6-BA和0.01 mg · L-1 picloram（氨氯吡啶酸）组合时,胚性愈伤组织诱导率最高,为48.6%;而1.0 mg · L-1 6-BA与0.001 mg · L-1 picloram组合,体胚诱导率最高,为23.6%。体细胞胚发生方式属于间接体胚发生。用饱和Ca(NO3)2 · 4H2O对体胚进行脱水处理,脱水处理3 d后萌发率为39.03%,显著高于对照及其余处理。将脱水处理后的体胚接种至WPM基本培养基中,光照条件下培养,10周后可长成具3 ~ 4片真叶的完整植株。     

猕猴档体细胞胚状体导及植株再生

叶片及叶柄在ＮＭ＋２，４－Ｄ０．５－２．０＋３％蔗糖及ＰＨ５．８的培养基上诱导产生胚性俞伤组织，并获得了分化胚状体及幼株的能力。胚性愈伤组织在ＮＭ＋ＺＴ０．５－２．０＋３％蔗糖培养基中分化胚状体，胚状体进一步发育并萌发成幼株。ＮＭ基本培养基适合壮苗培养。     

外源褪黑素对臭氧胁迫下‘赤霞珠’葡萄叶片光合作用的影响

以盆栽‘赤霞珠’葡萄为试验材料,浇施浓度为100 nmol·L~(-1)的外源褪黑素(melatonin)后,在110 n L·L~(-1)臭氧浓度胁迫下,测定葡萄叶片气体交换参数和叶绿素荧光快速诱导动力学曲线,并结合叶绿素荧光淬灭分析葡萄叶片光合性能的变化。结果表明:浇施褪黑素提高了臭氧胁迫下叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量以及叶绿素a/b的比值,提高了叶片净光合速率(P_n)和叶片单位面积有活性反应中心的数量(RC/CSm),以及捕获的激子将电子传递到Q_A以后的其他电子受体的概率(Ψ_o),从而缓解了臭氧胁迫下的光抑制程度。结论:外源褪黑素缓解了臭氧胁迫下葡萄叶片叶绿素的降解,通过调节光系统的能量分配,缓解了臭氧胁迫对光合作用的伤害。     

梅花不同外植体离体培养及体细胞胚诱导植株再生

以梅花品种‘雪梅’和‘绿萼’的叶片、叶柄、茎段及未成熟子叶为外植体进行离体培养,探讨了体胚发生途径与植株高效再生方法。结果表明,成熟组织再生能力低,不定芽再生困难。在添加1.0mg·mL-1BA,1.0mg·mL-1NAA,1.0mg·mL-1IBA的1/2MS培养基中,‘雪梅’和‘绿萼’未成熟子叶的体胚诱导率最高,分别为40.4%和25.3%;同时将初生胚转移至新鲜培养基上可产生大量次生胚。在添加0.5mg·mL-1BA,0.1mg·mL-1TDZ和1.0mg·mL-1IBA的1/2MS基本培养基中,体细胞胚发育成完整植株的频率较高,‘绿萼’达26.7%,‘雪梅’达23.8%。再生植株成功移栽至温室且生长良好。     

多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

 以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2, 4-D 0.5～2 mg·L-1的1/2 MS培养基上暗培养30 d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ 5～20 mg·L-1的1/2 MS培养基上光培养20 d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ 10 mg·L-1和GA3 0.1 mg·L-1的诱导培养基上暗培养20 d后,在含麦芽糖的无激素培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。     

‘无核白鸡心’葡萄栽培技术

‘无核白鸡心’葡萄为欧亚种。原产美国,2000年引入新疆哈密市。经过12年的种植。现有栽培面积400hm^2。除鲜食外,由于其果刷短、易掉粒,很适合制葡萄干．有天然的清香味．很受东南亚及新疆周边国家消费者的喜爱,市场销售前景很好,栽培面积每年都在增加,已经成为哈密市制大粒、无核、有香味葡萄干的最佳品种。     

1-MCP对‘无核白’葡萄果实的影响

以新疆‘无核白’葡萄品种为材料,研究了1-甲基环丙烯(1-MCP)对葡萄果实的影响。结果表明:0.1μL/L的1-MCP浓度是提高葡萄果粒耐拉力的最佳浓度。1-MCP可明显提高葡萄果粒耐压力,最佳浓度是1μL/L,其次是0.1μL/L。1-MCP处理在贮藏后期可提高葡萄果实可溶性固形物含量。葡萄果实在贮藏期间果粒耐拉力和耐压力并非持续下降,中间都有2次上升过程,其原因尚待研究。     

褪黑素对设施延后栽培‘红地球’葡萄果实品质的影响

为探明褪黑素对鲜食葡萄果实品质的影响,并为褪黑素改善果实品质及其在生产中的应用提供理论依据。以‘红地球’葡萄品种为试验材料,采用设施延后栽培模式,在葡萄转色前,采用50、100、200、500μmol/L褪黑素水溶液进行全树喷施2次,以喷清水作为对照,研究不同浓度褪黑素处理对葡萄果实形态指标(单粒重、纵横径和果形指数)、果皮色泽(L*、a*、b*)、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、可溶性糖含量、糖酸比、维生素C含量以及酚类物质(总酚、黄酮和花色苷)含量的影响。结果表明:不同浓度褪黑素处理间的果实品质各指标(果形指数、果皮色泽除外)与对照间存在显著性差异,褪黑素处理可以显著提高果实单粒重、纵径,增加果实中可溶性固形物含量、可溶性糖含量和糖酸比,并且有利于果实中酚类物质(总酚、黄酮和花色苷)积累,降低果实横径和可滴定酸含量;尤以100μmol/L褪黑素处理与对照间差异最大、效果最明显。综合分析认为,在葡萄转色前喷施褪黑素,可以改善设施延后栽培‘红地球’果实品质,其中以100μmol/L褪黑素处理对改善‘红地球’葡萄果实品质效果最好。     

红姜花体细胞胚胎发生及植株再生的研究

以红姜花（Hedychium coccineum）的花丝和花药为外植体,通过体细胞胚胎发生途径建立了植株再生体系。结果表明：外植体在MS + 4 mg ? L-1 2,4-D + 4 mg ? L-1 NAA + 1 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 7 g ? L-1 琼脂的培养基上经过120 d诱导出愈伤组织,愈伤组织在MS + 1 mg ? L-1 2,4-D + 0.25 mg ? L-1 NAA + 0.25 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 7 g ? L-1琼脂的培养基上经过继代筛选,获得浅黄色松散易碎的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + B5维生素+ 100 mg ? L-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L-1 脯氨酸 + 100 mg ? L-1麦芽提取物 + 0.02 mg ? L-1 NAA + 0.02 mg ? L-1 TDZ + 0.5 ~ 1.0 mg ? L-1 2,4-D + 45 g ? L-1蔗糖的培养基中通过3个月的悬浮培养,可得到均质稳定的胚性细胞悬浮系（ECS）。胚性悬浮细胞在SH无机盐 + B5维生素 + 100 mg ? L-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L-1脯氨酸 + 100 mg ? L-1麦芽提取物 + 0.25 mg ? L-1 NAA + 0 ~ 0.20 mg ? L-1 TDZ + 45 g ? L-1蔗糖 + 7 g ? L-1琼脂的体胚诱导培养基中培养10 d,可见到白色半透明体胚发生,20 d后体胚发育成熟。当TDZ浓度为0.15 mg ? L-1时,体胚诱导率高达4 500个 ? mL-1 PCV ECS（PCV：细胞密实体积）。在SH无机盐 + B5维生素 + 0.20 mg ? L-1 IAA + 0.25 ~ 1.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖 + 7 g ? L-1琼脂的体胚萌发培养基上,体胚萌发率高达100%。将萌发的体胚转移到1/2MS + 1 g ? L-1活性炭成苗培养基中,进一步发育成正常的再生植株,植株室外栽培成活率达90%。