苹果新品种'鲁丽'离体叶片高效不定芽再生体系的建立

以早熟苹果优良新品种'鲁丽'无菌苗的离体叶片的外植体为试材,采用离体组织培养方法,研究了植物生长调节物质及碳源对叶片高效不定芽再生的影响,以期获得诱导'鲁丽'叶片高效不定芽再生的适宜培养基组成.结果 表明:不依赖于植物生长调节物质的组成,碳源D-山梨醇相比蔗糖明显提高不定芽再生率和平均单位叶片不定芽数.在相同碳源条件下,不定芽再生率和单位叶片不定芽数均表现为塞苯隆(TDZ)高于6-苄基氨基嘌呤(BA),但TDZ和BA之间没有达到差异显著水平;TDZ及BA不同浓度间差异不显著.诱导不定梢绿苗生根,除了较高浓度1.0 mg·L-1 IBA处理外,基本培养基1/4MS比1/2MS显著提高不定梢生根率;在基本培养基1/4MS上,生长素物质吲哚乙酸(IAA)比吲哚丁酸(IBA)显著提高生根率和单株生根数.在基本培养基1/2MS上,IAA和IBA的生根率和单株生根数均差异不显著.IAA比IBA诱导生根速度快,IAA诱导的不定根从绿苗茎横切面直接产生,没有愈伤产生,最高生根率为80.8％,平均单株生根数为4.2条.     

甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的樱桃不定芽离体再生体系,以30～40d苗龄的甜樱桃砧木ZY-1的组培继代苗为试材,取上部幼嫩叶片或不含腋芽的茎段,分别从培养基生长调节剂配比、接种材料类型、叶片接种部位、接种方式以及培养条件等方面进行了不定芽再生技术研究。结果表明,培养基中添加7.0mg/L的6-BA与0.5～1.0mg/L的IBA配比时不定芽再生率和出芽数均较高,TDZ和NAA不适于诱导ZY-1叶片再生不定芽;接种继代苗茎段比叶片再生率高;接种叶片以选择嫩叶横切2刀、远轴面向下接触培养基的方式为好;叶片不同部位处理以带叶柄的基部叶块最易再生;叶片接种后在25℃室温条件下,先暗培养3周再照光,利于不定芽的再生。     

磨盘柿离体叶片愈伤组织发生及不定芽诱导

研究了培养基种类、植物生长调节剂配比、叶片不同部位及培养条件对磨盘柿离体叶片愈伤组织发生及不定芽再生的影响。适宜磨盘柿叶片再生的基本培养基为改良MS(1／2 N),生长调节剂为ZT 4.0~6.0 mg/L或TDZ 1.0mg／L与IAA 0.1 mg／L组合,不宜用BA和高浓度的NAA;ZT和TDZ促进叶片再生的方式不同,前者利于直接再生,后者需降低细胞分裂素浓度,二次诱导使芽点生长成苗;叶片接种后暗培养2~3周再生效率高;叶片不同部位中以叶基部最易再生,其次为叶中部,叶尖最差。     

影响苹果离体培养叶片分化不定芽的因素

影响苹果离体培养叶片分化不定芽的因素丁爱萍，王洪范（中国农业科学院果树研究所，辽宁兴城１２５１００）果树具有童期长和基因高度杂合两大特点，使其传统的有性杂交育种成效较低。生物技术的应用为果树育种开辟了新途径。利用转基因技术已获得近百种植物的转基因植株...     

苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

苹果不同品种叶片再生不定芽能力不同,嘎拉再生能力最强,其次是乔纳金,富士最难再生。用继代培养３ 年以上、当代培养３０ ～５０ ｄ 的试管苗,取顶部第２ ～４ 叶位幼嫩叶片,远轴面向下接触培养基,再生效率高。诱导叶片再生不定芽适宜培养基为ＭＳ＋ ＴＤＺ１．０ ｍｇ·ｌ－ １（ 富士、乔纳金）或ＢＡ５ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＮＡＡ０ ．１ ～０．２ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３５ ．０ ｇ·ｌ－ １ ＋ 琼脂６ ．２ ｇ·ｌ－ １（ 嘎拉） 。     

满园香梨叶片不定芽的诱导

采用正交试验设计研究了不同基本培养基、TDZ、生长素种类及其浓度4个因素组合对满园香梨(Pyrusus鄄suriensisMaxim.cv.Manyuanxiang)离体叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基的种类是影响叶片不定芽再生最重要的因素,其次是生长素的种类。通过叶片不定芽再生频率和平均每叶再生不定芽数分析表明,NN69+TDZ3.0mg/L+IAA0.2mg/L为满园香梨叶片不定芽发生的最佳培养基组合,在该培养基组合上,满园香梨叶片再生率和平均再生芽数分别达到了74.8%和4.40。同一叶片的基部和顶端比中部更有利于不定芽的再生。     

桃叶片再生不定芽的研究

以桃栽培品种曙光、金童5号和甜桃王试管苗叶片为外植体,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类及质量浓度组合、基因型和试管苗继代次数等因素对叶片再生的影响。结果表明,适宜暗培养的培养基为LP+1.5mg·L-1TDZ+0.15mg·L-1NAA;光培养基为LP+0.5mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.3mg·L-1NAA和LP+0.6mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.4mg·L-12,4-D;金童5号和曙光具有较强的再生能力,再生率分别为21.8%和14.5%;曙光和金童5号试管苗继代第1～11次叶片的再生能力与继代前3次愈伤组织相比形成率较高;曙光再生苗在培养基1/2MS+0.5mg·L-1NAA上生根率为100%,平均生根条数为7.9。     

库尔勒香梨叶片不定芽再生诱导的研究

以库尔勒香梨幼叶为外植体,研究基本培养基种类、外源激素浓度、AgNO3浓度及接种叶片的放置方向对叶片不定芽再生的影响。结果表明:培养基的种类是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键,NN69培养基是香梨叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.3mg/L为最佳;附加0.5mg/L AgNO3有利于叶片再生;以叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基更利于不定芽的再生;结合21d暗培养香梨叶片再生频率最高可达到64.3%,再生芽数最高为2.59。     

利用枣离体叶片直接再生完整植株

以冬枣组培苗叶片为材料进行离体再生培养, 通过对再生条件的系统研究, 实现了离体叶片直接再生不定芽并获得完整植株。试验结果表明: 麦芽糖为离体叶片直接再生的适宜碳源; AgNO3可显著提高叶片不定芽再生率和出芽数, 在TDZ 1.0 mg·L - 1 +AgNO3 1.0 mg·L - 1的条件下, 不定芽直接再生率高达97.3% , 出芽数达14.4个。但麦芽糖不适宜继续作为不定芽伸长培养的碳源, 再生的不定芽需在MS+ 蔗糖40 g·L - 1 + 琼脂4 g·L - 1 +BA 1.0 mg·L - 1 + IBA 0.5 mg·L - 1的培养基上进行增殖, 增殖系数为3.2。在IBA1.0 mg·L - 1条件下, 生根率达87.3%。     

油松成熟胚子叶-胚轴段的离体培养与不定芽诱导

以油松成熟胚的子叶-胚轴段为起始外植体,进行离体培养诱导不定芽,以不同浓度的活性炭对油松不定芽进行继代培养。结果表明:子叶-胚轴段可以诱导出不定芽;在1/2MS培养基上附加3 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,外植体不定芽的诱导率达46.7%,平均增殖系数是10,最大增殖系数为24;1/2MS培养基中附加2 mg/L的活性炭对油松不定芽增殖和生长最有利。     

早梨18号叶片不定芽诱导及植株再生的研究

体外建立并扩繁了早梨18号的无性系,以试管苗叶片为外植体.研究了基本培养基、植物生长调节剂组合、暗培养时间对叶片不定芽诱导与植株再生的影响.结果表明:早梨18号叶片在适宜的条件下可发生大量不定芽;暗培养预处理有利于提高叶片的再生频率,以暗培养15 d为宜;叶片在NN 69 6-BA 5.0mg/L NAA 0.5mg/L和NN 69 TDZ 1.0 mg/L IBA0.5 mg/L的培养基上分别获得了56%和54%的叶片再生频率.     

苦瓜离体再生体系建立的研究

以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素组合进行苦瓜离体再生体系的研究。结果表明:种子去壳洗净浸泡5min,用70%酒精浸泡1min,洗净后0.1%HgCl2消毒10min的灭菌效果最好;通过愈伤组织诱导不定芽没有取得成功;利用无菌苗不同部位直接诱导不定芽,子叶节效果最好,最高诱导率达到100%,最适宜诱导培养基是MS+6-BA 2mg/L+IBA 0.02mg/L和MS+6-BA 4mg/L+IBA 0.01mg/L;最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.2mg/L。     

噻重氮苯基脲对贯叶金丝桃胚性愈伤诱导和分化的影响

系统研究了不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)对贯叶金丝桃胚性愈伤的诱导和植株再生的影响。结果表明:诱导胚性愈伤的最适外植体为叶柄,诱导率可达100%。在诱导胚性愈伤和分化的最适培养基MS+0.05mg/L TDZ+0.2mg/L NAA上,不定芽分化率为55%。第1代培养基上,愈伤增殖迅速,绿色的胚性细胞团数目从原来的单个生长提高为平均5.6个。经2、3代培养,愈伤停止生长,胚性细胞团数量逐渐减少。     

曲面分析在‘雪花梨’叶片不定芽诱导培养基筛选上的应用

以‘雪花梨’试管苗幼叶为外植体,采用正交设计和曲面分析的方法对叶片不定芽诱导培养基进行筛选。结果表明,‘雪花梨’叶片在MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋葡萄糖30g／L＋琼脂6g／L培养基上诱导不定芽再生芽数为2．95,高于其他处理;在MS＋6-BA1．0mg／L＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋葡萄糖30扎十琼脂6g／L培养基上再生率最高,达75％。经过曲面分析,‘雪花梨’在MS＋TDZ1．0mg／L＋6-BA0．5mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6g／L的培养基上进行培养,理论再生芽数可达7．00,在MS＋TDZ1．0mg/L＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋蔗糖30只,L＋琼脂6玑的培养基上进行培养,理论再生率可达100％。     

红富士苹果叶片不定芽再生中激素、多胺和NO含量的变化

以红富士苹果继代试管苗叶片为试材,对光、暗培养条件下叶片不定芽再生过程中内源激素、内源多胺及NO含量变化进行了测定。研究结果表明:暗培养下内源ZR和ABA及内源多胺的水平显著高于光培养。叶片接种初期诱导细胞启动分化时ZR、IAA和ABA含量较高,细胞旺盛分裂期及芽原基形成期ZR和ABA含量较高而IAA含量较低。与光培养相比,暗培养下ZR/IAA和ABA/IAA均较高。在叶片接种初期(0～7d)内源腐胺(Put)、精胺(Spm)、亚精胺(Spd)以及内源多胺总量均达到峰值,并且在不定芽分化时期内源多胺含量始终维持在较高水平。与光培养相比,暗培养叶片的NO含量较高。红富士苹果叶片不定芽再生与其内源激素、多胺和NO含量密切相关。