黄瓜未授粉子房离体培养条件的优化及植株再生

为优化黄瓜未授粉子房培养高频胚诱导体系,以9个不同黄瓜基因型为试材,对影响未授粉子房培养胚发生和植株再生的因素进行研究,并对再生植株的倍性和同质性进行检测。结果表明,不同基因型之间出胚率差异显著,其中SG033出胚率最高,达95.93%,SG035出胚率最低,为8.15%;杂交种的胚胎发生能力显著高于产胚能力弱的亲本。在不同因素组合的处理中,处理11(秋季播种,定植于塑料大棚,盛花期取样,以开花前1 d的未授粉子房为外植体,4℃预冷处理4 d,接种于诱导培养基MS+0.08 mg·L^-1TDZ+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,35℃热激暗处理2 d)的出胚率最高,比处理6、14、3分别提高了12.96%、30.00%、30.74%。采用形态学观察、流式细胞检测和SSR验证再生植株,分别获得了单倍体、二倍体、双单倍体及三倍体。综上所述,将产胚困难的黄瓜材料与产胚能力强的材料杂交后,用处理11进行子房培养能明显提高低出胚材料的诱导率。     

黄瓜未授粉子房诱导出胚和再生植株的研究

以7个不同黄瓜基因型为材料进行黄瓜未授粉子房的培养研究,结果表明,不同基因型出胚率差异显著,其中密刺型黄瓜北京102出胚率最高,达25.3%,鄂黄3号出胚率最低,为0.7%。以北京102、中农26号和津优1号为试材进一步研究热激诱导、外源激素、植株不同生长阶段对胚状体诱导产量的影响,发现35℃热激处理2d胚状体产量最高,分化培养基中NAA为0.20mg·L-1、6-BA为0.8mg·L-1时最易分化出胚,在植株第21~30节位采收的子房出胚量最高。再生培养基中GA浓度达到0.4~0.8mg·L-1时,可有效打破再生植株"花打顶"现象从而提高植株再生率。再生植株中二倍体植株比率为70.0%,二倍体植株中DH株比率为84%。     

三个基因型黄瓜品种未授粉子房胚状体诱导及植株再生研究

以3个品种黄瓜的未授粉子房为外植体,进行胚状体诱导和植株再生研究.结果表明:3个品种都获得了再生植株.不同品种、不同热处理时间和不同TDZ浓度以及外植体的切割方式对胚状体诱导率都有影响.不同品种及不同6-BA和NAA浓度组合对植株的再生率有影响.热处理3 d,外植体为条状,TDZ浓度在0.06～0.08 mg/L时这3个品种的胚状体诱导率较高.NAA浓度为0.05 mg/L,6-BA浓度为0.4～0.6 mg/L时有利于胚状体分化植株.     

黄瓜未授粉子房培养获得同源四倍体

为获得稳定纯合的同源四倍体黄瓜材料,采用多种分化培养基对黄瓜(Cucumis sativus L.)未授粉子房培养形成的胚进行培养。结果共获得33个再生植株,经染色体计数后发现7株为同源四倍体植株(2n=4x=28)。利用SSR手段对获得的同源四倍体植株进行了同质性鉴定,发现均为纯合子。利用形态学观察和染色体计数法对同源四倍体单株自交后代的遗传稳定性进行了研究,结果表明自交后代倍性没有发生变异。对此类型同源四倍体植株和经秋水仙素诱导获得的同源四倍体植株分别进行了花粉可染率、花粉萌发率及自交结籽数的观察,发现前者具有高的育性,自交结籽数为15～34粒。上述结果表明,黄瓜未授粉子房培养是获得同源四倍体的一条途径,获得的稳定纯合且育性好的同源四倍体材料可作为特异资源用于黄瓜倍性育种。     

黄瓜未授粉子房离体培养的研究进展

根据近年来国内外黄瓜未授粉子房离体培养的最新研究进展,主要对离体培养至成苗过程中的主要影响因素进行了全面总结、对比和分析,讨论了目前该技术在黄瓜育种应用上存在的问题及展望,以期对黄瓜分子育种技术提供丰富的理论支持。     

通过未授粉子房培育黄瓜单倍体研究进展

单倍体是理想的育种材料,未授粉子房培养是获得黄瓜单倍体的有效途径.阐述了黄瓜未授粉子房培养的研究进展,并对影响培养效果的因素进行了总结与分析,同时对再生植株的倍性检测方法和染色体加倍技术做了简要的概述.     

厚皮甜瓜未受精子房离体培养获得胚囊再生植株

【目的】对厚皮甜瓜未受精子房诱导单倍体形成的影响因素进行研究,以期为植物遗传理论研究及实际育种提供新材料和技术支持。【方法】以3个厚皮甜瓜品种为试材,对甜瓜未受精子房进行离体培养,比较不同基因型、不同栽培季节、不同热激时间、不同的接种方式和不同激素对胚状体诱导的影响,以及不同激素对胚状体成苗的影响。【结果】3种不同基因型甜瓜中,‘将军玉’的胚状体发生频率最高,为38.3%,夏播材料的诱导频率高于春播材料,35℃黑暗热激处理接种材料3 d出胚率最高,子房横切或纵切对胚状体诱导影响不大,MS培养基在含0.03 mg·L~(-1)TDZ基础上添加0.2 mg·L~(-1)KT、0.01 mg·L~(-1)IAA和15%椰汁出胚率最高,为46.7%,在添加0.2 mg·L~(-1)KT的MS培养基上,胚芽伸长较快。研究所获得的再生植株群体较为复杂,包括单倍体、二倍体、三倍体和混倍体等多种类型。【结论】不同基因型甜瓜材料和不同栽培季节对胚状体的诱导率有很大影响,35℃黑暗热激处理离体子房3 d出胚效果最好,最佳的胚状体诱导培养基为MS+0.03 mg·L~(-1)TDZ+0.2 mg·L~(-1)KT+0.01 mg·L~(-1)IAA+15%椰汁。     

西瓜未授粉子房的离体培养

为了探讨西瓜未授粉子房诱导率的影响因素,以‘早春红玉’、‘西农9号’和‘小绿皇’为供试材料进行西瓜未授粉子房的离体培养,研究供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未授粉子房离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d效果最佳;以开花前1 d的子房诱导率最高为17.2%;3个品种中仅‘早春红玉’获得了再生植株,且在激素组合为4.0 mg·L-12,4-D+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA时芽点率最高为15.0%;根据再生植株的根尖染色体数目,初步鉴定再生植株中有单倍体植株,还有二倍体和四倍体植株。     

醉蝶花离体培养植株再生研究

 诱导醉蝶花下胚轴和子叶形成愈伤组织, 以MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L + KT 0.5 mg/L培养基中子叶的出愈率最高, 达到100 % , 下胚轴出愈率最高只有93 %。MS + 6-BA 2 mg/L + NAA 0.05 mg/L最适合于芽的诱导, 诱导率达到100 %。再生苗在MS + NAA 0.1 mg/L 培养基中生根完成植株再生。带单个侧芽的茎作为外植体接种在MS + 6-BA 1 mg/L + NAA 0.05 mg/L 培养基中, 一个月以后形成无数丛生芽。     

利用未受精子房培养技术育成黄瓜新品种‘津美3号’

 ‘津美3 号’是采用未受精子房离体培养技术育成的黄瓜杂交一代新品种。植株生长势强,瓜长13 ~ 15 cm,表面光滑、亮绿,清香可口,耐低温弱光能力强,丰产性好,越冬温室栽培总产量15 kg · m^-2 以上。     

影响瓜类作物未授粉子房或胚珠离体培养技术的几个因素

为了迅速获得纯系材料,缩短育种年限,进而提高育种效率,对获得单倍体植株的重要方式即未授粉子房或胚珠的离体培养进行了研究,发现影响其效果的主要因素有植株的基因型、生长季节、胚囊发育时期、接种前外植体的预处理方式、接种方式、培养基等,并对其进行详细阐述,且这些影响因素并不是孤立存在的,而是由多种因素共同作用、相互影响;因此,植物未授粉子房或胚珠离体培养虽取得了大量的研究成果,但仍需进一步完善。     

草莓未受精子房离体雌核发育的研究

 将凤梨草莓（Fragaria × ananassa Duch.）品种‘明旭’未受精子房在适宜离体条件下培养,诱导其雌核发育。在雌核发育的不同时期采用爱氏苏木精整体染色—石蜡切片法、整体染色—冬青油透明—石蜡切片法、解剖—整体透明法观察研究,结果表明雌核发育有3种不同的现象：①卵细胞启动分裂形成原胚,即卵细胞孤雌生殖;②偶尔有反足细胞启动分裂形成细胞团,但进一步发育的方向不清楚,很难形成胚体,未发现助细胞的无配子生殖;③个别极核分裂形成少数类胚乳游离核、游离核集团或胚乳状细胞结构等自发胚乳。胚的形态表现多样,可划分为典型胚、具畸形细胞胚和愈伤组织化胚。但无论哪种胚均是卵细胞孤雌生殖的结果;典型胚的发育和体内正常胚胎发育途径相似;胚囊植株主要经典型胚发育而成。具畸形细胞胚和愈伤组织化的胚很难形成胚囊植株。     

黄瓜游离小孢子培养诱导成胚和植株再生

 以10个不同基因型黄瓜为试材进行游离小孢子培养,通过对成胚条件的系统研究,从‘7447’和‘Poinsett97’中获得了子叶形胚和再生植株。研究结果表明：基因型和小孢子发育时期是限制黄瓜游离小孢子成胚的关键因子。不同品种间胚状体产量差异显著,每皿产胚1.5～33.4个。单核靠边期是进行黄瓜游离小孢子培养的最佳时期。低温预处理有利于胚状体的诱导,4 ℃预处理2～4 d为宜,以处理2 d时胚状体产量最高。外源激素在诱导胚状体时并非必需,但低浓度的外源激素（0.5 mg·L^-1 2,4－D、0.2 mg·L^-1 6－BA）更能促进小孢子成胚。NLN和B5两种基础培养基在诱导胚状体上无显著差异。子叶形胚易分化成苗,而其它类型的胚状体不能获得再生植株。     

大百合子房的离体培养

以大百合的子房为外植体, 研究了小鳞茎诱导及植株再生的方法。结果表明: BA和KT是影响大百合子房分化途径的关键因素, 其浓度分别为0.1～1.0 mg/L、2.0～4.0 mg/L和高于4.0 mg/L 时,外植体分别分化为愈伤组织、芽和叶。外植体分化的基本培养基以N6、B5为佳。愈伤组织诱导小鳞茎的最佳培养基为MS + 0.1～0.5 mg/L NAA + 2.5 mg/L BA + 2.5 mg/L KT + 10%蔗糖+ 0.7%琼脂。在1/2MS+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂+ 1%活性炭的生根培养基上, 生根率为100%。炼苗一周后移栽, 长势良好。     

柑桔汁胞离体培养的研究

本试验研究了宽皮柑桔类和甜橙类共７个品种汁胞的离体培养。观察到在相同的培养条件下，两类柑桔汁胞产生愈伤组织的能力不同，甜橙类较易，其幼嫩果实的汁胞比相对较成熟的果实的汁胞更易诱导产生愈伤组织。汁胞离体培养时，愈伤组织的产生对培养基没有严格要求，对添加植物生长调节剂的种类、浓度变化不敏感。     

大蒜未受精子房离体诱导单倍体的研究

 以苍山大蒜品种‘糙蒜’为试材,通过花茎离体培养获得发育健壮的花器官。以其未受精子房为外植体进行离体培养,研究不同培养基（MS、B5、N6）及外源植物生长调节剂对单倍体诱导的影响,以建立大蒜单倍体诱导体系。结果表明,诱导未受精子房产生愈伤组织的适宜培养基为B5 + 2 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,愈伤组织及雌核发育胚总诱导率可达12.24%;诱导愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为B5 + 3 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,不定芽分化频率可达46.15%;将不定芽转移至B5 + 0.05 mg · L^-1 NAA培养基中可诱导生根,发育成完整植株。以再生植株叶片为材料,采用流式细胞仪进行倍性鉴定,所得18株再生植株中有16株为单倍体植株。     

西伯利亚百合子房的组织培养及离体快繁研究

以子房为外植体,对西伯利亚百合离体快繁进行研究.结果表明:试验浓度范围内适合不定芽诱导的培养基以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L为佳,芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,适合生根的培养基为MS0,生根率达100%,且根系发达,长势粗壮,练苗3～5 d后移栽,长势良好,移栽成活率达90%以上.