文冠果种子蛋白质提取及组分分析

探索文冠果种子蛋白质及其蛋白质组分的提取方法,采用凯氏定氮法及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)进行分析,为文冠果种子蛋白的高效提取与开发利用奠定基础。结果表明,文冠果种仁的蛋白质质量分数为26.29%,经脱脂后其脱脂粉中蛋白质量分数为62.04%。采用连续分级提取法得到文冠果种脱脂粉中球蛋白、清蛋白、谷蛋白及醇溶蛋白组分的质量分数分别为26.38%、21.50%、2.49%和1.99%,并采用一次直接提取法可得到水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白与碱溶蛋白的提取率分别为34.63%、75.57%、7.26%和80.09%。采用碱溶酸沉法对脱脂后的文冠果种进行蛋白提取,蛋白质提取率达84.06%,得率为36.40%,可得到纯度为83.92%的蛋白粉。SDS-PAGE分析图谱表明文冠果种子蛋白的主要亚基分子质量分布在20～60ku,并计算得出4种蛋白组分的主要亚基分子质量,为文冠果蛋白组分的进一步研究提供依据。     

几种植物叶蛋白质溶解特性的研究

本文研究了几种植物叶蛋白在五种溶剂中的溶解特性,结果表明:(1)同种植物的叶蛋白在五种溶剂中,均有一定的溶解性。(2)不同种植物的叶蛋白溶解性各不一样,不同种植物叶蛋白的提取,必须分别探索其适当的溶剂和浓度。(3)花生、水葫芦、苜蓿、葛藤四种植物的叶片,分别提取的粗蛋白,占总可溶性粗蛋白的百分率趋势是:水溶部分>碱溶部分>醇溶部分>酸溶部分(或盐溶部分),而且水溶部分与碱溶部分之和均在53%以上.由此笔者认为,水和稀碱溶液可作为自绿叶中提取蛋白质的良好溶剂。     

外源高赖氨酸蛋白质基因对转基因玉米种子中蛋白质和氨基酸组分的影响

分析了将高赖氨酸蛋白质基因导入玉米后,转基因玉米种子中水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白和碱溶蛋白组分的变化。结果表明,醇溶蛋白和盐溶蛋白总量发生了增加,水溶蛋白总量保持稳定,而碱溶蛋白量有所下降。免疫印迹结果表明,外源高赖氨酸蛋白的表达量与转基因种子中赖氨酸含量呈正相关性。推测外源高赖氨酸蛋白的表达及富含赖氨酸的水溶蛋白和盐溶蛋白组成的改变是转基因玉米种子中赖氨酸提高的主要原因;转基因玉米种子蛋白质可能是外源基因通过非直接的方式导致的结果。     

大麦虫蛋白质的提取分离及抗氧化性研究

以大麦虫幼虫脱脂粉为原料,根据溶解性的不同,从中分离出水溶蛋白、酸溶蛋白、醇溶蛋白及碱溶蛋白,并对各蛋白组分进行体外抗氧化性研究。结果表明:大麦虫幼虫脱脂粉中最主要的蛋白组分为水溶蛋白,占脱脂虫粉的30.24%;其次为碱溶蛋白19.45%;酸溶蛋白和醇溶蛋白分别占9.52%和4.43%。大麦虫各蛋白组分均有体外抗氧化作用,随着浓度的增大,各蛋白液的总还原能力、对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力也随之增强。水溶蛋白具有最强的还原力和清除超氧阴离子能力,酸溶蛋白清除羟基自由基能力最强。     

利用超薄层等电聚焦电泳技术对燕麦种子进行蛋白多态性和品种鉴定方法的研究

本文探索研究了利用超薄层等电聚焦电泳进行燕麦品种鉴定所需的各种试验条件.结果显示:燕麦种子贮藏蛋白以醇溶蛋白为主,水溶蛋白次之,盐溶蛋白最少,因此应将醇溶蛋白作为燕麦品种鉴定的生化标记;一次性提取法与分步提取法相比,步骤较为简单,需时短,所得电泳谱带较多,更适用于燕麦种子蛋白提取;4种醇溶蛋白提取液中,以1%(V/V)巯基乙醇+1mol/L(W/V)尿素+乙二醇溶液所得电泳效果最佳,确定其为燕麦种子醇溶蛋白提取液以进一步研究.     

盐胁迫下番茄幼苗中不同性质蛋白表达差异的研究

[目的]分析不同盐浓度胁迫下番茄幼苗叶中不同性质蛋白表达的差异。[方法]以番茄种子为试材,置于附加不同盐浓度的1/2MS培养基上培养出番茄幼苗,然后分别提取其叶中的水溶蛋白、盐溶蛋白、酸溶蛋白、醇溶蛋白和总蛋白,并运用SDS-PAGE技术对其蛋白组成和表达量进行比较分析。[结果]不同盐浓度处理下,叶片蛋白质的组成和数量均发生变化,高盐浓度时多出了66.2 kD左右的蛋白质,说明在高盐浓度胁迫下植物产生了某些抗逆性蛋白;总蛋白条带比较相似,总蛋白含量和盐溶蛋白含量略微减少,水溶蛋白含量略微增加,并且在盐溶蛋白中增加了1条带,这些蛋白变化可能是盐胁迫下应激反应的相关蛋白。[结论]该研究为植物的抗病性选育提供一定的理论基础。     

米糠蛋白复合提取法工艺研究

以提高米糠蛋白提取率为目标,探索通过碱性蛋白酶预酶解,再用碱溶法从脱脂米糠中提取蛋白质的复合方法。最佳工艺条件为:酶解pH值9、酶解温度50℃、酶用量500 U/g米糠、酶解时间2 h、固液比1∶9、碱溶pH值10、碱溶温度50℃、碱溶时间1 h,该条件下米糠蛋白的提取率为79.62%。     

乙醇-水体系溶出糯米香成分的风格研究

[目的]研究乙醇-水体系溶出糯米香成分的风格。[方法]采用不同配比乙醇-水体系溶出糯米香中气味成分,使用香气风格感官评价法对糯米香溶出物进行评吸,结合3点检验法对糯米香成分进行检验。[结果]乙醇-水体系中20%乙醇糯米香溶出物的提取率最高,为21.55%;无水乙醇糯米香溶出物提取率最低,为7.30%。糯米香提取物主要具有清香、甜香、烘烤香和焦香等特殊香气,糯米香溶出物香气20%乙醇和80%乙醇溶出物香气最为丰富。水溶出物感官评价指标最佳,80%乙醇糯米香溶出物香气稍欠。水和20%乙醇糯米香溶出物具有显著性差别;60%乙醇和80%乙醇糯米香溶出物具有显著性差别。[结论]该研究为深入开发糯米香资源提供基础的技术依据。     

响应面分析法优化酶法提取小米谷糠蛋白工艺

采用酶法提取小米谷糠蛋白,对小米谷糠进行脱胶、脱脂处理,以提取率为考察指标,从5种蛋白酶中筛选最适酶制剂.采用单因素试验和响应面试验优化酶的添加量、作用时间、作用温度、浸提pH值,得出对谷糠蛋白提取率的影响.结果表明,小米谷糠蛋白的最佳提取率对应的工艺条件如下:添加0.7％碱性蛋白酶,调节pH值为9,于50℃提取1.8 h,提取率为72.29％.由此可见,用碱性蛋白酶提取谷糠蛋白是一种高效的方法.     

玉米种子蛋白质电泳鉴定品种的研究：——醇溶蛋白…

用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对玉米种子醇溶蛋白和盐溶蛋白分别用于区分不同品种的效果作了比较。种子醇溶蛋白采用了７０％乙醇和５５％异丙醇两种溶剂分别提取。结果表明，两种溶剂提取的醇溶蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ带谱均较简单，品种间差异小，难以把各供试品种互相区分开来。而种子盐溶蛋白则显示出丰富的带谱，品种间在谱带数目，带的分布与强弱等特点均可见较明显的差异，据此可将各供试品种互相区     

利用玉米种子盐溶蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定品种

利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对不同品种的玉米种子中盐溶蛋白进行分析,并在研究过程中对电泳条件进行了改进。结果表明:改进后使不同玉米品种盐溶蛋白电泳谱带差异更明显.各玉米种子盐溶蛋白的电泳图均有鲜明特征,彼此可以区分,视作它们各自的“指纹”。     

椭圆叶花锚中水溶性成分提取工艺优化

[目的]研究优化椭圆叶花锚水溶性成分提取工艺。[方法]通过单因素试验和正交试验研究了时间、用水量、温度对椭圆叶花锚水溶性成分提取率的影响。[结果]结果表明最大的影响提取率因素是时间,其次是温度,影响最小的是用水量。最佳提取工艺条件为：时间4 h,温度85℃,用水量150 ml。[结论]该条件下椭圆叶花锚水溶性成分提取率最高,达到12.42%,可应用于实际。     

利用PAGE鉴定石榴种质资源的研究

[目的]通过对5个石榴品种的蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)分析,为石榴种质资源的鉴定提供科学依据。[方法]以5个石榴品种(大红袍、冰糖籽、大青皮、软籽石榴、谢花甜)为试验材料,分别提取其总蛋白、盐溶蛋白、水溶蛋白,并进行PAGE电泳检测。[结果]蛋白质的PAGE电泳具有条带的多样性,不仅能很好的鉴定区分不同品种,还能通过相似度指数进行聚类分析,探究品种间的亲缘关系。石榴的总蛋白与盐溶蛋白电泳分析结果基本一致,大青皮与谢花甜,软籽石榴与冰糖籽亲缘关系较近;其水溶蛋白聚类分析中,5个品种间无明显分组聚合现象。[结论]该研究结果表明PAGE技术能较好的揭示品种间的遗传变异,可用于分析石榴种质的遗传多样性和亲缘关系,其结果为石榴种质资源的保存和良种培育提供了科学依据。     

玉米胚芽分离蛋白溶解性及对小鼠免疫功能影响的研究

以湿法脱胚的玉米胚芽为原料,采用碱溶酸沉法制备了玉米胚芽分离蛋白;探讨了不同条件如温度、pH、盐浓度等对玉米胚芽分离蛋白的溶解性,解释了溶解性在这些条件下的变化的规律。研究了玉米胚芽分离蛋白对小鼠体内的免疫调节作用,研究结果表明,玉米胚芽分离蛋白能显著提高正常小鼠的免疫脏器指数、腹腔巨噬细胞的吞噬百分率、吞噬指数和淋巴细胞的转化功能活性,促进溶血素的形成。结果提示:玉米胚芽分离蛋白能提高机体的免疫功能,是一种很好的非特异性免疫激活剂。     

可可膳食纤维的制备工艺及物理特性研究

以可可果皮为原料,采用酸水解法提取水溶性膳食纤维和水不溶性膳食纤维。结果表明,可可水溶性膳食纤维的最佳提取工艺为:料液比为1∶30,水浴温度90℃,pH 2.0,提取时间30 min,得率为25.19%。可可膳食纤维总得率达57.99%,不溶性膳食纤维的持水力为5.23g/g,溶胀性为11.42mL/g。     

紫色玉米芯色素的提取工艺研究

[目的]探讨紫色玉米芯色素的最佳提取工艺。[方法]采用单因素试验初步确定乙醇浓度、柠檬酸浓度、料液比和提取温度4个因子对提取紫色玉米芯色素的影响范围,在此基础上做正交试验,以确定玉米色素的最佳提取条件。[结果]4个因子中料液比对色素提取影响最大,其次为提取温度、乙醇浓度和柠檬酸浓度。最佳的提取条件是：乙醇浓度60%,柠檬酸浓度0.8%,料液比1∶10,提取温度为80℃。[结论]紫色玉米芯色素的提取工艺简单,安全无毒,材料丰富,色素含量高,是很有应用前景的天然色素资源。     

玉米胚芽油制备共轭亚油酸的微波工艺研究

[目的]采用微波法,研究利用玉米胚芽油制备共轭亚油酸(CLA)的最佳工艺。[方法]选择微波作用功率、微波作用方式、催化剂用量、溶剂用量进行单因素试验,然后在单因素试验的基础上选取催化剂用量、溶剂用量和微波作用时间进行正交试验,以确定由玉米胚芽油制备CLA的最佳工艺。并对天然玉米胚芽油和微波异构化产物进行紫外吸收光谱和红外吸收光谱分析。[结果]最佳制备工艺条件为催化剂用量为油重的0.6倍、溶剂用量为油重的3倍、微波作用10 min;在最佳条件下进行试验,CLA含量为56.3%,转化率为99.47%。结构特征分析结果表明,微波能促进亚油酸的非共轭双键发生异构化,转变为共轭双键亚油酸。[结论]该研究为人工合成CLA提供了新的途径。     

微针注射甜玉米胚芽gus基因转化瞬时表达研究

[目的]研究微针注射甜玉米（Zea mays L.）胚芽gus基因转化瞬时表达,为玉米遗传转化的进一步研究奠定基础。[方法]以农杆菌为介导,采用gus基因瞬时表达技术,建立了胚芽注射开放性基因转化体系。[结果]3 mm长的胚芽为最适转化受体;农杆菌EHA105菌液浓度最适OD值为0.558～0.630;gus基因转化最适共培养天数为3 d。在以上最适转化条件下,微针注射胚芽生长点基因转化率为1%。[结论]该研究可为改良甜玉米遗传性状,培育基因工程新品种提供参考。     

玉米胚芽粕和玉米蛋白饲料饲喂生长肥育猪效果的研究

以玉米胚芽粕和玉米蛋白饲料作为蛋白质补充饲料配制的饲粮对生长肥育猪的生产性能和屠宰性能的影响进行了探讨。将28头二元杂交去势公猪随机分为4组，每组7头，分别饲喂玉米胚芽粕和玉米蛋白饲料。经78d饲养试验，结果表明：饲粮中添加单一玉米胚芽粕和玉米蛋白（＜16％）饲料同普通饲料相比，公猪日增重、料肉比及眼肌面积、屠宰率均无显著变化（P＞0．05）。饲料中同时添加玉米胚芽粕和玉米蛋白饲料后，平均膘厚显著降低（P＜0．05）。用廉价的玉米胚芽粕和玉米蛋白饲料作为生长肥育猪饲粮中的蛋白质补充饲料是完全可行的。     

七子花叶片蛋白组分含量动态分析

对七子花叶片中5种蛋白组分含量的动态变化进行了研究。结果表明七子花叶片的总蛋白含量变化曲线呈“W”型,叶片生长初期含量基本保持稳定,5月中旬含量开始下降,并且下降幅度较大,6月中旬达一低值后,其含量迅速上升,到7月中旬（盛花期）达一峰值,接着其含量下降,到8月中旬达到最低,后又上升直至落叶时达到最高值。水溶蛋白含量季节性变化呈“低-高-低-高”,在叶生长初期上升,峰值出现在5月中旬,以后逐渐下降,到7月中旬达最低值,之后缓慢上升,落叶前达到最高值。盐溶蛋白在叶生长初期迅速下降,到5月中旬达最低值,后一直呈上升趋势。醇溶蛋白与碱溶蛋白在叶生长初期有所下降,至6月中旬达到最小值,以后迅速上升,至7月中旬达到高峰后大幅度下降,在落叶前又有所回升。杂蛋白在叶生长初期迅速下降,至5月中旬达到最低值后,基本趋于稳定。推测水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白、碱溶蛋白与七子花的展叶和开花生理过程有密切关系。西北林学院学报22卷第6期杨蓓芬等七子花叶片蛋白组分含量动态分析