表达K_88K_99双纤毛抗原及K_99纤毛抗原的产肠毒素大肠杆菌的构建

应用转化法:将带有K_99纤毛抗原的重组质粒PHK_99分别转化到具有K_88纤毛抗原的产肠毒素菌株B_6(O_149K_91K_(68)ac)“和不具K_88抗原的产肠毒素菌株(O_14K_85),获得了35株抗氨苄青霉素的转化子。在这35个转化子中,有32个能同时表达K_(88)、K_(99)两种纤毛抗原,有3株能表达K_(99)纤毛抗原。这些转化子仍具有产肠毒素的特性。     

K_(88)K_(99)工程菌基因质粒在动物体内外扩散性试验

K_(88)K_(99)双价基因工程菌,是一株人工构建的无肠毒素基因、丧失了病原性但仍保留产生 K_(88)、K_(99)两种保护性抗原基因的菌株,它具有优良的免疫原性和相当良好的安全性、稳定性,具备用于制备无毒活菌苗的良好条件。因此,我们在研究菌苗的工艺路     

仔猪大肠杆菌性腹泻3p—ELISA诊断试剂盒的研究——中间试制及检验总结

在仔猪腹泻中,约有40%由肠毒素原性大肠杆菌引起。肠毒素原性大肠杆菌产生二种致病因子,即肠毒素(LT、ST)和纤毛粘着素(纤毛抗原)。与仔猪腹泻有关的大肠杆菌纤毛粘着素主要有 K_(88)、K_(99)和987P,F_(41)较少见,且往往与 K_(99)在同一菌株上表达。由于仔猪腹腹泻病因的复杂性,给该病的防治带来了一定的困难。我们在先     

E.coli纤毛抗原K_(99)菌株电子显微镜观察试验

肠致病性埃希氏大肠杆菌(E.co1i)的粘附因子K_(99)抗原,是一种易热蛋白质,从形态上看是一种纤毛结构,这种纤毛可以粘附于小肠上皮细胞,使细菌在小肠中聚集产生肠毒素而致病。这种纤毛的致病作用越来越引起人们的重视,在兽医研究方面,现已发现猪的肠致病性大肠杆菌带有K_(88)、K_(99)和987P三种纤毛抗原,在引起新生仔猪腹泻     

大肠杆菌定居因子K_(88)抗原ELISA检测法

本文报告用ELISA双抗体夹心法检测大肠杆菌定居因子K_(88)抗原。K_(88)大质粒转化子和K_(88)基因重组子。结果说明此法灵敏度较高,特异性较好,可直接检测菌液,有快速、简便的优点,可以作为检测k_(88)基因克隆是否表达的一种筛选方法,亦可考应虑用于大肠杆菌k_(88)菌株的检测。     

化学诱变剂和紫外线对K88抗原工程菌及产肠毒素性大肠杆菌质粒作用的比较

某些产肠毒素性大肠杆菌可致仔猪黄痢病,危害养猪业。猪源性产肠毒素性大肠杆菌有两种致病因子,其一为肠毒素,其二为粘附因子(即纤毛抗原)。后者有K_(88)、K_(66)、987P和F_(41)四个血清型,但以K_(88)纤毛抗原产生菌居多。现已知道K_(88)基因和肠毒素基     

K_(88)抗原工程菌株构建中的电镜观察

在K_(88)抗原工程菌株的构建中,通过对供体菌、受体菌相接合菌的电镜观察发现,在接合菌C-84中,菌体表面长有纤细、柔韧的纤毛,与供体菌B-5所见相似.而在受体菌1548中,未见有纤毛,证明不含肠毒素质粒的K_(88)抗原,工程菌株的构建已经完成.     

大肠杆菌K88,K99双价基因苗预防仔猪黄白痢试验报告

引起仔猪黄痢、白痢的埃希氏大肠杆菌荚膜抗原主要有K_(88)、K_(99)、987P、F_(41)四种,而K_(88)、K_(99)抗原型的大肠杆菌最为常见,也是引起仔猪黄、白痢主要血清型的大肠杆菌.为了探讨大肠杆菌K_(88)、K_(99)双价基因工程冻干菌和抗痢宝对仔猪黄、白痢病预防效果,作了本试验.     

大肠杆菌K_(88)质粒及肠毒素质粒接合转移特性的研究

不同血清群大肠杆菌的K_(88)质粒、发酵棉子糖(Raf~+)及肠毒素质粒的接合转移频率,由于菌株不同,其转移频率也不同,而且K_(88)~+总是伴随Raf~+发生转移。肠毒素质粒虽然也具有可传递性,但机率显著低于K_(88)~+和Raf~+。肠毒素质粒在接合过程中的不活跃性和低接合率,不仅有利于通过接合消除毒力因子(质粒),也相对的提高了K_(88)和K_(99)基因工程菌的安全性。     

大肠杆菌K_(88)-K_(99)抗原工程苗对仔猪黄痢的预防效果

为预防仔猪黄痢病,我们应用大肠杆菌K_(88)-K_(99)抗原工程苗在丽水市良种场进行了预防接种,取得了较好的效果,现简述如下。材料和方法一、菌苗:上海植物生理研究所生产的大肠杆菌 K_(88)-K_(99)抗原工程苗,批号     

育成牛感染O142型大肠杆菌引起肠毒血症报告

从我场感染大肠杆菌引起肠毒血症的4头育成牛的空肠内分离出4株革兰氏阴性杆菌,经O抗原鉴定、纤毛抗原检查、ST肠毒测定及动物感染试验,证明分离的4株细菌均具有K_(99)、F_(41)两种纤毛抗原的产ST肠毒的O_(142)血清型致病性大肠埃希氏菌。     

ELISA检测粪便中产肠毒素型大肠艾希氏菌K_(99)抗原

研制了一种采用酶联免疫吸附试验(ELISA)直接检测患病犊牛粪便中大肠艾希氏菌K_(99)抗原的方法。为此用纯化的(凝胶电泳和色层定点法)K_(99)抗原免疫家兔,运用SPDP(不同功能的因子)将获得的特异性免疫球蛋白G同磷酸酶联合。根据对犊牛大肠杆菌病临床病例和一例用大肠艾希氏菌K_(99)~+菌株实验性感染动物的研究,证明本法对检测粪便中K_(99)     

河北某农场仔猪腹泻大肠杆菌K_(88)抗原菌株的分离与鉴定

自河北某农场分离的21株仔猪腹泻大肠杆菌K_(88)抗原菌株全部有致溶血作用,并对小鼠显示不同的致病性。其血清分布在8个O抗原组,其中O_8菌株占优势,并在省内首次分离到具有K_(88)抗原的O_8菌株3株。O_8菌株对氟哌酸、卡那霉素、新霉素很敏感,对喹乙醇不敏感。     

大肠杆菌K_(88)-K_(99)抗原工程苗预防仔猪黄痢试验(第二报)

1985年我们用中科院上海植物生理研究所研制的大肠杆菌K_(88)—K_(99)抗原工程苗,在桐庐县良种场、乔司农场及杭州种猪试验场预防仔猪黄痢,获得了比较满意的结果。在此基础上,1986年8月—12月,我们在萧山县棉花原种场牧场、萧山县湘湖农场及萧山县良种场进一步做了预防仔猪黄痢试验。用大肠杆菌K_(88)—K_(99)抗原工程苗对怀孕母猪作母源免疫,进行预防仔猪黄痢试验。     

K_(88 )及 K_(88-)大肠杆菌对仔猪小肠上皮粘着作用的比较研究——用病理组织切片法发现大肠杆菌的另外二种表面粘着素

对人工感染黄痢发病仔猪的小肠作组织切片检查发现,在国内流行的仔猪黄痢病原性大肠杆菌中除了 K_(88)~ 菌株外,还有二类 K_(88)~-大肠杆菌也能粘着于仔猪小肠绒毛上皮。它们对不同动物红细胞的凝集性及它们的表面 K 抗原都互不相同.表明它们各自具有不同类型的表面粘着素。其中一个菌株的血凝持性与国外报导的 K_(99)~ 大肠杆菌很相似,另一类菌株则有待进一步详细鉴定。本文讨论了病理组织切片技术对于发现细菌的未知粘着素的诊断意义。     

应用MCA-ELISA检测腹泻仔猪粪样中的大肠埃希氏菌K_(88)粘着素抗原

将抗大肠埃希氏菌 K_(88)粘着素抗原的单克隆抗体(MCA)标记辣根过氧化物酶,建立了一种 MCA-ELISA,其对 K_(88)阳性菌株的检测限为1×10~4个菌。本法对113株大肠杆菌分离培养物的检查结果与直接凝集试验结果完全符合,两种方法都检出 K_(88)阳性菌株28个。K_(88)阴性菌株85个。用这一方法从103例腹泻仔猪粪样中检出阳性10例,而用经典分离培养法仅检出6例。     

应用对流免疫电泳技术鉴定肠病原大肠杆菌菌毛抗原

应用对流免疫电泳技术对肠病原大肠杆菌菌毛抗原成分鉴定结果,K_(88)、F_(41)菌毛抗原均出现2条沉淀线,K_(99)和987P 出现1条沉淀线。通过应用 K_(88)、K_(99)、987P、F_(41)因子血清分别对相应产菌毛抗原标准株的交叉试验及对不产菌毛抗原菌株的对照试验表明,本方法具有特异、敏感、快速等特点,可以在实际工作中用于菌毛抗原成分的鉴定。电泳时采用0.06M 巴比妥缇冲液(pH8.6),孔径及孔间距均为4.0mm.端电压6V/cm,一般电泳3小时即可得到终结果。     

大肠艾希氏杆菌987p菌株的初步探讨

一、前言肠病原性E.Colj的987p纤毛抗原是促使细菌在仔猪肠道中定居的纤毛群之一,它与K_(88)、K_(99)抗原一样,是一种不耐热的表面抗原,并证明是一种粘着因子,能使E.Coli菌在仔猪粘膜表面上粘着定居,随之细菌产生肠毒素而引起仔猪腹泻发病。Nagy等于1976年报告了缺乏K_(88)抗原的肠病     

大肠艾希氏杆菌K_(99)抗原菌株的分析鉴定

大肠艾希氏杆菌的K_(99)抗原和菌株的肠病原性有着密切关系,这种抗原最早是由Sojka所发现,他观察了许多牛、羊的病原菌株,虽然其“O”抗原不同,但具有一个发生交互反应的共同K抗原,标记为“KCO”     

K_(88)~+肠病原性大肠杆菌在我国仔猪黄痢发病中的作用

本文研究了从江苏、上海、北京八个县十七个猪场新生仔猪腹泻分离到的大肠杆菌的抗原结构和肠道病原性,从其中十四个猪场分离到K_(88)~+肠道病原性大肠杆菌。在这十四个猪场,从40窝67头腹泻仔猪得到212个大肠杆菌分离物,其中来自26窝41头病猪的146个(68.9％)大肠杆菌分离物是具有K_(88)抗原的,它们的代表菌株在仔猪结扎肠试验中均表现肠道病原性。随猪场不同,这146个K_(88)~+分离物分属于6个O抗原型(O_(60)、O_(149)、O_(157)、O_9和一个未定型)。其中,以O_(60)在江苏、上海为最常见,这是一个国外未见报道的含K_(88)抗原的大肠杆菌的O抗原型。调查还发现了一种非大肠杆菌性的新生仔猪腹泻。为此,本文还对“仔猪黄痢”“新生仔猪腹泻”的定义问题进行了讨论。