温度、pH值对南方大口鲶、长吻鮠蛋白酶和淀粉酶活力的影响

本试验测得南方大口鲶胃内、胆汁和肠内ｐＨ分别为５．５～６．５,６．５～７．０,６．５～７．５,长吻鱼危胃内、胆汁和肠内ｐＨ值分别为５．０～６．５,６．５～７．０,６．０～７．０。南方大口鲶胃、胰脏和肠蛋白酶的最适ｐＨ值分别为２．６、６．２和７．０,淀粉酶最适ｐＨ值分别为５．０、６．４和７．０;蛋白酶最适温度分别为３３、３９℃和４５℃,淀粉酶最适温度分别为４５、３９℃和４１℃。长吻鱼危胃、胰脏和肠蛋白酶最适ｐＨ值分别为３．０、６．２和７．４,淀粉酶最适ｐＨ值分别为６．６、６．６和７．４;蛋白酶最适温度为３９、３６℃和４１℃,淀粉酶最适温度分别为４５、３６℃和３９℃。两种鱼胃内ｐＨ值较高,均高于胃蛋白酶的最适ｐＨ值。而肠内ｐＨ值范围适合蛋白酶和淀粉酶最大活性的作用。两种鱼蛋白酶、淀粉酶的最适温度均高于鱼体生活的水环境温度。两种鱼肠蛋白酶活力受温度变化的影响较大。     

pH值和氮素对莱氏衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)胞外碳酸酐酶活性的影响

对莱氏衣藻在不同ｐＨ值下胞外碳酸酐酶活性变化的观测表明,在ｐＨ７．２时诱导的酶活性最高,而ｐＨ５．５时诱导的酶活性明显低于ｐＨ７．２和ｐＨ９．０时诱导的酶活性。氮素对胞外碳酸酐酶基因表达也具有重要调控作用,在从高ＣＯ２浓度转入低ＣＯ２浓度时,缺氮或低氮浓度抑制胞外碳酸酐酶活性的增加,铵态氮诱导的酶活性高于硝态氮。     

水稻细菌性条斑病菌胞外产物的性状

对水稻细菌性条斑病菌胞外产物（胞外多糖、蛋白酶、果胶酸酯裂解酶、聚半乳糖醛酸酶、纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶）的部分特性以及不同菌株离体产生各胞外产物能力与致病力的相关性进行了初步研究．发现病菌在离体条件下分泌的各胞外产物总量和单位产量随培养时间的增长而增加,至一定的阶段后趋于稳定．不同培养基下各胞外产物的产生有所变化,但对各菌株之间单位产量的差异影响不大．病菌产生的蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶和聚半乳糖醛酸酶活性最适ｐＨ值分别为９．０、６．０、８．０、４．０、８．０．其蛋白酶活性与致病力呈显著正相关,果胶酸酯裂解酶与致病力呈正相关．病菌除去胞外产物后,降低了在水稻叶片上的吸咐和增殖能力．强致病力菌株胞外产物对离体稻叶的伤害能力要强于弱致病力菌株．     

无花果蛋白酶的分离纯化及其理化性质研究

以无花果良种布兰瑞克和紫果１号为材料，其匀浆滤汁经有机溶剂沉淀、超滤等方法处理，得到无花果蛋白酶粉。酶比活力为１５．３４ｕ／ｍｇ·ｐｒｏｔｅｉｎ，纯化倍数为１１．６８％，酶产率为１．５％，酶活力回收率为２７．４％，酶最适ｐＨ为８．０，在ｐＨ５￣１０范围内处理０．５ｈ活性稳定，酶最适温度为４０℃，在温度５０℃以内活性稳定。酶具有巯基蛋白酶特性，能被半胱氨酸和ＥＤＴＡ激活，而被ＨｇＣｌ２抑制。     

温度,pH值对南方大口鲶,长吻Wei蛋白酶和淀粉酶活力的影响

本试验测得南方大口鲶胃内,胆汁和肠内ｐＨ分别为５．５～６．５,６．５～７．０,６．５～７．５,长吻Ｗｅｉ胃内,胆汁和肠内ｐＨ值分别为５．０～６．５,６．５～７．０,６．０～７．０,南方大口鲶胃,胰脏和肠蛋白酶的最适ｐＨ值分别为２．６,６．２和７．０,淀粉酶最适ｐＨ值分别为５．０,６．４和７．０,蛋白酶最适温度分别为３３．３９℃和４５℃,淀粉酶最适温度分别为４５,３９℃和４１℃,长吻Ｗｅｉ胃,胰脏和     

中华鳖消化组织蛋白酶的初步研究

以酪蛋白为底物测定了中华鳖胰脏、胃、肠等组织蛋白酶活性、最适ｐＨ和最适底物浓度。结果表明：胃、胰组织蛋白酶活性显著高于肠组织蛋白酶活性，且胃＞胰＞前肠＞中肠＞后肠；胃、胰和肠组织蛋白酶最适ｐＨ分别为２．２、６．２、７．６；胃、前肠组织蛋白酶最适底物浓度分别为１．２％、０．８％。     

耐高温酸性蛋白酶的菌株筛选及特性研究

本研究采用高温，超剂量常规诱变筛选方法，获得的耐高温酸性蛋白酶生产菌Ｓ３１５菌株，它所产生的耐高温酸性蛋白酶，最适ＰＨ值依次为２．５，３．０、２．０，最适温度为５０℃。     

棒曲霉HD-11生理特性的研究

研究了分离菌株棒曲霉（ＡｓｐｅｒｇｉｌｕｓｃｌａｖａｔｕｓＤｅｓ）ＨＤ１１的生理特性。结果表明：棒曲霉ＨＤ１１具有多种胞外水解酶，能利用多种碳源，但不能利用菊糖；其麸曲糖化酶比活力为６６８４．５Ｕ／ｇ，正常生长发育温度为１５～３８℃，最适生长温度为２５～３５℃，最适生长ｐＨ为３．０～５．０。研究中发现，棒曲霉有温度二型现象     

大眼鰤鲈蛋白酶活性的研究

在池塘养殖条件下,对大眼Ｓｈｉ鲈消经器官蛋白酶活性了测定分析。结果表明：胃、肝胰脏、幽门垂、肠的蛋白酶最适ｐＨ值分别为：３．０,７．０,８．０和８．０;蛋白酶的活怀顺序为：胃〉幽门垂〉肠〉肝胰脏;肠道不同部位蛋白酶活性不同,蛋白酶活怀前肠最高,中肠次之之,后肠最低,差显著（Ｐ〈０．０５）;随大眼Ｓｈｉ鲈的生长发育,蛋白酶活性显著增强;体重达６３￣１０２ｇ时,各消经器官机能已近完善。     

乌鳢消化系统蛋白酶活性研究

测定了乌鳢［Ｃｈａｎｎａａｒｇｕｓ（Ｃａｎｔｏｒ）］消化系统５种组织和肠内含物总蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的活性分布及胃蛋白酶和肠粘膜蛋白酶的部分理化特性。结果表明：总蛋白酶活性以肠系膜为最高，肝脏最低；胰蛋白酶活性由高到低顺序是幽门垂粘膜＞肠粘膜＞胃粘膜＞肠内含物，肠系膜内未检出胰蛋白酶；糜蛋白酶活性由高到低顺序是胃粘膜＞幽门垂粘膜＞肠粘膜＞肠内含物＞肠系膜。胃蛋白酶和肠粘膜蛋白酶活性最适ｐＨ分别为２．８和７６，肠粘膜蛋白酶活性的最适酪蛋白质量分数为１０％。     

Acrosomal proteinase and proteinase inhibitor of human spermatozoa

The acrosomal proteinase of human spermatozoa was characterized and differs from other human proteinases. The enzyme has optimal activity at pH 8.0, is inactive below pH 5.0 or above pH 10.5, requires calcium for maximum activity, hydrolyzes fibrinogen, gelatin, and benzoylarginine ethyl ester, and is inhibited by various synthetic and natural proteinase inhibitors. The molecular weight was estimated to be 30,000. Human spermatozoa also possess a proteinase inhibitor that is similar to one of the proteinase inhibitors from human seminal plasma.     

蜜蜂球囊菌几种胞外蛋白酶的特性

 【目的】研究由蜜蜂球囊菌引起的真菌性疾病白垩病的侵染机制,以及蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性。【方法】利用人工合成的培养基,在体外诱导蜜蜂球囊菌分泌胞外蛋白酶,用硫酸铵沉淀和透析,获得初酶液,利用相应的底物对酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶、弹性蛋白酶和胰蛋白酶的活力进行测定。【结果】蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶主要有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶3种,无弹性蛋白酶和胰蛋白酶。对这3种酶的最适温度、pH值以及热稳定性和酸碱稳定性进行了测定。这3种胞外酶的最适反应温度都在40℃左右,最适pH为7左右,均不耐高温,热稳定性差,在中性的pH环境下比较稳定。【结论】蜜蜂球囊菌可以分泌多种胞外蛋白酶,它们的最适pH和温度与蜜蜂消化道内的环境一致。     

响应面法优化灵芝黄酮酶辅助提取工艺及抗氧化活性研究

利用响应面法优化酶辅助提取灵芝黄酮工艺。在酶解温度、酶解时间和酶用量3个单因素的基础上,利用Box-Benhnken实验设计原理对复合酶的最佳配比进行优化。同时对灵芝提取液的抗氧化活性进行研究。结果表明:在80min、50℃、pH值为5.0的酶解条件下,最佳酶比例为纤维素酶∶果胶酶∶中性蛋白酶=2.07∶0.86∶2.11。在该条件下,灵芝黄酮实际提取率可达0.75mg·g~(-1);并且灵芝提取液对DPPH自由基和羟自由基有一定的清除能力,同时具有较强的还原力。     

降解半纤维素嗜热菌的筛选及其酶学性质

以半纤维素为惟一碳源,从温泉中分离到1株降解半纤维素酶的嗜热菌DT-1,经16S rDNA序列比较分析,初步鉴定该菌株属于Geobacillus thermocatenulatus.菌株DT-1发酵条件的初步研究表明:在培养基初始pH为5.0,温度为55℃,装液量为30%,摇床转速为120 r.min-1的条件下培养36 h,该菌株产酶总活力达到最大.对菌株DT-1所产半纤维素酶的性质分析表明:该酶的最适作用温度为65℃,最适作用pH为6;另外,2-ME、EDTA、SDS、PMSF在不同程度上能增强酶的活性,其余抑制剂和去污剂DDT、Tween-20和TritonX-100对该酶活力影响不大;金属离子Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+、Co2+对该酶有激活作用,K+、Na+、Li+、Zn2+、Ba2+对酶作用不显著.     

桑椹酒发酵关键技术研究

[目的]通过对桑椹酒发酵专用酵母的筛选和多酚氧化酶钝化2项关键技术进行研究,为桑椹酒稳定发酵工艺的建立提供技术支持。[方法]分别对桑椹及桑园土壤中的酵母进行富集、培养与筛选,考察了pH、温度对桑椹多酚氧化酶活性的影响。[结果]获得2株桑椹酒发酵专用菌株,一株来自桑椹发酵汁,一株来自桑园土壤;在pH 3.0~7.0时,多酚氧化酶活性随pH的增大而升高,在pH为7.0时相对活性达到最大,之后随pH的增大其活性又逐渐减小。在pH低于5.0的环境中,酶活性会低于40%;在温度为40℃时活性达到最大,80℃时活力丧失。[结论]在pH低于5.0的条件下,将桑椹汁在70℃加热20 min或在80℃加热5 min,即可达到使桑椹多酚氧化酶的活性钝化失活的目的。     

Regulation of proteolysis at the neutrophil-substrate interface by secretory leukoprotease inhibitor

Human neutrophils can initiate the rapid degradation of extracellular matrix macromolecules by localizing the destructive process to sites of cell-substrate contact. Although plasma and its filtrates contain multiple proteinase inhibitors, these inhibitors did not prevent neutrophils from attacking either underlying fibronectin or elastin. However, subjacent substrates could be protected from neutrophils by recombinant secretory leukoprotease inhibitor, a structurally unique serine proteinase inhibitor whose natural counterpart is normally confined to human mucous secretions. The identification of this extravascular proteinase inhibitor as a potent regulator of subjacent proteolysis could lead to the development of a new class of anti-inflammatory therapeutics.     

黑曲霉DL116产乳糖酶发酵条件的研究

为确定产高温乳糖酶的黑曲霉菌株DL116的最佳发酵培养条件,研究了突变菌株产乳糖酶的发酵培养基成分及培养条件。结果表明:DL116产乳糖酶的最佳培养基成分为:果胶2.5%,豆粕粉6%,玉米浆9%,(NH4)2SO40.1%,K2HPO41%,Tween-80 0.3%;最佳培养条件:温度30℃,初始pH 5.0,装液量30 mL/250 mL,接种量104个/mL。在此条件下培养,β-半乳糖苷酶酶活力达83.89 U/mL,是初始发酵条件下酶活力的1.89倍。     

一株木霉菌(Trichoderma sp.)TY2纤维素酶最佳产酶条件及部分酶学特性研究

[目的]筛选高活力纤维素酶产生菌,高效利用纤维素资源.[方法]从朽木和和纸浆样品中分离筛选出一株产纤维素酶活较高的菌株TY2.对其形态和18S rDNA特征序列分析鉴定为木霉菌(Trichoderma sp.).对菌株发酵条件及酶学特性进行研究.[结果] TY2菌株的最佳产酶条件为:1;滤纸+2;麸皮+0.5;葡萄糖为碳源,0.5;蛋白胨为氮源,起始pH 5.0,温度28 ℃,200 r/min,5 d,其CMCase和FPase活力分别达412.5 和100.3 U/mL.经分离纯化出TY2菌株内切β-葡聚糖苷酶.内切β-葡聚糖苷酶最适反应温度为60 ℃,最适反应pH为4.6,在50 ℃以下,pH 3.0～5.0,酶活性稳定,且在80 ℃仍具有降解CMC-Na的效果.同时研究发现铜离子、锌离子、钾离子和钠离子对内切β-葡聚糖苷酶的酶活有促进作用,而汞离子有明显的抑制作用.[结论]所筛选的TY2菌株具有潜在的工业应用价值.     

金针菇生长发育期间相关胞外酶的活性变化研究

以白色金针菇菌株为材料,研究其生长发育过程中羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、漆酶、酸性磷酸酶和中性蛋白酶活性的变化规律.结果表明,整个生长发育期间胞外酶活性变化具有明显的阶段性.羧甲基纤维素酶菌丝营养生长阶段活性较低,现蕾后活性急剧增强,达到11.43U;半纤维素酶高峰出现于采收期,达到8.13U;漆酶在菌丝营养生长阶段活性较高,原基形成后迅速下降到0.15U;中性蛋白酶菌丝营养生长阶段活性比较稳定,现蕾前相对较低,子实体生长阶段酶活性明显增强;酸性磷酸酶活性随着菌丝培养呈下降趋势,但生殖生长期迅速升高.     

Ar~+介导玉米DNA水稻不同pH条件下蛋白水解酶的表达

利用离子束介导技术,对水稻豫粳6号种子进行Ar+照射处理,然后用玉米基因组DNA介导液进行转化处理。采用复性电泳技术对其幼苗叶片在不同pH下的蛋白水解酶瞬时表达情况进行了分析。结果表明,不同pH条件下各处理蛋白水解酶表达存在明显差异。与对照相比,Ar+介导玉米DNA的水稻幼苗叶片在pH 4.5条件下检测到1条129 kD的新酶带,缺失41、97、192 kD的3条酶带;在pH 7.0时检测到1条167 kD的新酶带,缺失1条67 kD的酶带;在pH 8.5条件下缺失1条61 kD的酶带,并且在192~234 kD检测到1条活性较强的亮带区。这表明,Ar+介导玉米DNA的水稻在蛋白质表达水平上产生显著差异,这可能是玉米DNA片段进入受体水稻细胞并引起受体基因表达改变的结果。