NaCl溶液克服大白菜自交不亲和性的研究

以大白菜自交不亲和系07s20为试材,于蕾期和花期分别喷施不同浓度的NaCl溶液以克服其自交不亲和性。试验结果表明,花期和蕾期喷施1%~5%NaCl均可显著提高07s20亲和性,但花期处理明显高于蕾期。其中花期喷施3%NaCl,亲和指数达到8.54,是人工破蕾的58.1%,可以代替蕾期人工破蕾授粉克服大白菜的自交不亲和性,以降低种子生产成本。     

喷施NaCl溶液对大白菜不同株系结实指数的影响

通过采用花期和蕾期喷5%NaCl溶液的方法,提高大白菜授粉后花期亲和指数,以期解决大白菜多代自交后结实指数降低的问题。结果表明:喷施NaCl溶液对自交不亲和系、正在选育中的自交不亲和系的株系及稳定的自交系,均可提高其花期自交的亲和指数,尤其对自交不亲和系(4号株系)提高程度更大,差异极显著;该方法对降低大白菜自交不亲和系的种子生产成本效果明显,在大白菜杂种优势育种方面有重要的应用价值。     

槲皮素对甘蓝自交不亲和性及SRK活性的影响

 对甘蓝自交不亲和系‘022E1’, ‘022A1’, ‘02259’开花前两周的花蕾进行不同浓度的槲皮素处理, 开花后自交。与花期对照相比, 3个自交不亲和系的亲和指数差异达到显著性水平, 其中以1 500 μmol·L ^{- 1}槲皮素溶液处理效果最佳, 在022E1系中其亲和指数由原来的0.03增至4.35, 完全转化为了自交亲和系。采集开花前1 d的花蕾切取柱头进行SRK活性测定, 结果表明, 槲皮素处理后可显著抑制甘蓝自交不亲和系柱头中SRK活性, 从而阻止了自交不亲和性的信号传导, 达到了克服甘蓝自交不亲和性的目的。     

影响甘蓝自交不亲和系亲和指数的因素

不同部位花枝，其花期自交和指数有差异，上部花枝花期亲和指数高，而中下浊花枝的花期亲和指数低；不同花枝上的蕾进行蕾期自交授粉后，期蕾期自交亲和指数亦不同，以中部蕾的蕾期亲和指数最高，上部次之，下部最低；不同蕾期亲和指数比较，开花前４ｄ以内的蕾自交授粉后，其亲和指数高于开花前５ｄ以后的花蕾。     

甘蓝自交不亲和系、自交系花粉、柱头蛋白质的等电聚焦电泳和游离氨基酸分析

结球甘兰(Brassica oleracea L. var. capitata)自交不亲和系的测定,通常是用田间自交法来进行,这种方法费工费时。自建立了用水溶性苯胺蓝显示花柱中花粉管的技术后,又逐渐发展了利用荧光染色法快速测定自交不亲和性的方法。此法根据柱头上花粉萌发的数量确定不亲和程度,尚欠精确。研究表明,孢子体自交不亲和系统的花粉与柱头的识别机制是由S等位基因编码的S蛋白质决定的。美、英、日等国已先后分离鉴定出了这类S蛋白质。本试验旨在通过对甘蓝自交不亲和系及自交系花粉、柱头的蛋白质和氨基酸组分的分析,探讨利用蛋白质特性来快速测定植物孢子体型自交不亲和性的可能性。 材料与方法 试材采用西南农大园艺系蔬菜育种教研室选育的甘蓝自交不亲和系‘二乌叶86057’、‘北黑大86035’,二系统均是多代自交、高度稳定的自交不亲和系,1983年以来田间自交亲和指数均接近于0;自交系‘虹桥86047’,该材料也为多代自交,但亲和性稳定,1986年田间自交亲和指数达13.06。 等电聚焦电泳和氨基酸分析均测试“花粉”(P)、“柱头”(S)和“受粉后柱头”( P S)三项。花粉:取自开花前套袋隔离的花枝;枝头:隔离袋内,开花前1-2天彻底去雄,     

甜樱桃‘拉宾斯’自交亲和性与SFB4′基因的关系研究

甜樱桃品种‘拉宾斯’与‘雷尼’均为S1S4基因型。调查其自花结实率,‘拉宾斯’为31.3%,表现自交亲和;‘雷尼’为0,表现为自交不亲和。将‘拉宾斯’与‘雷尼’相互授粉,‘拉宾斯’为父本时表现亲和,反之不亲和,推断‘拉宾斯’的自交亲和性由花粉侧突变导致;调查花粉萌发率,‘拉宾斯’为58.08%,‘雷尼’为57.82%。鉴定‘拉宾斯’自交后代及其与‘雷尼’杂交后代的S-RNase的基因型,发现所有后代中均出现S4基因型,部分后代中出现S1基因型,证明‘拉宾斯’花粉育性是正常的,其亲和性可能是由S4基因座上花粉侧的基因突变导致。测序发现‘拉宾斯’花粉SFB4′在911 bp处有4个碱基缺失。分析‘拉宾斯’花粉SFB4′与花柱S4-RNase的连锁性,发现两者连锁率为100%。以‘拉宾斯’为父本的带有SFB4′的杂交后代的自花结实率为23.3%~61.4%,表现自交亲和,说明来源于‘拉宾斯’的SFB4′基因与自交亲和性有关。RT-PCR及测序显示‘雷尼’SFB4与‘拉宾斯’SFB4′均能正常转录,但4个碱基缺失导致其C端翻译提前终止,原核表达SFB4和SFB4′蛋白发现SFB4略大于SFB4′,推测是由于SFB4′的翻译提前终止导致的。以上结果表明:‘拉宾斯’的自交亲和性可能是由花粉侧SFB4′C端的氨基酸缺失导致,该缺失可能使其丧失了与S-RNase的识别能力。     

大白菜辽菘一号选育

1选育经过亲本之一早-23是以94年引进的沈阳改良快菜,经连续多代自交选育而成的自交不亲和系。在每代的自交筛选中,春季注意测定花期自交和蕾期自交亲和指数,选留花期自亲系和指数低的,而蕾期结实正常的单株,秋季在抗病、包心紧实、经济性状好的系统中选留单株。至2002年植     

转MLPK反义基因对甘蓝自交不亲和性的影响

对反义MLPK基因在甘蓝柱头特异启动子SLR的驱动下,通过农杆菌介导转化法将其导入高度自交不亲和甘蓝材料‘TF’。转基因甘蓝T0代植株定量PCR分析结果显示,不同的转MLPK反义基因单株内源MLPK mRNA积累量具有明显差异,其中转基因植株花期柱头内源MLPK mRNA积累量明显低于野生型对照。花粉原位萌发的荧光显微镜观察结果显示,转基因甘蓝植株花期自交后,吸附在柱头上的花粉粒大量萌发,且穿过柱头的花粉管明显增加,并导致花期自交结籽数上升,转基因植株花期和蕾期自交亲和指数均明显高于野生型对照植株。结果表明,下调MLPK基因表达能部分打破甘蓝自交不亲和,提高其花期自交结籽能力。     

大白菜的常规制种繁种技术探索

大白菜制种通常是利用自交不亲和系繁殖杂交1代种子,采用人工蕾期自交,用工量大,制种成本高。为了降低繁种成本,探索提高种子产量的方法,以大白菜新品种‘郑白65’为例介绍了大白菜的常规制种技术,并从亲本花期一致试验、初花期摘心试验、末花期打顶试验和亲本栽培密度试验4个方面,初步探索了提高大白菜单位面积种子产量的方法。     

青花菜主要性状在自交后代中的遗传稳定性

青花菜 (B .oleraceavar .italica)具有广泛的自交不亲和性 ,随着自交代数的增加 ,通过选择自交亲和指数迅速下降 ,3代后渐趋稳定。系内株高、分枝数、花蕾粗细、球茎髓部空实度、花瓣颜色等性状在自交 3～ 4代后趋于一致。花球成熟期自交 4代尚难稳定。球径 /球高比在世代间变化不大。花球大小、蕾期亲和指数、生长势等方面表现明显的自交衰退。     

鲜食加工兼用型黄桃优变株系选育研究

系统观察结果表明,5个鲜食加工兼用型‘黄桃’优变株系与来源品种相比,果型较大,锦绣黄桃的4个优变株系单果重均增加50 g以上,‘锦黄’增加16.6 g;‘硕锦1号’展叶期前各物候期较迟,盛花期延后5～7 d;‘锦黄’果实成熟期推迟约45 d;‘硕锦1号’、‘硕锦3号’、‘硕锦4号’、‘锦黄’果形为椭圆形、长椭圆形,与来源品种相似,‘硕锦2号’则以尖圆为主;‘锦黄’风味酸甜,明显异于‘丰黄’;各优变株系既符合黄桃鲜销市场供求走势,又能满足果品加工企业的原料需求,均显现出良好的选育前景与应用开发潜力。     

茄子抗病导入系的抗青枯病性及GISH鉴定

利用栽培茄与野生茄(Solanumtorvum)的种间杂种为供体,以两个栽培茄的自交系为轮回亲本进行多代回交,得到2个导入系"BILR-1","BILR-2"。经过抗青枯病及GISH鉴定,表明所得两个导入系对青枯病有很强的抗性,且它们含有野生茄(Solanumtorvum)的遗传物质,成功把野生茄(Solanumtorvum)的抗青枯病性状转到栽培茄子中。所得抗病导入系的染色体数量为24条,它们可以作为一种新的抗源未来在茄子抗病育种中加以应用。     

百合鳞茎不定芽诱导与增殖配方优化

以百合‘辛普隆’(‘Simplon’)和‘黄色风暴’(Lilium‘Yelloween’)的鳞茎为材料,MS为基本培养基,在(25±2)℃,暗培养下,采用正交试验设计方法研究百合鳞茎不定芽的诱导与增殖。结果表明:①NAA 0.2 mg·L-1有利于‘辛普隆’鳞茎诱导,诱导率80.21%,平均诱导鳞茎2.86个;②NAA 0.4 mg·L-1有利于‘黄色风暴’鳞茎诱导,诱导率46.41%,平均诱导鳞茎2.40个;③蔗糖是影响‘辛普隆’鳞茎增殖主要因子,6-BA是影响‘黄色风暴’鳞茎增殖的主要因子;④MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ad 5 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1组合有利于‘辛普隆’鳞茎增殖,增殖率2.22;MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ad 10.0 mg·L-1+蔗糖40 g·L-1有利于‘黄色风暴’鳞茎增殖,增殖率4.5。     

红富士苹果芽变系DNA甲基化研究

以35份富士苹果(Malus×domestica Borkh.‘Fuji’)芽变材料为试材,利用甲基化敏感扩增多态性(Methylation Sensitive Amplified Polymorphism,MSAP)分析和UPGMA聚类方法,对其基因组甲基化修饰水平、变异模式以及表观遗传变异关系进行研究。结果表明:(1)不同富士系得到不同的MSAP扩增,总DNA甲基化水平27.90%～36.16%,平均32.87%,双链全甲基化为主要甲基化方式;(2)富士芽变材料绝大多数位点保持了原有甲基化模式;(3)绝大多数芽变(68.57%)检测到全部的甲基化变异模式(12种),去甲基化频率极显著高于甲基化频率(P <0.01),且CG去甲基化极显著高于CHG;(4)36份种质遗传相似系数平均值0.89(0.79～0.92),在聚类图上,富士原种分布在芽变系集中区外,新近发生的芽变系更倾向于聚在一起,着色系片红型和条红型芽变呈分散排布状态。总的来看,富士芽变的甲基化变异模式丰富,超甲基化和去甲基化相伴发生,但以去甲基化为主;‘富士’着色芽变与其最原始品种富士,以及芽变之间发生了较大表观遗传变异;片红和条红型芽变聚类未表现明显偏好性。本研究将为进一步开展富士着色系芽变机理研究提供指导,可以CG去甲基化为切入点展开深入研究。     

油菜薹和蕾中硫代葡萄糖苷组分及含量分析

采用超高效液相色谱(UPLC)法,对30个油菜品种薹和蕾中硫代葡萄糖苷(glucosinolate,简称硫苷)的组分及含量进行测定。结果表明:30个油菜品种的总硫苷含量变异范围较大,在21.67～119.29μmol·g^-1之间;大多数油菜品种蕾中的硫苷含量高于薹,蕾中硫苷含量均值为37.26μmol·g^-1,薹中为28.06μmol·g^-1;薹和蕾中的硫苷组分相似,均以4-戊烯基硫苷和2-羟基-3-丁烯基硫苷为主要成分,两者在薹和蕾中的含量分别占总硫苷含量的46.24%、28.52%和45.19%、29.13%。进一步分析高、中、低硫苷含量油菜品种的硫苷组分及含量,结果表明油菜不同品种间硫苷含量的差异主要是由4-戊烯基硫苷引起的。     

桃ABA 8’–羟化酶基因PpeCYP707As在拟南芥中过表达的功能分析

以8年生‘中油4号’油桃为试材,对休眠期的枝条进行ABA和GA处理发现,ABA延迟芽体萌动,GA促进萌芽和提前开花,在桃芽萌发中ABA和GA起拮抗作用。利用转基因技术在拟南芥中过表达桃ABA分解代谢关键酶ABA 8’–羟化酶基因PpeCYP707A1、PpeCYP707A2和PpeCYP707A3,获得纯合株系,RT-PCR结果表明,目的基因在过表达株系中的表达量分别达到对照的23.86倍、7.37倍、3.23倍;过表达株系生长缓慢,抽薹、开花延迟,其中过表达PPECYP707A1株系生长最慢,开花最晚;过表达株系种子萌发和幼苗生长对ABA不敏感,受伤害程度小;10℃低温处理试验证明,过表达株系相对生长速率高于野生型,推测低温条件下,过表达CYP707As正调控拟南芥的生长发育。     

桃花源桃花品种资源及其特殊种质

桃花源现有桃花品种25个,具有花期较早、花期较长、花色淡雅、色调柔和、花型活泼等特点。其中,‘春蕾’、‘单二乔’、‘碗寿粉’为首次报道品种;‘单红’、‘单二乔’雌蕊败育,需冷量极低,流胶病抗性强,具有稳定的秋花特性,是早花、抗流胶病品种选育的良好亲本。     

油桃开花时间调控基因在花芽休眠过程中的表达分析

对拟南芥中21个调控开花时间的基因进行NCBI blast比对后找到桃中所对应的同源基因,以拟南芥的突变体表型及基因注释功能为依据分为促进开花和抑制开花两类。以7年生‘曙光’油桃花芽为试材,利用水培法测定萌芽率,界定休眠分为诱导期、自然休眠期和休眠解除期3个阶段。研究结果表明诱导期和自然休眠期内花芽单芽质量上升平缓,休眠解除后突然升高到0.12 g,翌年2月9日达到0.15 g;而花芽含水量从诱导期开始缓慢下降,在休眠解除时达到最低水平（39%）,之后平稳上升到53%。聚类分析发现,两类基因对开花的影响与其在休眠进程中的表达趋势不存在必然的相关性。利用荧光定量PCR（RT-PCR）技术测定目的基因在休眠过程中的表达特性,发现在休眠进程（自然休眠和休眠解除期）中PpFT-like和PpCO-like表达量逐渐升高,推测其可能与需冷量积累相关。PpDDL-like、PpCCT-like、PpELF8-like、PpAMP1-like、PpHUA2-like和PpHUB1-like表达量先升高后降低,在休眠解除时达到最高水平之后随休眠解除下降,与花芽休眠解除进程一致,推测其可能参与调控花芽休眠解除过程。     

盆栽观赏苹果疏花促果调控试验初报

在花期对盆栽‘冬红果’和‘舞美’采取不同疏花方式进行调控,试验结果表明:‘冬红果’采取每隔5个花序留1花序,其余4个疏除和隔12个花序集中留3个花序,其余9个花序疏除,花枝上端(1/4)全部疏除,留花枝侧下花序处理方法,坐果数和单果重较对照分别提高30.1%、24.2%,2种方法之间无显著差异。‘舞美’采取每隔10cm留1个花序,每花序留中心花,其余花序和花朵疏除,所留花朵位于枝条侧下位和每隔25cm留3个花序,留侧下花序,每花序留中心花,其余全部疏除的处理方法,较对照坐果率和单果重分别提高26.2%、36.11%;2种处理方法效果显著好于对照。该试验找出了适合2品种盆栽条件下的花期最佳疏花促果调控措施。     

石竹试管花的诱导及其影响因子的研究

以石竹试管花的茎段为材料，研究了几种因子对试管花形成的作用。结果表明，开花植株的茎段可稳定地保持形成花芽的能力；外源激素对试管花的形成不是必需的因子。低浓度的生长素利于长根，对花芽的形成没有明显的影响，但较高浓度明显地抑制试管花的形成；细胞分裂素只促进营养芽的分化，完全抑制花芽的形成；所试培养基的各类和浓度除Ｎ６培养基外对花芽的作用没明显的差异；在缺ＮＨ４ＮＯ３的培养基中植株的营养生长受到抑制，植株变矮，叶片数减少，基部叶片发黄，植株提前开花，但不影响开花率。植株上部茎段比下部茎段形成花芽的频率高。