2009年诺贝尔自然科学奖揭晓

物理学奖 2009年诺贝尔物理学奖授予英国华裔科学家高锟以及美国科学家威拉德，博伊尔和乔治·史密斯。     

化学生物学综合创新设计实验——大肠杆菌中表达绿色荧光蛋白

笔者设计了一个化学生物学综合实验——构建含有绿色荧光蛋白基因的表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,诱导其表达,并检测其表达情况。通过本实验可以使学生掌握化学生物学中基本的操作技术,熟悉绿色荧光蛋白作为一种荧光分子成像探针的检测方法,从而为进一步学习和掌握复杂的、综合性的化学生物学技术打下扎实的基础。     

拟南芥热激转录因子AtHsfA6a的克隆与细胞定位分析

【目的】研究拟南芥热激转录因子AtHsfA6a在植物细胞中的定位及其作用机制。【方法】用RT-PCR方法从野生型拟南芥总RNA中,扩增获得了849 bp的拟南芥热激转录因子AtHsfA6acDNA片段,经过测序,结果与公布的序列完全相同。将该片段与绿色荧光蛋白(GFP)基因的cDNA重组,并克隆到表达载体pCHF3上,经PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确。按照Clough等的方法转化拟南芥,经Kanamycin筛选和PCR检测,得到转基因植株;用激光共聚焦扫描荧光显微镜观察转基因植株幼苗的根部。【结果】在正常条件下,融合蛋白存在于细胞质中。【结论】在正常条件下拟南芥热激转录因子AtHsfA6a在细胞质中表达。     

用于筛选化学预防剂的报告载体的构建

构建以TK为基本启动子,其上游由抗氧化反应元件(ARE)调控的报告载体pARE-TK-GFP以期用于化学预防剂的筛选.应用重组PCR技术,分别经3次PCR获得重组TK启动子并克隆入pMD18-T栽体中,经酶切和测序鉴定正确后连入pEGFP中构建载体pTK-GFP.人工合成的ARE插入TK基本启动子上游,成功构建报告载体pARE-TK-GFP.脂质体转染HepG2细胞并在荧光显微镜下观察有绿色荧光.该栽体的成功构建可为各种天然或人工合成的化学预防剂的筛选奠定基础.