犬血型DEA1.1抗原生化特性的研究

为了研究犬血型DEA1.1抗原生化特性,为犬输血前血型检测提供理论依据,试验采用凝聚胺介质试剂调查356只不同地区及品种犬的DEA1.1血型频率分布,用考马斯亮蓝法检测DEA1.1红细胞膜蛋白并通过免疫沉淀鉴定血型蛋白大小,观察多种酶处理对DEA1.1抗原性的影响,通过ABO血型检测试剂和ABO型微柱凝胶检测卡检测人类红细胞ABO血型与犬DEA1.1血型有无交叉反应。结果表明:不同品种犬的血型频率差异较大,DEA1.1血型为50 ku和200 ku膜蛋白;DEA1.1抗原在无花果酶、木瓜酶、链霉蛋白酶处理后抗原性增强,在菠萝酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶处理后抗原性未增强;DEA1.1阴、阳性红细胞与ABO血型试剂均未发生凝集。说明为降低输血反应,最好采用DEA1.1血型频率低的犬种作为供血犬,并建议输血前采用木瓜酶介质交叉配血试验进行血型检测。     

犬DEA1.1血型抗体间接Dot-ELISA检测方法建立

为了建立一个更为简单和敏感的方法,以作为不使用试剂红细胞检测犬DEA1.1血型抗体的替代方法,从犬DEA1.1阳性红细胞中分离出细胞膜。将携带DEA1.1阳性抗原的膜置于硝酸纤维素膜上,加入初级抗体和辣根过氧化物酶标记的二级抗体,采用TMB显色试剂盒检测。对照试验采用凝聚胺抗球蛋白试验检测DEA1.1抗体。用DEA1.1阳性和阴性血型抗原检测Dot-ELISA的灵敏度、稳定性和特异性。用158只犬的血清样本检测Dot-ELISA的准确性。结果显示,Dot-ELISA方法比凝聚胺抗球蛋白试验灵敏8倍以上。即使细胞膜反复冻融20次,其抗原稳定性也不受影响,并且可在-20℃时长期稳定保存。在对158只犬血清检测的过程中,该方法展现了与凝聚胺抗球蛋白试验较高的相关性。表明本研究成功建立了犬DEA1.1血型抗体Dot-ELISA检测方法,并且方法稳定、灵敏、无需试剂红细胞,可以作为输血前传统抗体检测的一种有效替代方法。     

犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立

为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件。结果显示,最佳固定剂为浓度0.062 5%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量为4～8μg/孔,最佳封闭液为5%的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min。与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测。     

犬红细胞抗原1.1血型多克隆抗体的制备与鉴定

为了制备犬红细胞抗原1.1(DEA1.1)血型多克隆抗血清,用犬血型快速检测卡分别鉴定DEA1.1阳性犬和DEA1.1阴性犬,用DEA1.1阳性犬完整红细胞免疫DEA1.1阴性犬。多次免疫后采集阴性犬血清,用抗球蛋白血凝试验验证多抗血清的符合率。结果显示,制备的多抗血清与商品化的多抗血清符合率为98%。抗球蛋白试验检测抗体血凝效价为211。试验表明,制备的犬血型DEA1.1多克隆抗体能达到血型鉴定的要求,能满足国内犬临床输血中DEA1.1血型检测的要求。     

巨犬1.1米高 世界第一

<正>《扬子晚报》消息美国亚利桑那州有只名叫"大乔治"的大丹狗,才4岁大身高就将近110厘米,脚掌甚至比人的拳头还大,远远望去常让人误     

犬血型系统研究进展

输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同时,也会带来危险与伤害,异体输血时,血型不符可能产生输血反应,严重时可以致死患犬。论文主要对犬血型的发现历程和命名、不同血型之间的差异和生化特性以及各种犬血型输血时可能出现的反应进行综述,探讨临床上如何对犬进行安全、有效输血以及当前存在问题,最后对DEA1.1血型频率研究现状以及犬血型检测方法进行介绍。     

犬的血型与输血疗法

1 犬的血型 通过直接或间接凝集反应以及溶血反应,人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原.到目前为止,已报道的犬血型有红细胞抗原(DEA)1.1(A1)、红细胞抗原1.2(A2)、红细胞抗原3(B)、红细胞抗原4(C)、红细胞抗原5(D)、红细胞抗原6(F)、红细胞抗原7(Fr)和红细胞抗原8(He).     

犬肿瘤抗原和单克隆抗体的研究

肿瘤是人类及犬主要死亡原因之一,在有的地区死亡病例的三分之一为恶性肿瘤所致。肿瘤抗原比较弱,有的肿瘤可能很难检测到肿瘤特异性抗原,所以研究难度比较大。虽然,有些研究者利用肿瘤抗原研究制备出特异性单克隆抗体,但研究成果不太理想。利用免疫耐受法,选择性地杀死非肿 瘤抗原刺激活化的淋巴细胞。经过多次处理后,使小鼠失去对正常组织的反应能力,从而使抗原性较弱的肿瘤抗原产生阳性反应,出现有反应性的 Ｂ淋巴细胞。经过与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合和筛选,成功地得到犬肿瘤特异性单克隆抗体。     

SOD对比格犬全血保存作用的研究

<正>在现代医学中,输血是常用的急救和治疗措施。保存血液的质量好坏直接影响输血治疗的效果。在血液保存过程中会产生大量氧自由基,破坏红细胞表面的脂质和蛋白造成红细胞氧化损伤[1]。马恩普等[2]将超氧化物歧化酶(SOD)作为抗氧化剂溶入GMA保存液中对人全血进行保存,结果表明,能延长血液保存时间。M.Jówik等[3]研究发现,用枸橼酸     

犬吸入抗原性变态反应

吸入抗原性变态反应又称特异性或吸入变态性皮炎 ,它是一种与遗传及反应素 (主要是 Ig E)有关的自发变态反应的慢性进行性皮肤病。该病在临床上并不多见 ,笔者 1997年 8月遇一体重约 15kg的 2 0月龄黑白花牛头犬 (母 )患此病。1　症状患犬全身瘙痒 ,眼周、胸腹部 ,尤其是腋下及     

甘肃现1.1亿年前蜻蜓化石 翅膀保存完好

<正>住在城里的娃娃们,如今想看到蜻蜓几乎不太容易。事实上,蜻蜓在地球上已经生活了几亿年。最近,中科院南京地质古生物所硕士研究生郑大燃和导师张海春,在甘肃酒泉发现了生活在1.1亿年前的远古蜻蜓——巴依萨昼蜓的化石。现代快报记者了解到,它们和现代蜻蜓的模样没啥差别,简直比来自星星的都教授400年容颜不变还牛。1.1亿年前的蜻蜓,翅膀仍完好保存中科院南京地质古生物所硕士研究生郑大燃的桌上,摆放着各类     

犬链球菌保护性抗原的鉴定

为克隆、表达犬链球菌(S.canis)保护性抗原基因,并对其表达产物进行免疫原性分析.本研究以Lambda ZAP Ⅱ载体构建了S.canis的3 kb～8 kb随机基因组文库,通过S.canis阳性血清筛选和质粒拯救,获得一株阳性克隆重组质粒并进行了序列测定.通过BLAST分析并与GenBank中登录的相近基因序列比较发现,该基因为S.canis的1个保护性抗原(SPASc)基因,该基因与兽疫链球菌和产脓链球菌的保护性抗原及马链球菌M蛋白基因具有一定的同源性.根据该序列设计特异性引物,经PCR扩增、克隆并进行了SPASc基因的原核表达.用纯化SPASc重组蛋白免疫兔制备的血清对小鼠具有保护性作用.     

犬新孢子虫抗原的研究进展

犬新孢子虫是专门寄生于细胞内的复顶门原生动物寄生虫。犬新孢子虫病给养牛业造成了严重的经济损失,全球已有很多国家检测有新孢子虫病,该病主要的传播方式是胎盘传播和接触传播。目前尚无有效的治疗药物和疫苗来控制该病的发生和发展,疫苗的研究是当前研究新孢子虫病的热点问题,而抗原的研究是研究犬新孢子虫病疫苗的基础。目前国内外研究主要集中在表面抗原、微线抗原及致密颗粒抗原,现综述如下。     

犬胚胎冷冻保存研究进展综述

对胚胎进行冷冻保存是保存物种遗传资源,保持生物多样性的一个重要手段。冷冻胚胎可保种,还便于运输,有利于进行地区和国际间的交流。Beagle犬作为生物医药行业重要的基础支撑条件之一,相比其它实验动物,其冷冻保种技术仍未广泛应用。目前有关Beagle犬胚胎冷冻的研究报道较少。本文从犬胚胎着床前发育、卵母细胞/胚胎冷冻保存及胚胎移植方面进行综述,旨在为Beagle犬胚胎冷冻提供参考。     

犬精液常温保存的稀释液配方筛选试验研究

犬精液常温保存技术是实现犬人工授精的重要环节,对大力推广犬人工授精具有重要意义。本试验参考国内外相关报道,选择了4种常温保存稀释液配方进行对比试验,通过对精子有效存活时间、总存活时间、存活指数等项目测定,分析它们对公犬精液品质的影响。筛选出C号、D号稀释液配方,14～18℃恒温下精子O级和5级保存时间分别达105.O±17.0h和114.0±12.0h、总存活时间为132.O±14.0h和l50.0±16.0h、生存指数为71.2±l0.4h和74.6±l4.0h,极显著优于对照组(P相似文献   

犬保存骨骼血管铸型标本腐蚀及保存方法初探

动物形态解剖学是学习动物科学相关专业的基础。动物血管系统是解剖学的重要组成部分,为了直观整体血管的立体构筑和主要脏器及骨骼之间的位置关系,共铸造出了4具犬整体血管铸型。此标本保持了各个内脏器官和头部、躯干和四肢原有的基本形态和血管立体构筑及骨骼。该标本有利于对动物     

犬传染性肝炎病毒的形态发生学及抗原定位研究

应用免疫金电子显微镜技术研究了犬传染性肝炎病毒(ICHV)在犬肾传代细胞内的增殖过程及其病毒抗原在感染细胞内外的定位.结果显示:(1)吸附在细胞膜表面的病毒粒子,主要通过细胞吞饮作用侵入细胞,而吸附在微绒毛膜表面的病毒粒子则可直接“渗入”细胞;(2)在病毒感染不同时用的细胞核内观察到均质型、微粒型、颗粒型、副晶格型、病毒包涵体型及致密型等6种类型包涵体,其中前5种能被免疫金标记,它们是尚未形成病毒粒子的抗原蛋白、病毒装配后剩余的抗原蛋白或ICHV的病毒粒子结晶,致密型包涵体未被免疫金标记,可能是病毒DNA;(3)感染细胞内出现的某些特殊结构均不具有病毒抗原性,其中纤维样结构和管状结构在病毒增殖过程中起支持作用.