白腹皮蠹幼虫肠道细菌分离及鉴定

为了研究白腹皮蠹幼虫肠道环境中的细菌种类,从中分离、纯化、培养,获得6个细菌菌株,对其培养性状、染色反应、菌体形态、生理生化反应进行系统研究。鉴定结果表明,上述6个细菌菌株分别属于坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、气微菌属(Aeromicrobium Miller,Woese and Brenner,1978)、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)、葡萄球菌属(Staphylococcus Rosenback,1884)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)和短芽孢杆菌(Bacillus brevis)。从白腹皮蠹肠道环境中分离出6个菌株,鉴定出分类地位,菌株之间的数量存在明显差异,以巨大芽孢杆菌数量最多(5.32×1019),需要进一步研究该6个菌株在白腹皮蠹肠道环境中的具体作用,以期寻求有效防治白腹皮蠹的新途径。     

白腹皮蠹成虫的飞翔特点

白腹皮蠹飞翔虫口比例,在25℃时为12％,30℃时为19.74％。光度为500lx时,短时间内即可刺激成虫起飞。在黑暗条件下,成虫保持安定。飞翔虫口较取食的多14～21％。未交配飞翔成虫的雌虫占73～78％。配对成虫中有12.02％成虫飞翔,雌虫为50％。雌虫未产卵,或开始产卵,或羽化后15天内起飞的较多。     

豆天蛾幼虫肠道细菌分离及初步鉴定研究

豆天蛾是豆类作物生产过程中的一种重要害虫,也是一种重要的食用昆虫资源,在山东省、江苏省的部分地区已形成特色菜肴。本文从人工饲养种群的老熟幼虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得细菌8个菌株,对其菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应进行厂系统研究。鉴定结果表明：1号细菌菌株属于纤维单胞菌属(Cellulomonas);2、3号菌株暂小能确定所属地位,分别记为Clanis bilntata(L_2)、Clanis bilineata(L_3);4～7号细菌菌株分别属于地杆菌属(Terrabactcr)、短状杆菌属(Brachybactefium)、李斯特氏菌属(Listefia)、丙酸杆菌属(Propi- onibactefium);8号菌株为枯草芽孢杆菌(Baciplus subtilis)。不同细菌属之间在豆天蛾幼虫肠道环境中存在数量方面的明显差异。     

白腹皮蠹虫生长发育的研究

白腹皮蠹在重庆地区能危害10种以上的动物性仓贮食品。以大龄幼虫或成虫越冬,5月份产卵。部分个体一年可发生2-3代。在29℃和高湿度条件下,产卵时间为32.2±9.04天,每头产卵162±11.32粒。在24—30℃条件下,卵历期为4—7天,孵化率为60%以上;在9—10℃时为12天,卵的死亡率80%以上。幼虫历期随龄数增多而延长。在20℃条件下,幼虫能形成蛹。在15℃、25℃、和30℃时,蛹历期分别为25±7.02天、9.47±1.77天和5.97±1.07天。在25℃时,踊羽化率高达89%,30℃为100%。     

2005～2011年上半年焦作进境白腹皮蠹疫情分析

目的:分析近年来焦作检验检疫局截获白腹皮蠹疫情特点、趋势及规律,为检验检疫系统截获防护白腹皮蠹疫情提供参考.方法:利用EXCEL建立数据库,采用EXCEL自带的软件包进行统计分析;采用时间序列方法对白腹皮蠹疫情截获时间进行分析.结果:2005～2011年上半年焦作检验检疫局共截获白腹皮蠹疫情14批,各年度截获白腹皮蠹疫情数依次为1批、0批、4批、2批、1批、1批、5批.所有截获白腹皮蠹疫情中乌拉圭5批占35.714％,阿根廷4批占28.571％,美国2批占14.286％,南非、荷兰、加拿大各1批占7.143％.截获白腹皮蠹疫情绵羊皮构成中,甜板皮(a)8批占57.14％,盐干皮(b)4批占28.57％,混合型2批占14.29％.除2006年没有截获外,每年均有截获,且各年度呈现一定程度的春夏两季发生白腹皮蠹疫情高峰.结论:近年来随着贸易国别的不断扩大,进境绵羊皮批数的增加,焦作检验检疫局截获白腹皮蠹疫情上升了5倍以上,焦作地区羊皮加工业受白腹皮蠹疫情的威胁日益增多,携带白腹皮蠹疫情的发生也呈增加趋势.建议进一步加强检验检疫系统疫情防控工作,包括制定疫情防控计划、加强人员配备、强化企业安全、卫生意识、加强产品装运前除害处理等措施.     

2005～2011年上半年焦作进境白腹皮蠹疫情分析

目的：分析近年来焦作检验检疫局截获白腹皮蠹疫情特点、趋势及规律,为检验检疫系统截获防护白腹皮蠹疫情提供参考。方法：利用EXCEL建立数据库,采用EXCEL自带的软件包进行统计分析;采用时间序列方法对白腹皮蠹疫情截获时间进行分析。结果：2005～2011年上半年焦作检验检疫局共截获白腹皮蠹疫情14批,各年度截获白腹皮蠹疫情数依次为1批、0批、4批、2批、1批、1批、5批。所有截获白腹皮蠹疫情中乌拉圭5批占35．714％,阿根廷4批占28．571％,美国2批占14．286％,南非、荷兰、加拿大各1批占7．143％。截获白腹皮蠹疫情绵羊皮构成中,甜板皮（a）8批占57．14％,盐干皮（b）4批占28．57％,混合型2批占14．29％。除2006年没有截获外,每年均有截获,且各年度呈现一定程度的春夏两季发生白腹皮蠹疫情高峰。结论：近年来随着贸易国别的不断扩大,进境绵羊皮批数的增加,焦作检验检疫局截获白腹皮蠹疫情上升了5倍以上,焦作地区羊皮加工业受白腹皮蠹疫情的威胁目益增多,携带白腹皮蠹疫情的发生也呈增加趋势。建议进一步加强检验检疫系统疫情防控工作,包括制定疫情防控计划、加强人员配备、强化企业安全、卫生意识、加强产品装运前除害处理等措施。     

花斑皮蠹和黑斑皮蠹(鞘翅目:皮蠹科)的快速分子鉴定

斑皮蠹属昆虫个体小,形态高度相似,仅依据外部形态难以鉴定。用线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)基因的通用引物,分别以黑斑皮蠹(Trogoderma glabrum)、花斑皮蠹(Trogoderma variabile)的DNA为模板,进行PCR扩增、测序。比较二者COI的碱基序列,找出所有序列多态性位点及相应的限制性内切酶,最终选取限制性内切酶AflⅡ对二者进行酶切。结果表明,黑斑皮蠹的COI序列可被限制酶AflⅡ切开,形成535bp和347bp两部分,而花斑皮蠹COI片段中因不具有AflⅡ酶切位点而不能被切开,从而将二者成功区分,实现对黑斑皮蠹和花斑皮蠹的快速分子鉴定。     

鲢鱼肠道细菌的分离鉴定及药敏试验

从鲢鱼肠道中分离得到2株细菌,菌株编号为SC-1、SC-2,并进行细菌形态学、生理生化特性、药敏试验等研究。结果表明:2株细菌均为革兰氏阴性菌,氧化酶阴性,过氧化氢酶阳性,吲哚和VP试验阴性,均不产生苯丙氨酸脱氨酶,均能利用枸橼酸盐、葡萄糖、山梨醇、木糖等;采用数值编码鉴定,SC-1为费氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),SC-2为罗氏耶尔森氏菌(Yersinia rohdei)。进一步的药敏试验分析显示,2株菌均对青霉素类(氨苄青霉素、氧哌嗪青霉素)、头孢菌素类(头孢孟多、头孢氨噻肟、先锋必素)、氨基苷类(庆大霉素、卡那霉素、乙基西梭霉素)等抗生素敏感。以上研究结果对揭示鱼类肠道菌群结构及鱼病防治等具有重要参考价值。     

花斑皮蠹生物学研究及幼虫密度对化蛹的影响

为搞清楚花斑皮蠹的生物学特性和幼虫密度与化蛹的关系,对花斑皮蠹采用室内 饲养和系 统观察。结果表明,（1）在相对湿度为（75±3）%,温度为35℃、32.8℃、27.8℃、2 2.8℃、17.8℃的 条件下,花斑皮蠹的蛹期分别为（3.97±0.91） 、（4.07±0.88）、（5.13±0.89）、 （9.41±1.49）、（18. 8±4.3）d,成虫产卵前期分别为（2.14±0.69）、（2.25±0.59）、（2.43±0.92）、 （4.53±2.34） 、 （ 17.23 ±5.65）d,卵期分别为（5.59±0.49）、（5.9±0.97） 、（8.85±1.04）、 （13.79±1.0） 、（28.6 ± 0.26 ） d,蛹平均羽化率为（98.7±0.4）%,每雌虫平均产卵量为（53.6±5.8）粒, 卵平均孵化率为 （82.8±3.7）%;（2）羽化后的成虫取食蜂蜜后其寿命相应延长,未交尾的雌虫寿命长 于雄虫,而交 尾后则相反;（3）虫口密度越大末龄幼虫化蛹历期越长;（4）雌雄性比为1.0∶1.1。     

1株烟草青枯病拮抗内生细菌的分离及鉴定

为了筛选具有生防价值的拮抗烟草青枯雷尔氏菌的内生细菌,从湖南长沙、永州、郴州烟草青枯病发病区的健康烟株采集茎秆,采用稀释平板分离法获得150个内生菌株.抑菌结果表明,21个内生菌株对烟草青枯雷尔氏菌2316菌株有拮抗效果,占总菌株数的14.0％.拮抗菌株中,F1菌株24 h对烟草青枯雷尔氏菌株2316抑菌圈直径达6.5...     

产碱性蛋白酶海洋细菌的筛选与鉴定

从福建海域的海水、海泥及海藻样品中分离到3株产碱性蛋白酶的海洋细菌菌株3B、6CW、15E,采用16S rDNA分子生物学鉴定结合细菌的常规鉴定方法,确认分离到的3株产蛋白酶的海洋细菌菌株分别是荧光假单胞菌(Pseudom onas fluo-rescens)、粘质沙雷菌(Serratia marcescens)和氧化短杆菌(Brevibacterium oxydans),并对其发酵液中的蛋白酶活力做了初步研究.     

猪高热综合症的细菌分离鉴定

2001年7月,浙江及其周边地区爆发了猪高热综合症,该病以持续高温、食欲废绝、皮肤发红为主要特征,病死猪解剖可见肾脏苍白呈土黄色,淋巴结水肿或出血,大叶性肺炎和心脏疲软.通过检测近期临床分离的病原菌的变化特点,能够了解在该病下的细菌继发情况,以利于病原菌的监控和治疗,指导抗生素的有效使用.结果表明,革兰氏阳性细菌所占比例明显高于革兰氏阴性细菌,分别占67.8和31.2;革兰氏阳性细菌中,葡萄球菌又占很高的比例,约占整个细菌分离量的54.1,猪链球菌约占8.2,埃希氏大肠杆菌约占30.8.     

2株昆虫病原线虫共生菌的分离与初步分类鉴定

从陕西杨凌采集的昆虫病原线虫S teinernem a sp.YL 001和S teinernem a sp.YL 002肠道内分别分离到1株具有较高杀虫和抑菌活性的共生菌菌株YL 001和YL 002,并对其从形态特征、培养特性及生理生化特征等方面进行了鉴定。结果表明,YL 001和YL 002菌株分别为嗜线虫致病杆菌(X enorhabdus nem a toph ila)和伯氏致病杆菌(X enorhabdus bov ien ii)。     

黑熊肠道乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

从延边地区黑熊肠道中分离并鉴定出3株乳酸菌,其中,嗜酸乳杆菌2株,发酵乳杆菌1株．根据其活性及胆盐耐受性选择2株嗜酸乳杆菌（L-1,L-3）进行耐酸试验、抑菌试验及毒性试验．结果表明,这2株嗜酸乳杆菌在胆盐含量0．3％,pH值为2．0时仍然生长,其代谢产物对常见致病菌有较好抑制作用,对小白鼠的毒性试验无毒性．这表明该菌株完全能适应动物胃肠道环境,作为微生态制剂用菌种具有较好的潜力．     

热泉土壤来源的纤维素降解菌的分离与初步鉴定

通过富集培养方法,从5份热泉土壤中筛选得到6株具有羧甲基纤维素(CMC)降解活性的菌株。采用原核生物保守16S r RNA核糖体基因序列分析,发现它们分别隶属于假单胞菌属、芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属。在此基础上,对6株纤维素降解菌的生长温度、pH值、抗生素敏感性、盐离子耐受性以及羧甲基纤维素酶(CMCase)活力做了初步研究。结果表明,芽孢杆菌属的菌株WP-6和WP-3的CMCase活力最强,胞内酶活力最高达72.0 U·m L~(-1),假单胞菌株WP-2的CMCase活力最弱,胞内外酶活力均小于5.0 U·m L~(-1)。生理学结果显示,6个降解菌株都具有嗜热特点及不同程度的耐盐特性,给后续高温及盐离子耐受性纤维素酶开发提供了较好的材料。     

具氯氰菊酯降解功能的植物内生细菌分离鉴定及降解特性研究

从上海郊区某农药厂附近生长的牛筋草中分离到一株能以氯氰菊酯作为唯一碳源生长的植物内生菌,命名为A-24。该菌在48 h内对20 mg·L^-1的氯氰菊酯的降解率为91.8%,72 h内可完全降解氯氰菊酯。通过生理生化观察,结合16S rRNA基因序列分析,将该菌株鉴定为Achromobacter sp.。菌株A-24降解氯氰菊酯的最适温度和pH分别为30℃和7.0;当菌株A-24的接种量≥2%时,其对20 mg·L^-1氯氰菊酯的降解效果较好,降解率在80%以上;当氯氰菊酯浓度≤50 mg·L^-1时,菌株A-24对氯氰菊酯有较高的降解率,降解率在70%以上。通过HPLC鉴定降解产物3-苯氧基苯甲酸,推测氯氰菊酯通过酯键断裂生成二氯菊酸和3-苯氧基苯甲醛,然后3-苯氧基苯甲醛生成3-苯氧基苯甲酸。本研究结果为利用功能内生细菌调控植物代谢氯氰菊酯,进而有效规避作物污染风险提供新途径。     

海洋细菌的分离、鉴定及抗烟草花叶病毒活性分析

从福建霞浦海域分离、筛选到6株对烟草花叶病毒(TMV)具有体外钝化活性的菌株,其中,菌株9和10的抑制率较高,分别达95.26%和92.18%.进一步测定2株菌对TMV的抑制增殖活性,结果表明,菌株9和10可明显抑制TMV的增殖,其抑制率分别为36.29%和35.08%.通过对2株菌的形态特征、生理生化反应及16S rDNA序列的分析,将菌株9鉴定为蜡样芽孢杆菌,菌株10鉴定为水生海洋芽孢杆菌.     

灭草烟在甘蔗愈伤分化阶段和刚成苗阶段浓度筛选试验

从催吐萝芙木中分离到1株对香蕉炭疽菌拮抗作用较强的菌株LYM3,皿内拮抗活性达到64％,通过常规鉴定结合16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).通过单因素法对其产抗菌活性物质的发酵条件进行了优化,获得其最适培养基组成为:可溶性淀粉2％,胰蛋白胨1％,酵母粉0.8％,NaCl 1％,初始pH 6.0、28℃、180 r/min发酵培养60 h,抗菌活性物质产量达到最高,抑菌圈直径为3.42cm.     

产氢菌AUH-BG208的分离鉴定与产氢特性

从白冠长尾雉粪样中分离出一株产氢量高的细菌菌株,命名为AUH-BG208。通过革兰氏染色和耐氧性测定,菌株AUH-BG208为革兰氏阴性兼性厌氧菌株。菌株AUH-BG208形态学及生理生化特征与克雷伯氏属一致,通过菌株16S rDNA序列分析,发现该菌株与肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae(AJ233420)相似性为100%。此外,对菌株AUH-BG208在不同条件下的产氢特性进行了测定。结果表明:该菌株在起始pH值为7.0,葡萄糖浓度为40 g/L,以酵母粉和硝酸钾为氮源时产氢能力最强,产氢量为1 900 mL/L。