鸡γ-干扰素cDNA的克隆和在大肠杆菌中的温度诱导型表达

克隆了鸡(Gallus gallus)的γ-干扰素cDNA，并用大肠杆菌(Escherichia coli)进行了温度诱导型表达。用PCR方法扩增了鸡γ-干扰素基因组基因，将其克隆到载体pGEM-T上。对重组载体的插入片段进行酶切分析和部分序列测定：证明了基因的正确性；克隆的鸡γ-干扰素基因的编码序列中存在一个点突变(G→A)，这一突变导致一个三联体密码子GAA变为AAA，编码的氨基酸由谷氨酸(Glu)变为赖氨酸(Lys)。用鸡γ-干扰素基因组基因构建了真核表达载体pCI-ChIFN。将这一真核表达载体转染兔成纤维细胞的细胞系中进行表达实验：提取转染后细胞裂解物中的RNA，再以此为模板进行RT—PCR，获得了完整的鸡γ-干扰素cDNA基因，同时证明鸡γ-干扰素基因组基因能在兔成纤维细胞系中表达。用鸡γ-干扰素cDNA构建了温度诱导型原核表达载体pBVcDNA，并将其转导到大肠杆菌DH5α中，经细菌发酵和温度诱导，表达了一个18kD的特异蛋白，其表达量占细菌总蛋白的8．75％。     

cDNA微阵列检测水稻幼苗空间特异表达基因*

以含有2200个独立水稻转录本的膜质cDNA微阵列鉴别萌发期水稻(Oryza sativa L.)幼苗的空间特异表达基因。经比较表达谱，得到了在胚芽、胚轴和胚根中特异表达的基因分别为31、36和73个。其中，胚轴特异表达基因包括聚泛蛋白、UDP-葡萄糖焦磷酸酶、蔗糖合酶、磷酸甘油酸激酶等参与糖、蛋白质代谢反应的蛋白，意味着在萌发期水稻幼苗中，胚乳贮藏淀粉和贮藏蛋白的降解反应主要发生在胚轴部。实验检测到的胚芽和胚根特异表达基因包括一些具有防御功能的基因及多个参与复制、转录和翻译过程的基因，如胚芽特异表达的基因中，翻译起始因子5a、40s核糖体蛋白s28及核糖体蛋白136与蛋白合成有关；而过敏性蛋白、β-D-葡聚糖外水解酶和肌动蛋白-11等为抗病相关基因。胚根特异表达的基因中，肽链延伸因子1-α、TATA盒结合蛋白、DNA复制蛋白A2、组蛋白和两种核糖体蛋白等与复制、转录和翻译有关；而富含甘氨酸蛋白、创伤诱导性碱性蛋白、Bowman-Birk蛋白酶抑制因子、脂类转运蛋白-2等基因则与幼苗的防卫反应有关。通过分析这些空间特异表达基因，揭示出一些潜在的生物学规律，为研究萌发生理学提供了有价值的信息。     

鸽子GR基因cDNA克隆与表达分析

糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor, GR)是保守的核受体超家族中的一员,属于核转录因子,GR对维持机体稳态起着重要作用,同时在动物繁殖代谢过程中扮演着重要的角色.本研究旨在克隆鸽子(Columba livia domestica) GR基因的cDNA全长并分析其组织表达谱.参照鸡(Gallus gallus domesticus)的GR基因序列设计引物,利用RT-PCR和RACE技术,克隆得到了鸽子的GR基因的cDNA序列.测序结果表明,鸽子GR基因包含有2313bp的全长CDS序列,102bp的5'UTR序列,以及18 bp的3'UTR序列,共编码770个氨基酸(GenBank登录号:NM001037826.1).通过序列同源性分析发现,鸽子GR氨基酸序列与鸡的同源性为94％,与短吻鳄(Alligator mississippienses)的同源性为85％,与人(Homo sapiens)的同源性为75％.通过与鸡、鳄鱼和人的氨基酸序列比对分析发现,鸽子的GR氨基酸序列中有一个非常保守的DNA结合区(DNA binding domain,DBD)和一个保守性较高的激素识别区(hormone recognition domain, LBD),此外还包括一个GR特异区域.利用qRT-PCR技术发现在鸽子不同组织中均有表达,表达量由高到低依次为睾丸、胰、肺、卵巢、腹部脂肪、肝、心、骨骼肌、肾、脾、输卵管、胃、下丘脑、大脑、肠和嗉囊.睾丸中表达量显著高于其他组织(P＜0.05),其次为胰腺和肺(P＜0.05),在嗉囊中的表达量显著低于其他各组(P＜0.05).本研究获得鸽子GR基因cDNA全长、组织表达规律,为进一步研究鸽子GR基因的功能提供了基础资料.     

鸡输卵管组织特异性分泌表达载体的构建和表达

摘要：为了实现外源基因在鸡(Gallus gallus )输卵管上皮细胞内的特异性分泌表达，采用RT-PCR的方法扩增了鸡溶菌酶基因的450 bp的cDNA片段，该片段保留了5ˊ端信号肽编码序列。将该片段插入到含有1.2 kb卵清蛋白5ˊ调控序列的特异性表达载体pOVA-GFP中，与绿色荧光蛋白基因形成融合基因，使融合蛋白具有分泌功能。新构建的分泌表达载体pOVALG转染鸡胚成纤维细胞和大鼠乳腺上皮细胞系SHZ-88后，成功地检测到了绿色荧光蛋白的表达。     

利用基因渗入系研究水稻杂种优势与基因差异表达的关系

根据以籼稻（Oryza sativa ssp.indica）品种IR24为遗传背景的粳稻（O.sativa ssp.japonica）品种Asominori基因渗入系与IR24回交F1在多年、多点杂种优势的表现,筛选出1个强优势组合和1个弱优势组合,其杂种优势的差异主要来源于每穗实粒数.利用cDNA-AFLP技术分析了强优势和弱优势组合在幼穗分化至抽穗的叶片基因表达差异,获得了35个差异表达片段.差异带可分为4类,即超亲或减弱表达、杂种特异表达、双亲基因沉默和单亲表达一致型,其中与单亲表达一致型占比例最大（约83%）,杂种超亲或减弱表达占比例最小（约9%）.无论是强优势组合还是弱优势组合,这4种差异表达类型均有,且出现的比例也相近,差异表达片段类型与杂种优势之间没有直接的联系.对8个差异表达片段的克隆、测序、染色体登陆和功能分析,其中2个片段登陆在亲本基因型有差异的区段,且有1个在强优势杂种中特异表达的片段登陆在每穗实粒数杂种优势的位点上.本研究首次将基因的差异表达与亲本基因型、杂种优势位点及杂种优势的表型性状联系起来,为建立表现型-基因型-QTL定位-杂种优势相关基因表达-杂种优势分子生物学机理解释的技术平台奠定了的基础.     

番茄茸毛相关基因ShMYB1的克隆与表达分析

番茄茸毛具有多种生物学功能,为了探究番茄中控制茸毛的基因,本研究采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)从野生种多毛番茄(Solanumhabroc haites)LA1777中,获得了一个与茸毛相关的R2R3 MYB Subgroup 9家族新成员EST241733的全长编码区cDNA序列,命名为ShMYB1。经生物信息学分析,克隆的ShMYB1基因长1350bp,编码338个氨基酸。该基因具有保守的R2R3MYB结构域和Subgroup 9特异motif序列。荧光定量PCR结果表明,ShMYB1基因在番茄叶和花中表达量高,在根、茎、果实中没有表达。在不同发育时期的叶片中表达量差异不大,但是在幼花蕾表达量最高,随花蕾的增大,表达量显著降低。在几个番茄茸毛突变体与对应的野生型中,这个基因表达量存在明显差异。推测该基因与番茄表皮茸毛发生和花发育有关。     

白叶枯病菌诱导水稻特异基因表达的微阵列分析

应用水稻（Oryza sativa)2200条非冗余表达序列标签（EST）所制备的cDNA微阵列及同位素^33P杂交体系，对水稻抗白叶枯菌近等基因系中早14R、中早9S经白叶枯病菌（Xanthomonas oryaepv.oyzae(Xoo)）诱导后特异基因表达模式进行研究。结果表明：四叶期诱导3h后，在1336对有效数据所代表的基因中表达丰度上调有315个，下调有176个，对其中78个受诱导的已知功能基因进一步分析表明：cDNA微阵列上基因表达变化反应了植物防卫反应中基因表达的协同作用以及对病原物的攻击作出防卫反应的基本模式，尽管以往研究中一些基因未明确与植物抗病有直接关系。但在供试材料受白叶枯菌诱导后却发现其表达量发生了明显改变，对此作了初步讨论，另外，实验结果还发现了多个受白叶枯菌强烈诱导但功能未知的相关基因。     

Isolation and Analysis of Genes Induced by Rehydration after SeriousDrought in Broomcorn Millet (Panicum miliaceum) by Using SSH

利用抑制消减杂交(suppression subtraction hybridization，SSH)技术构建了糜子(Panicum miliaceum)干旱后复水条件与正常浇水条件下基因差异表达的SSH-cDNA文库。对其中的60个阳性克隆进行了测序，在去除冗余的cDNA后，利用NCBI的BLAST软件在GenBank 中进行核酸和蛋白质同源性的比较和功能分析。核酸比对结果表明,有32个cDNA片段与已知cDNA片段具有较高的同源性，且多数与植物受到生物或非生物胁迫时的反应机制相关，同时有11条序列与小鼠肝被手术切除后再生时产生的EST有一定同源性。蛋白分析结果显示，有28个序列与已知功能蛋白序列同源性较高，这些功能蛋白涉及植物体内的信号转导、转录调控及蛋白加工等。实验结果表明糜子在干旱复水条件下可诱导一系列特异基因的表达。     

鹅肌球蛋白重链1基因MyHC1全长cDNA克隆、序列及胚胎期表达特征分析

肌球蛋白是组成肌原纤维粗丝的主要成分,在肌肉生长发育和运动收缩过程起重要作用。本研究采用反转录PCR和快速扩增cDNA末端(rapid amplification cDNA ends,RACE)方法,从太湖鹅(Anser anser)肌肉中克隆到肌球蛋白重链1基因(myosin heavy chain 1,MyHC1)的全长cDNA,并运用生物信息学的方法对其进行分析,实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测MyHC1基因在鹅胚胎期的表达情况。研究结果表明,鹅MyHC1基因(Gen Bank登录号:KM675469)cDNA全长6028 bp,包含5 823 bp的开放性阅读框,57 bp的5’端非编码区和148 bp的3’端非编码区,共编码1 940个氨基酸。经预测,鹅MyHC1基因编码的蛋白质由31 478个原子组成,分子式为C9746H15817N2753O3096S66,相对分子质量为223 kD,等电点为5.62,平均亲水性为-0.786,属于不稳定亲水蛋白。在线预测鹅和鸡(Gallus gallus)的MyHC1蛋白质三维结构呈高度相似,由多螺旋和折叠片聚集成球状头部,并带有长纤维状α-螺旋尾部。鹅MyHC1的编码区(coding sequence,CDS)序列与鸡的同源性最高,为92.86%,与哺乳类同源性多数在84%左右,与两栖类同源性相对较低。鹅与鸡氨基酸同源性最高,为96.45%,与哺乳类的同源性多数在90%左右,与非洲爪蛙(Xenopus laevis)同源性较低,为78.13%。系统进化树分析表明,哺乳动物形成一个大分支,两栖类自成一支,鹅和红原鸡聚成一支,分子进化地位的关系最近,验证了鹅和鸡属于近缘物种。qRT-PCR检测到MyHC1基因在胚胎期第7天开始表达,以后表达量逐渐升高,在15d表达量达到高峰后下降,25d之后逐渐趋于平稳,表明,MyHC1基因在鹅胚胎期mRNA水平的表达量呈先上升再下降的趋势。本研究首次获得了鹅MyHC1的全长cDNA序列、分子的结构特点和表达特征,显示该基因在鹅肌肉生长发育过程起重要作用,为该基因的功能及鹅肉质性状研究提供了基础资料。     

小麦种间与品种间杂交种及其亲本之间基因差异表达比较研究

选用小麦种间强优势杂交种3338×Di7(杂种Ⅰ)、品种间强优势杂交种3338×6554(杂种Ⅱ)和无优势杂交种2410TD×6554(杂种Ⅲ)及其亲本斯卑尔脱小麦Di7、普通小麦品种(系)3338、2410TD和6554,采用mRNA差异显示技术分析了杂种和亲本苗期叶片的基因表达差异,以加深对小麦杂种优势形成的分子机理的认识.结果表明小麦杂交种与其亲本之间在基因表达上均存在明显差异,表现为数量水平和质量水平上的差异,且差异表达类型丰富.分析发现,强优势杂种Ⅰ和杂种Ⅱ与其双亲间展示出的差异表达条带数目基本相同,但在差异表达类型上存在明显差异,特别是种间杂种Ⅰ中存在较高比例的单亲表达一致型和偏高亲型基因,说明种间杂交种中亲本基因的表达变化方式与品种间杂交种有所不同.研究还发现,与弱优势杂种Ⅲ相比,在强优势杂种Ⅰ和杂种Ⅱ中,增强型、杂种特异表达型及单亲表达增强型比例较高,与以前的研究结果(Euphytica,1999,117～123)一致,表明杂种特异表达或增强表达基因可能与小麦杂种优势形成有重要关系.     

锰超富集植物及其富集机制的研究进展

超富集植物是植物修复的基础。迄今虽发现超富集植物480种,但绝大多数属于镍超富集植物(329种),而锰超富集植物仅有13种。还从重金属的活化与吸收、运输与转移及其在植物体内的调控三方面综述了超富集植物的生理生化机制。     

Sunflower Seeds and Their Products

ABSTRACT

Academic communication and discourse requires access to scientific journals and documents. This study examines the delivery time, costs, and quality of five commercial suppliers of scientific documents. Fifty-three agricultural article requests were ordered simultaneously from The British Library Document Supply Centre (BLDSC), The Canadian Institute of Scientific and Technical Information (CISTI), Information Express (IE), Infotrieve (INFO), UnCover (UNCOVER). Data were gathered on each supplier's performance in filling the requests, the delivery time, the costs, and the quality of the articles supplied. The results of this study showed comparative strengths and limitations. BLDSC, CISTI, and IE were all similar, consistently delivering high quality documents. INFO alone was able to deliver all 53 requested articles. UNCOVER showed two strengths, delivering the requested documents quickly and replying back if the article order was cancelled.     

植物油燃料及其在发动机上的应用

从分析植物油的主要物性参数出发,探讨了植物油作为代用燃料在压燃式发动机上使用的可行性及发动机对植物油燃料的适应性。对发动机燃用植物油时工作过程的有效组织进行了简要分析。在发动机上使用植物油,是借助于植物间接利用太阳能的重要途径;植物油燃料作为一种生态能源,在缓解能源危机和环境污染方面有着极其重要的作用;大规模生产植物油燃料,是未来农业工程的一项新课题。     

中国农作物秸秆资源及其利用现状

作物秸秆是农作物生产系统中一项重要的生物质资源。中国是世界上秸秆资源最为丰富的国家之一。论文详细论述了中国农作物秸秆的资源量和分布，介绍了其作为工业造纸原料、畜牧饲料、造肥还田以及农村生活能源的利用现状和秸秆综合利用新技术。     

中国现代温室的主要型式及其性能

目前我国正处在温室设施大发展的年代,大型温室年增长量在百公顷以上,温室型式也各种各样,如何根据当地条件和种植内容,选择经济有效的温室型式及其合理配置是每个温室建设者所首要解决的问题。“九五”期间,在大量引进学习国外温室及其种植技术的基础上,我国温室设施也有了前所未有的发展。但由于温室规范措施滞后,各类温室设计制造,尤其是设计、选型和配套技术还很不成熟,给温室建设者合理选择温室带来了一定困难。针对我国大量发展的温室型式,包括玻璃温室、塑料温室和PC板温室,就其结构特点、主要技术性能进行了分析和阐述,以期为温室设计和建造提供必要的技术依据     

深松技术研究现状与展望

深松作为农业土壤加工技术愈来愈受到重视，工作阻力大是深松作业的一大特点。该文阐述了深松技术在生产中的应用现状以及深松部件—土壤接触过程中部件的动力响应、表面处理技术和最终土壤状态等问题的研究进展。认为研究与开发耕作部件计算机辅助设计程序，进一步优化深松部件几何形状，采用合适的表面处理技术，是减小深松阻力、提高深松部件的抗磨损性能以及降低其作业成本的有效途径。     

农田尺度下干旱指标及应用

简要综述了农田尺度下干旱胁迫的指标表达方法,分析了各种方法的优缺点及所需基础资料的获取途径,着重介绍了干旱胁迫综合指标(CWSI)的计算原理及应用。比较结果表明,从农田水分循环系统出发建立起来的CWSI～ETa/ETp、CWSI～Ta/Tp关系,直接考虑了土壤、作物、大气的综合影响,与作物生长过程结合紧密,是考虑因素最全面、综合程度最高的一种方法。该方法不仅具有较严格的理论基础,而且计算时所需基本数据都是气象站常规的观测资料,易于获得,是田间尺度下干旱胁迫对作物产量影响评价的首选方法     

Fluid Catalytic Cracking Unit Emissions and Their Impact

A constructed wetland composed of a pond- and a marsh-type wetland was employed to remove nitrogen (N) and phosphorus (P) from effluent of a secondary wastewater treatment plant in Korea. Nutrient concentrations in inflow water and outflow water were monitored around 50 times over a 1-year period. To simulate N and P dynamics in a pond- and a marsh-type wetland, mesocosm experiments were conducted. In the field monitoring, ammonium (NH ₄ ⁺ ) decreased from 4.6 to 1.7 mg L^?1, nitrate (NO ₃ ^? ) decreased from 6.8 to 5.3 mg L^?1, total N (TN) decreased from 14.6 to 10.1 mg L^?1, and total P (TP) decreased from 1.6 to 1.1 mg L^?1. Average removal efficiencies (loading basis) for NO ₃ ^? , NH ₄ ⁺ , TN, and TP were over 70%. Of the environmental variables we considered, water temperature exhibited significant positive correlations with removal rates for the nutrients except for NH ₄ ⁺ . Results from mesocosm experiments indicated that NH ₄ ⁺ was removed similarly in both pond- and marsh-type mesocosms within 1 day, but that NO ₃ ^? was removed more efficiently in marsh-type mesocosms, which required a longer retention time (2?C4 days). Phosphorus was significantly removed similarly in both pond- and marsh-type mesocosms within 1 day. Based on the results, we infer that wetland system composed of a pond- and a marsh-type wetland consecutively can enhance nutrient removal efficiency compared with mono-type wetland. The reason is that removal of NH ₄ ⁺ and P can be maximized in the pond while NO ₃ ^? requiring longer retention time can be removed through both pond and marsh. Overall results of this study suggest that a constructed wetland composed of a pond- and a marsh-type wetland is highly effective for the removal of N and P from effluents of a secondary wastewater treatment plant.     

Isolation of Cadmium-Resistant Bacteria and Their Resistance Mechanisms

In the first series of studies aimed at addressing the environmental problems of soils and drainage systems, we attempted to isolate cadmium (Cd)-resistant bacteria from soils heavily contaminated with Cd and determine their growth rate in media with cadmium. In soils contaminated with heavy metals, there was on increase in the number of Cd-resistant bacteria. Among 14 Cd-resistant bacteria isolated from soils contaminated with heavy metals, only six strains (Flavobacterium sp., Comamonas testosteronii, Methylobacterium fujisawaense, Alcaligenes piechaudii, Alcaligenes xylosoxidans) were identified as new types of Cd-resistant bacteria. All the isolated resistant bacteria grew fast, and reached the maximum growth rates within 24 to 48 h (Growth conditions were as follows. Culture medium: nutrient broth, pH: 6.0, temperature: 30°C and of concentration of added Cd: 0.1, 1.0, 10.0, and 100.0 mg kg^-1).     

塔里木盆地荒漠类型及其抗风蚀特征初探

塔里木盆地的荒漠面积达到 5 2 .1× 10 6 hm2 ,按物质组成、地表景观和形成 ,荒漠可划分为盐漠、泥漠、砾漠和沙漠 4种类型。从不同荒漠类型剖面结构特点看 ,盐漠表层有盐结皮或盐结壳 ,泥漠则板结而坚硬 ,砾漠在地表有砾幕 ,它们都有一定抗风蚀的能力。沙漠中的沙丘组成物质以细沙为主 ,无特殊抗风蚀层次。尽管塔里木盆地的一些荒漠类型有一定抗风蚀的结构特点 ,加强荒漠区域的生态保护仍是非常重要。