猕猴桃的组织培养和快速繁殖

１ 植物名称 金魁猕猴桃（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｄｅｌｉｃｉｏｓａｖａｒ．Ｊｉｎ Ｋｕｉ）２ 材料类别 嫩茎３ 培养条件 培养基：①ＭＳ＋ＺＴＷ．０ｍｓ／Ｌ；②ＭＳ＋ＺＴ１．０ｍｐ／Ｌ；＠ ＭＳ＋６ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ；④１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５～０．７ｍｇ／Ｌ。 蔗糖（市售白砂糖）浓度①～③培养基为３．０％，④培养基为 ２．０％；琼脂浓度为 ０．６５％～０．７０％，ｐＨ５．８～６．０，培养温度 ２５～２８℃，每天光照 １３ｈ，光照强度 １５００～２０００ １Ｘ。４ 生长与分化情况４．１ 愈伤…     

苹果砧木M26离体叶片愈伤组织发生及分类研究

对苹果砧木Ｍ２６ 离体叶片愈伤组织的发生研究表明,取继代后３０ ～３５ ｄ 的试管苗顶部１～４ 叶位的叶片,沿与主脉垂直方向横切后,以叶背面朝上方式置于愈伤组织诱导培养基上,经观察在叶片近柄端切口处愈伤组织发生较早,产生量较多。最适的愈伤组织诱导培养基为：ＭＳ＋２ ,４ － Ｄ０ ．２ ～２ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ＩＡＡ０ ．２ ～２．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＢＡ０ ．５ ～１．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３ ％ ＋ 琼脂０．６％ 。将诱导产生的愈伤组织按外部形态、细胞特点及生理生化指标等分为三类,其中表面干燥致密、细胞内含物丰富、淀粉、蛋白质及干物质含量均较高的Ⅲ类愈伤组织的芽再生频率最高,可达８３ ．３３ ％ ,是能利用的愈伤组织类型。     

正交试验法在龙眼和荔枝组织培养中的应用

利用正交设计试验法研究了椰乳（ＣＭ）、２，４－Ｄ、赤霉素（ＧＡ３）和蔗糖等四个因素及其组合对石硖龙眼和桂味荔枝的幼胚愈伤组织产生的影响，并讨论了正交设计试验法应用于龙眼和荔枝组织培养培养基筛选的可能性。结果表明：１）对龙眼，诱导愈伤组织的最优组合是 ＣＭ １０％、２，４－Ｄ１．０ｍｇ·１－１、ＧＡ３０ｍｇ·１－１和蔗糖３％；对荔枝，最优组合是ＣＭ０％，２，４－Ｄ１．０ｍｇ·１－１，ＧＡ３０ｍｇ·１－１和蔗糖 ５％。 ２）适当的 ２，４－Ｄ浓度（１．０ ｍｇ·１－１）可提高愈伤组织的产量；３）ＧＡ３抑制了龙眼和荔枝的愈伤组织的产生；４）不同树种的胚需要不同的糖浓度；５）适当ＣＭ浓度（１０％）可提高龙眼愈伤组织的产量，而荔枝愈伤组织的产生并不需要ＣＭ。     

猕猴桃愈伤组织的超低温保存

猕猴桃茎段产生的愈伤组织，经过冷驯化处理后，加入５％ＤＭＳＯ和１０％葡萄糖，以一１℃·ｍｉｎ~(-１)降温速率降至一６０一－７５℃，投入液氮中保存。在液氮中存放时间的长短对愈伤组织存活率没有影响，在３５一４０℃水浴中迅速化冻，将化冻后的材料接种在ＭＳ附加０．０５ｍｇ·１~(-１)２，４一Ｄ及１．０ｍｇ·１~(-１)ＺＴ的培养基上暗培养，待开始恢复生长转在光下培养１５一２０ｄ，再转接在只含有１．０ｍｇ·１~(-１)ＺＴ的ＭＳ分化培养基上，２０一３０ｄ后分化出芽，并形成植株。     

蜂斗叶的组织培养与快速繁殖

通过组织培养，蜂斗叶（ＰｅｔａｓｉｔｅｓｊａｐｏｎｉｃｕｓＭｉｑ．）的叶柄和地下茎切段在ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ的分化培养基上诱导出愈伤组织，并进一步分化出芽丛，切下２～３ｃｍ高的芽，移入１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的生根培养基中，生根率达１００％。以再生苗的叶片或叶柄为外植体，在分化培养基上很快便可再形成愈伤组织并分化出芽。     

酿酒葡萄原生质体再生植株

将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含６ＢＡ２．０ｍｇ·１－１、２,４－Ｄ０．５ｍｇ·１－１的Ｂ５诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物。用Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　　Ｒｓ２％、Ｐｅｃｔｏｌｙａｓｅ　Ｙ２３０．３％,５ｍｍｏｌ·１－１ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ、０．６ｍｏｌ·１－１甘露醇、０．３％葡聚糖硫酸钾、ｐＨ５．６～５．８的酶混合液从胚性细胞团分离得到原生质体。原生质体培养到第５天出现第一次分裂,４０ｄ形成上百个细胞的大细胞团,５０ｄ形成０．５～１．０ｍｍ大小的小愈伤组织。这些小愈伤组织在含６ＢＡ０．５ｍｇ·１－１的Ｂ５分化培养基上分化出胚状体进而形成幼苗,在生根培养基上生根形成再生植株。     

分葱组织培养体细胞胚胎发生的研究

利用分葱茎尖培养成功地诱导了体细胞胚胎发生。具体步骤如下：Ⅰ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上诱导愈伤组织；Ⅱ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行愈伤组织的继代培养，继代培养３次以后，转变为胚性愈伤组织；Ⅲ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行胚状体的诱导；Ⅳ．在无任何激素的ＭＳ培养基上使胚状体再生植株。切片观察表明，胚状体大多数起源于愈伤组织表层及其以下细胞。     

酸枣叶片不定植株的诱导

从酸枣实生苗叶片获得再生不定植株,在 ＷＰＭ附加 ＴＤＺ ２．０ ｍｇ· ｌ~(－１)和 ＩＡＡ０．５ ｍｇ· ｌ~(－１)的培养基上获得了４７.６％的不定梢再生率。不定梢转移到培养基ＭＳ＋ＢＡ ０．５ ｍｇ·１~(－１)上增殖,在１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ·１~(－１)＋蔗糖２％培养基上诱导生根,仅获得１３．１％的生根率。     

利用大葱幼叶进行组织培养微繁的研究

以大葱幼叶为外植体，成功地建立了大葱的无性繁殖系和高效的培养体系。在ＭＳ＋２，４－Ｄｌｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡｌｍｇ／Ｌ的培养基上，愈伤组织的诱导率为８９．９％，在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．８８ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．７３ｍｇ／Ｌ的培养基上达到最大芽诱导率１３．２１％，平均每块愈伤组织生芽５．１４个，在天激素的培养基上最易生根。２５０天内的繁殖系数可达３７８７倍。     

影响苹果试管嫁接苗培育的因素

用苹果试管苗Ｍ２６作砧木，‘Ｇａｌａ’作接穗，成功地获得试管嫁接苗。嫁接苗在ＭＳ液体纸桥培养基上的生长量与嫁接成活率显著高于ＭＳ固体培养基。但是，液体培养基导致砧木基部膨大，形成玻璃苗。随ＢＡＰ浓度升高，嫁接部位愈伤组织形成快、成活率高，接穗生长量明显增加。过高浓度的ＢＡＰ（≥０．８ｍｇ·１~(-１)），诱导砧木侧枝大量形成、砧木基部膨大、产生玻璃苗，并且显著降低砧木的生根力。试管嫁接苗建立阶段最适的ＢＡＰ浓度为０．４ｍｇ·１~(-１)。试管嫁接苗的生根力随ＩＢＡ浓度升高而显著提高，在１．０ｍｇ·１~(-１)浓度时达最适水平。ＩＢＡ浓度对试管嫁接苗接穗生长的影响与生根力是一致的。     

应用CPPU增大辽伏苹果果实的效应研究

在盛花后２周和３周，以不同浓度的ＣＰＰＵ［Ｎ－（２－ｃｈｌｏｒｏ－４－ｐｙｒｉｄｙ）－Ｎ＇－ｐｈｅｎｙｌｕｒｅａ，通用名称Ｆｏｒｃｈｌｏｒｏｆｅｎｕｒｏｎ］对辽伏苹果果实进行表面喷雾处理，结果表明：２０、４０ｍｇ·１￣（－１）ＣＰＰＵ能促进果实纵径和横径增长，并明显提高单果重、果形指数和可食率。对果实可溶性固形物和可滴定酸含量的影响则因处理时期和使用浓度而异。盛花后２周使用降低可溶性固形物含量，４０ｍｇ·１￣（－１）ＣＰＰＵ处理增大果点和提高果实畸形率。而盛花后３周果面喷布２０ｍｇ·１—（－１）ＣＰＰＵ可以增大辽伏苹果果实２０％左右，对果实品质和花芽分化无不良影响。     

CPPU对促进猕猴桃果实增大的研究Ⅰ．CPPU的使用浓度和方法

通过多年、多点试验，研究了ＣＰＰＵ促进猕猴桃果实增大的效果。结果表明：５－４０ｍｇ·１￣（－１）的各种浓度的处理都明显地增大了猕猴桃的果实，效果异常突出，增长幅度在２０％－１９０％之间。１０－３０ｍｇ·１￣（－１）处理效果之间似乎没有显著差异，推荐最适使用浓度为１０－２０ｍｇ·１￣（－１）。浸果和果面喷两种方法都可采用，关键是处理要均匀。ＣＰＰＵ与其它植物生长调节剂混用可以提高促进果实增大的效果，在生产上有更大的潜力。     

龙眼采后生理及贮藏保鲜

在一定范围内，龙眼果肉细胞透性越低，总糖、还原糖与可溶性固形物含量越高，果实品质风味越好。试验采取九成熟福眼果实测定其乙烯释放量只有２．３１－３．９１ｎｌ·ｇ~(-１)·ｈ~(-１)，乙烯作用不明显，不是果实主要衰老激素。果实采后没有明显呼吸高峰，不具跃变型水果典型特征，所以不适于气调贮藏，较适于冷藏。福眼果实采后用绿色Ⅰ和绿色Ⅱ保鲜剂洗果、ＥＶＡ薄膜袋包装，效果最佳；３０±２℃贮藏８ｄ好果率９６．６％，３－４℃贮藏４５ｄ好果率９８．８％；在－１８℃速冻贮藏１８３ｄ和３６６ｄ，好果率分别为９９．５％和９８．０％。     

桃种子的休眠与萌发研究──种皮的调控作用

用桃品种秋香蜜去核壳种子，探索了种皮控制休眠与萌发的效应及作用机制。结果表明：①桃种子剥除种皮，休眠可被解除，出苗率与有皮种子经ＧＡｓ２００ｍｇ·ｌ￣（－１）浸种２４ｈ相近；种皮抑制萌发的效应与ＡＢＡ５ｍｇ·ｌ￣（－１）浸渍去皮种子２４ｈ相当。②桃新鲜种子内ＡＢＡ主要存在于种皮中，ＧＡ３主要存在于胚和子叶中，剥除种皮即人为地改变种子内ＧＡ＿３／ＡＢＡ值，有利于种子由休眠向萌发方向转化。③桃种皮对种子内过氧化物酶活性具强烈抑制作用；去皮种子的酶活性随ＧＡ３处理而增强，随ＡＢＡ处理而被抑制。④桃种皮无透水性障碍，种皮对种子的吸水总量虽有一定限制，但不影响种子萌芽。     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

多效唑在苹果幼树上应用

红星、红富士苹果幼树施用多效唑后，对抑制新梢生长、调节枝条组成、促进花芽形成、提高坐果率、增加幼树产量、控制树冠增长均有明显效果，效果大小与施用方法、时期、药剂浓度和剂量、品种有关，土施比叶喷效果好。土施以３月或９月施入为宜，叶喷的最佳时期为５月上旬。土施的适宜剂量为０．５一１．０ｇ·ｍ~(-２)，叶喷最适浓度为１５００一２０００ｍｇ·１~(-１)。红星比红富士对药剂反应敏感。多效唑施后的持效期土施比叶喷的长，并随着剂量和浓度的增加而延长。土施０．５一１．０ｇ·ｍ~(-２)持效期为２一３年，叶喷１５００一２０００ｍｇ·１~(-１)的持效期仅为１年。     

无核葡萄与中国野生葡萄杂种的胚挽救技术研究

 通过无核葡萄与中国野生葡萄杂交, 获得了4个杂交组合的后代植株, 确定了各杂交组合取胚珠培养的最佳时期。1Flame ×山葡萄; 2红宝石×爱莫无核; 3红宝石×北醇; 4爱莫无核×山葡萄在授粉后45 d取样培养效果较佳; 5长穗无核白×山葡萄授粉后30 d; 6无核白自交在授粉后35 d培养效果较佳。以NitSchs为基本培养基, 附加0.5 mg·L ^{- 1} 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.5 mg·L ^{- 1} IBA + 0.1 mg·L^-1ZT, 适合于1、3、5号杂交组合; 而0.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.1 mg·L^-1ZT适合2、4、6号杂交组合; 胚萌发培养基为2.0 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA +0.2 mg·L^-1 GA₃ , 适合1、2、3、5、6号杂交组合, 而爱莫×山葡萄在1.5 mg·L ^{- 1} IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 GA₃培养基上表现较佳, 生根培养基为1 /2MS基本培养基添加0.15 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA, 它适合1号与5号组合, 0.10 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA适合4号与6号组合。     

桂花离体培养与快速繁殖技术的初步研究

 以桂花(Osmanthus fragrans Lour. ) 胚和新梢茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究,筛选出最适培养基——— (1) 胚萌发: MS +BA 1.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 2) 新梢茎段启动培养: LMc +KT 8.00 mg·L ^{- 1}+NAA 0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 3) 继代增殖培养: LMc + TDZ 0.50 mg·L ^{- 1} +NAA0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; (4) 生根培养: 1/2MS +NAA 2.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%。采用腐殖质土为栽培基质, 移栽成活率可达80%以上。