玉米大斑病拮抗菌发酵培养基优化研究

从主要玉米种植区根际土壤中分离得到对玉米大斑病有较强抑制作用的细菌KJ-2-01,该菌株对玉米大斑病有较好的拮抗作用。通过正交试验设计,测定该细菌的最适培养基及最佳发酵条件。正交试验结果表明,KJ-2-01最佳发酵培养基组分含量为:蛋白胨1.5%,乳糖2.0%,氯化钠1.0%,碳酸钙0.2%,磷酸二氢钾0.02%,硫酸镁0.03%;最佳发酵条件为:温度32℃,pH7.0,转速180r/min,培养时间72h,接种量10%。该研究为拮抗菌KJ-2-01在植物病害生物防治的应用上提供理论依据。     

葡萄炭疽病生防菌株GS8发酵培养基及发酵条件的优化

研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GS8菌株液体发酵条件,为提高其活性及次级代谢产物的产量提供技术支持。通过单因子试验和正交试验,对该菌株的最适发酵培养基成分及发酵条件进行了优化。结果显示:枯草芽孢杆菌GS8菌株培养基组分最佳配比为蔗糖2%、牛肉浸膏0.8%、氯化铵0.2%、硫酸镁0.02%,最佳发酵条件为培养时间4 d、培养温度27℃、初始p H 7.0、摇床转速150 r/min、250 m L装液量100m L、接菌量为装液量的2%。在最佳发酵培养基和培养条件下,GS8菌株发酵滤液对葡萄炭疽病菌的抑制率提高了13.1%。     

解淀粉芽孢杆菌15-1-1的摇瓶发酵条件优化

探讨解淀粉芽孢杆菌15-1-1菌株液体发酵条件,为提高其活性次级代谢产物的产量提供支持。通过单因素试验和正交试验,对该菌株的最适发酵培养基成分及发酵条件进行优化,结果表明:15-1-1菌株培养基各组分的最佳配比为:葡萄糖2.0%、蛋白胨0.5%、酵母浸膏1.0%、氯化钠0.5%。最佳发酵培养条件为:初始p H值7.0,培养温度32℃,培养时间36 h,250 m L三角瓶通气量40 m L,接种量体积分数5%。     

乙草胺降解菌株枯草芽孢杆菌L3产芽孢条件的优化

为了对乙草胺降解菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)L3的产芽孢条件进行优化,以发酵液中芽孢形成率与总生物量为检测指标,首先通过单因素试验考察不同碳源、氮源、无机盐对菌株L3芽孢形成的影响,然后利用2个L16(43)正交试验分别得到菌株L3产芽孢的最佳培养基组合及最优发酵条件。结果表明,菌株L3产芽孢的最优培养基组成为:1%乳糖、3%玉米浆和0.1%Na H2PO4·2H2O;最优发酵条件为:培养基起始p H值7.5、种龄20 h、装液量30 m L(250 m L容器)。优化后,该菌株的芽孢形成率可达97.1%,总生物量达6.5×109cfu/m L。     

淡紫拟青霉PT1菌株液态发酵条件的筛选

从培养温度、培养液初始p H值、供氧量和初始接菌量4个因素对淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)PT1菌株液态发酵条件进行优化,从而获得PT1菌株产孢量及菌丝生物量的最适宜条件。结果表明:在160 r·min-1摇床培养下,最适宜PT1菌株的产孢条件为,培养温度30℃、培养液的初始p H=11;供氧量最佳条件是将100 m L PD培养液加入到500 m L三角瓶中,接菌量为1.0 m L,在以上条件都满足的情况下培养5~7 d产孢量最大;PT1菌株菌丝生产的最适宜条件为,培养温度20℃、培养液的初始p H=9、供氧量最佳条件是将200 m L PD培养液加入到500 m L三角瓶中,接菌量为1.5 m L,在以上条件都满足的情况下培养5~7 d菌丝生产量最大。     

好氧反硝化细菌LKX-1菌株培养基与发酵条件的优化

采用单因素试验法研究了蒙氏假单胞菌LKX-1菌株的发酵培养基组成和发酵条件,并采用正交试验法对发酵条件进行了优化。结果表明:适宜的发酵培养基配方为:麦芽糖2.0%,酵母粉2.0%,KH_2PO_4 0.15%,MgSO_4·7H_2O 0.10%;最适发酵条件为:发酵温度30℃,接种量1.0%,初始pH值7.0,装液量100 m L/瓶(三角瓶容量250 m L),发酵时间24 h;在此条件下,发酵液中活菌数可达4.5×10~(14)CFU/m L。     

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)XZ-1发酵条件的优化

采用单因素试验和正交试验,对解淀粉芽孢杆菌菌株XZ-1的发酵培养基成分和发酵条件进行了优化。结果表明:XZ-1的发酵培养基的最佳碳源、氮源和无机盐分别为糊精、蛋白胨和氯化钾;其培养基最佳组分为糊精10 g/L,蔗糖5 g/L,蛋白胨10 g/L,氯化钠7 g/L;最佳发酵培养条件为培养基初始p H值6,发酵温度27℃,发酵时间36 h,装液量100 m L/250 m L,接种量3%,转速150 r/min。     

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)XZ-1发酵条件的优化

采用单因素试验和正交试验,对解淀粉芽孢杆菌菌株XZ-1的发酵培养基成分和发酵条件进行了优化。结果表明:XZ-1的发酵培养基的最佳碳源、氮源和无机盐分别为糊精、蛋白胨和氯化钾;其培养基最佳组分为糊精10 g/L,蔗糖5 g/L,蛋白胨10 g/L,氯化钠7 g/L;最佳发酵培养条件为培养基初始p H值6,发酵温度27℃,发酵时间36 h,装液量100 m L/250 m L,接种量3%,转速150 r/min。     

一株产油酵母菌摇瓶产油发酵条件的优化

以产油酵母突变菌株Y1m为试验菌株,通过单因素试验对突变菌株Y1m发酵条件进行了优化。结果表明,该突变菌株最适发酵产脂条件为发酵时间5 d,100 mL摇瓶装液量20 mL,发酵液初始pH 6.0,种子液接种量为10%,温度27℃,产脂培养基中硫酸锌含量为0.5 mg/L,氯化钙含量为0.3 g/L,氯化铁含量为0.5 mg/L,硫酸铜含量为0.05 mg/L时,突变菌株Y1m在上述条件下油脂产量最高。     

鲍鱼来源褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化

为筛选得到高效产褐藻胶裂解酶(Alginate lyase)微生物菌株,实现其商业化应用,采用平板透明圈法从皱纹盘鲍Haliotis discus hannai肠道中筛选得到1株高效产胞外褐藻胶裂解酶的菌株SS-1,在扫描电子显微镜下观察菌株形态和平板菌落特征,并根据其16S rRNA基因序列分析结果,鉴定该菌株为弧菌Vibrio sp.SS-1。对SS-1菌株的发酵条件进行优化,结果显示,该菌株最适发酵温度为30℃,初始p H值为7.2,培养28 h后酶活力可达38.6 U/m L;通过响应面法优化最佳发酵培养基配方,结果为麦芽糖11.86g/L、酵母粉16.72 g/L、K2HPO41.36 g/L、Mg SO4·7H2O 1.5 g/L、Fe SO4·7H2O 0.1 g/L、Na Cl 6.75 g/L;在最佳培养条件下,酶活力可达191.8 U/m L,较优化前提高了4.97倍。研究表明:该菌株具有生长快速、酶活较高的特点,可为褐藻寡糖的制备提供技术积累。     

绣球菌突变菌株液体发酵条件的研究

采用摇瓶培养法和正交试验对绣球菌突变菌株P1的液体发酵条件进行研究,实验得出最佳配方为:玉米淀粉 2%、酵母浸膏0.5%、KH2PO4 0.1%、MgSO4·7H2O 0.3%.最适发酵时间是6 d,而优化发酵条件得出最佳的发酵条件为:温度 28 ℃,转速 130 r/min、装液量150 mL/250 mL,在最适条件下绣球菌P1菌丝体生物量(干)及胞外多糖最高产量分别为10.3 g/L 、1 790 mg/L.     

曲酸高产菌株的选育及发酵培养基的优化

以米曲霉为出发菌株,通过物理、化学及复合诱变得到一株曲酸高产菌株ENTG-206,并对该菌株的发酵条件进行了初步研究。结果表明:该菌株的最佳发酵培养基配方为玉米水解糖12%,麦根-豆饼粉0.6%,MgSO4.7H2O 0.05%,KH2PO40.2%,pH值6.0。以优化后的培养基进行30L摇瓶发酵,发酵4d产酸可达49.8mg.mL-1。     

海洋地下芽孢杆菌ZDC-01摇瓶培养基及发酵条件优化

ZDC-01菌株为分离自海洋、对保护地蔬菜土传病害具有较好防治效果的地下芽孢杆菌(Bacillus subterraneus)。为了提高菌株ZDC-01的活菌数,该研究通过单因子水平筛选和正交试验法对活性菌株ZDC-01的发酵培养基配方和摇瓶发酵条件进行了优化。结果表明,菌株ZDC-01的最佳培养基组成为可溶性淀粉2.0%,豆饼粉3.0%,葡萄糖0.5%,鱼粉0.5%,K_2HPO_4 0.03%,CaCO_3 0.5%,MgSO_4·7H_2O 0.03%,(NH_4)_2SO_40.1%,NaCl 0.3%。最适发酵条件为培养温度30℃、摇床转速200 r/min、发酵起始pH 7.0、接菌量3%、装液量50m L/250m L、发酵时间48h。经验证,优化后发酵菌液活菌数为38×10~9cfu/m L,与初始发酵工艺的发酵菌液含菌量(23×10~9cfu/m L)相比,提高了65.22%。     

两株海洋细菌AiL3和CⅢ-1混合发酵条件及对辣椒生长影响研究

通过单因素和正交试验对海洋细菌AiL3和CⅢ-1两菌株混合发酵条件进行了优化,初步测定并比较了混合发酵液与单菌株发酵液对辣椒的促生效果.结果表明,其最佳培养基为:酵母膏10.0 g/L、酵母粉5.0g/L、蔗糖8.0 g/L、木薯淀粉10.0 g/L、CaCl2· 2H2O 0.2 g/L、NaCl 0.2 g/L、FeSO4·7 H2O 0.1 g/L、MnSO4·7 H2O 0.5 g/L;最佳发酵条件为:初始pH值7.0、装液量230 mL/500 mL、接种量4％、发酵温度28℃、转速180 r/min、发酵时间52 h.优化后,两菌株的活菌数和芽孢量显著提高,活菌数达5.0× 1010 CFU/mL,芽孢量达4.5×1010 CFU/mL,芽孢生成率达90％以上,比优化前的活菌数和芽孢量提高了100倍以上.对盆栽辣椒幼苗进行灌根处理,两菌株的混合发酵液相比单菌株发酵液,其株高、茎粗、鲜重等均有显著提高.     

烟草黑胫病生防菌的筛选鉴定及发酵条件优化

从山东烟田土壤中筛选对山东烟草黑胫病(Phytophthora parasitica var.nicotianae)具有较强拮抗作用的生防菌株。通过稀释涂布法初筛后,用平板对峙法复筛到拮抗效果较好的菌株YCG-2,根据菌株形态与培养特征、ITS序列分析进行鉴定,该菌株与哈茨木霉(Trichoderma harzianum)的亲缘关系较近,且形态与培养特征与哈茨木霉基本相符,因此鉴定为哈茨木霉。通过单因素试验和正交试验优化培养基组分及发酵条件,最优发酵条件为每500 m L瓶20 g菇渣,料水比为1 g∶3.0 m L,种子液接种量1×10~7CFU/g,p H值7.0,最适温度28℃,恒温恒湿培养箱中培养6 d。     

抗菌海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1-2菌株摇瓶发酵培养基和发酵条件优化

海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)GM-1-2菌株是在连云港海域海水中分离得到的GM-1菌株的自发突变菌株,对白色念珠菌(Canidia albicans)的生长具有明显的抑制作用。为提高GM-1-2菌株发酵液的抑菌效果,以GM-1-2菌株发酵液的D600 nm及其无菌滤液对白色念珠菌的抑制作用为检测指标,采用单因素试验和正交试验对其发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,GM-1-2菌株生长及产生抑菌物质的适宜培养基配方为200.00 g/L马铃薯、17.50 g/L葡萄糖、12.50 g/L酵母膏、0.12 g/L硫酸亚铁。最佳发酵条件:p H值为7,温度为28℃,摇床转速为180 r/min,培养时间为30 h,装液量为60 m L(250 m L三角瓶),种子液浓度为108CFU/m L时接种量为10%。优化后,菌株GM-1-2的抑菌带宽度和菌体生长量均有明显提高,D600 nm由1.228 0增加至1.672 7,抑菌带宽度由20.00 mm增加至38.67 mm。     

拮抗放线菌6的鉴定及发酵条件优化

为探讨拮抗菌YH6在食品工程中的应用潜力,通过形态观察及16S r DNA序列分析确定了其分类地位,采用牛津杯法测定其发酵液的抑菌活性,并采用单因素试验与正交设计方法筛选出该菌株的优化发酵配方和发酵条件。结果表明,YH6为球孢链霉菌(Streptomyces globisporus);该菌株发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌都有较强的抑制活性。培养基优化组合为:甘薯粉8.0 g/L、硫酸铵10.0 g/L、蛋白胨3.0 g/L、Na Cl 2.0 g/L、Ca CO31.0 g/L,优化发酵条件为:初始p H值8.0、发酵时间5 d、发酵温度28℃、接种量8%、装液量50 m L/250 m L、转速120 r/min。     

毕赤酵母重组菌GS115-Ch-Glu发酵培养基设计及发酵条件优化

以毕赤酵母重组菌(Pichia pastoris)GS115-Ch-Glu为研究对象,进行了亚麻子发酵脱毒工艺的研究,并对重组菌的发酵培养条件进行优化。结果表明,毕赤酵母重组菌GS115-Ch-Glu发酵扩大培养的培养基最佳碳源为2.5%玉米淀粉,最佳氮源为5.0%黄豆粕。优化后的基础发酵培养基发酵条件为温度28℃、转速250 r/min、发酵时间33 h、初始p H 6.5、接菌量1.5%、装液量50 m L/250 m L。在此最佳发酵条件下,菌体产量为9.0×1010个/m L。     

苏云金芽孢杆菌A322菌株发酵培养基和发酵条件的优化

以菌体生长对数末期发酵液OD600值为优化标准,通过单因素和正交试验方法对前期室内实验筛选得到的对棉铃虫(Helicoverpa armigera Hubner)有较高活性的苏云金芽孢杆菌Bt A322菌株进行培养基优化,并进行发酵。结果表明,最佳培养基配方为0.5%黄豆粉+0.5%酵母粉+0.5%葡萄糖+0.5%胰蛋白胨+0.2%碳酸钙+0.1%磷酸二氢钾+0.1%硫酸镁。最佳培养条件为培养时间20 h,初始p H值7.5,发酵温度30℃,摇床转速为200 r·min-1,接种量3%,250 m L三角瓶适宜装35 m L培养基。优化后的菌体生长量OD600值比优化前的提高了44.7%。     

抗植物病原真菌海洋细菌L_1-9菌株的发酵条件优化

[目的]优化海洋细菌L1-9菌株的最佳发酵条件。[方法]采用均匀设计,测定海洋细菌L1-9菌株的最适培养基;通过正交试验设计,确定其发酵的最适温度、pH值、摇床转速,明确其最佳发酵条件。[结果]海洋细菌L1-9菌株的适宜发酵培养基组分为:豆饼粉1.00%,玉米粉1.50%,麦麸1.00%,大米粉0.50%,KH2PO40.05%。正交试验表明,在装液量为50 ml(250 ml三角瓶),接种量5.0%时,最佳发酵条件为:温度23℃,pH值8.0,转速190 r/min。通过平板菌落计数法测得菌体数最多可达1.035×1010个/ml;通过比浊法测得最大OD值量为0.817。在此基础上对接种量和发酵时间的试验结果表明:接种量5.0%,发酵时间84 h时,菌体生长最理想。[结论]该研究为海洋细菌L1-9菌株在植物病害的生物防治上的应用提供理论依据。