禽法氏囊活性肽在畜牧业中的应用

法氏囊(BF)是禽类特有的体液免疫的中枢淋巴器官,位于泄殖腔背侧,其盲端呈囊状,朝向躯体前端,颈部以短柄朝向躯体后下方,开口于泄殖腔。三肽囊素(BS)是存在于禽BF中的一种生物     

禽法氏囊三肽囊素免疫生物学及其同功能单链抗体研究进展

法氏囊（BF）是禽类特有的免疫器官，为B细胞发育、成熟提供微环境，是免疫球蛋白基因转变场所；其免疫活性物质为三肽囊素（Bursin)；它不仅分布于BF，还存在于胸腺Hassall小体、哈德氏腺、脾脏、BF T细胞区及骨髓；它能诱导家禽和哺乳动物B细胞前体分化；其靶器官是BF，能够拮抗IBD疫苗对BF的损伤，提高ND弱毒疫苗及油苗产生抗体水平；人工合成Bursin作用的靶器官也是BF，可促进BF发育、抗体的产生、维持母源抗体作用。     

禽类防御素研究进展

防御素是一类不超过100个氨基酸的阳离子活性肽。因其能有效地杀灭细菌、某些真菌、螺旋体和囊膜病毒等微生物,成为世界范围内的一个研究热点。其中,仅β-防御素存在于禽类。依据禽类β-防御素分子结构、来源与氨基酸组成,可将其分为不同的类别。禽防御素广泛分布于禽的血液和消化道、呼吸道、泌尿生殖道上皮细胞等部位。进化关系分析表明,其他哺乳动物与鸟类抗菌肽来自于共同的β-防御素远古基因。禽类防御素的生物学活性显示其具有潜在的经济意义。为此,就其分类与组织分布、进化、生物学活性、基因工程及应用进行综述。     

囊素对哺乳动物免疫促进作用的研究Ⅰ.囊素对猪瘟疫苗接种猪体液免疫的影响

囊素(bursin)是禽类法氏囊组织产生的一种三肽物质,主要存在于法氏囊组织提取液中[1～2].它在体外能够促进禽类和哺乳动物前体B淋巴细胞的分化和增殖[1～3],在体内能使胚胎期切除法氏囊的小鸡出现法氏囊复生[4],还可显著提高新城疫和法氏囊病疫苗接种鸡的抗体水平[5～6],延长抗体持续时间.这说明囊素对提高鸡的免疫力和疫苗免疫效果具有显著促进作用.但它对哺乳动物是否也具有类似作用,目前尚未见报道,为此,作者进行了本研究,现报告如下.     

囊素对不同日龄哺乳动物免疫促进作用

囊素是禽类法氏囊组织提取液的主要成分，它是一种小分子生物活性物质，由三个氨基酸组成。囊素在体外能促进禽类淋巴细胞前体的分化、增殖，对哺乳动物也有同样作用。已有研究表明：囊素能提高哺乳动物机体免疫机能，增强免疫效果，不失为一种性能优异的免疫增效剂。一定剂量的囊素对不同日龄哺乳动物免疫促进作用效果如何尚无报道。本实验就该问题进行了研究，现报告如下：     

三肽法氏囊素的制备技术研究进展

囊素是存在于禽腔上囊中的小分子肽类物质,其化学组成为三肽Lys-His-G1y-NH2.大量的研究证实囊素对禽类及哺乳动物具有免疫增强作用,并在疫苗佐剂、饲料添加剂、感染性疾病的辅助治疗、免疫缺陷病、抗肿瘤等方面显示了广阔的应用前景.囊素的大量制备已成为目前研究的热点并已取得很大的进展.这些技术有组织提取法、化学合成法、原核表达法、抗独特型抗体法等.本文对这些技术的原理、方法、优缺点、产物的生物活性等方面的研究进展做一综述.     

法氏囊三肽囊素在鸭体中的组织学定位及功能的研究

以抗法氏囊三肽素(Bursin)单抗,采用免疫组化法及个体发生早期以该单抗阻抑Bursin效应,检测Bursin在鸭体定位分布及其受阻抑后所致生物学效应。结果表明,BF髓质内周缘呈现阳性细胞层、髓质中央部分有稀少阳性细胞、FAE及FAESE呈阳性、IFSE中阳性细胞散在性呈团簇状分布;Th中阳性细胞相对集中于髓质中类似Hassall小体的区域或较高密度弥散于髓质中;Sp中阳性细胞弥散于GC中或无特征性散在性分布;HG中阳性细胞呈团块状散在分布于腺泡、腺管基底膜中;LN则阳性细胞特征性存在于淋巴小结中,少数散在淋巴细胞聚集区或淋巴组织索中。不同剂量抗Bursin单抗对鸭体细胞免疫功能有较强阻抑效应,高浓度单抗阻抑作用更显著(P<0 01);对体液免疫功能亦有较强阻抑效应,不同剂量单抗间未见显著差异(P>0 05);对BF指数有较强影响,高剂量组更明显(P<0 05),且高剂量对Sp指数有一定影响;较强地抑制BF滤泡发育,高剂量组BF发育更不良。     

合成三肽囊素阳性噬菌体模拟七肽的免疫活性初步研究

为探讨三肽囊素(Bursin)模拟七肽的免疫活性及其与Brusin的相关性,本研究根据Bursin阳性噬菌体展示七肽库中筛选得到的氨基酸序列(MTTNLQQ)人工合成该七肽.以ELISA和竞争ELISA检验合成七肽与Bursin在体外的免疫学反应的相关性;比较不同剂量的合成七肽(设定Bursin作为对照)对鸡新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗(La sota株)在鸡体诱导的特异性免疫应答的影响.结果显示合成七肽与抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)能够特异性结合并且该结合作用可被Bursin阻断;动物试验的结果表明,低剂量(0.09 mg)的合成七肽对疫苗诱导的体液免疫应答的增强作用与Bursin相当,而且高剂量(0.3 mg)的合成七肽对细胞免疫应答具有一定的增强作用.因此,认为七肽序列MTTNLQQ具有与Bursin类似的免疫活性.     

三肽囊素分子生物学研究进展

综述了三肽囊素分子生物学方面研究近况。三肽囊素作为一种重要的活性物质，其生物学活性和作用机理得到广泛研究，但有关分子生物学方面研究近几年才开始。     

重组囊素肽的构建表达及其对禽流感灭活苗免疫效果的影响

为重组表达不同拷贝串联囊素(BS)活性肽及评价其对禽流感灭活苗的免疫效果,本研究以囊素五肽和三肽的氨基酸序列为基本单元,设计了3种不同串联方式的囊素肽,按照大肠杆菌偏爱密码子设计其引物,利用SOE-PCR技术扩增了3种囊素肽编码基因,分别克隆至p ET-32a中,构建重组质粒p ET-BS1、p ET-BS2和p ET-BS3,并转化于大肠杆菌Origami TM B中诱导表达。SDS-PAGE和western blot结果表明,3种重组囊素肽BS1、BS2和BS3均以可溶形式表达,与天然囊素肽具有相似的免疫原性。将3种重组囊素肽分别与禽流感灭活病毒联合免疫雏鸡,免疫效果检测表明,与单独免疫灭活病毒组相比,3种重组囊素肽均能够明显促进鸡血清中抗体产生,提高外周血淋巴细胞增殖能力;但仅BS1能够同时提高血清中IL-4和IFN-γ的含量。本研究通过原核表达制备了3种具有良好免疫活性的重组囊素肽,为其作为免疫增强剂提供了实验依据。     

家禽免疫学基础(二)

二、家禽的免疫反应我们已经知道禽类的免疫系统在某些方面与哺乳动物不同,其中最值得注意的是禽类有法氏囊而缺乏(或无)器官化的淋巴结。但是,我们没有理由认为禽类在包括免疫应答(反应)在内的基本免疫机理方面与哺乳动物有显著的差异。禽类和哺乳动物的免疫应答至少都包括如下几个方面:(1)抗原进入机体,并由机体对之进行适当的加工处理(这种加工处理过程一般在单核细胞内进     

生长激素抑制素输注后鸭生长激素分泌和胰脏功能的测定

已证实哺乳动物和禽类生长激素(GH)的分泌受下丘脑抑制因子(生长激素抑制素)的抑制(Martin 1976;Vale等1983;Scanes等1984),禽类生长激素抑制素的细胞体及神经原位于下丘脑中(Blahser等1978;Blahser等1982)。由于禽类基础血浆GH水平随年龄而降低(Harvey等1980),生长激素抑制素对GH分泌的抑制效力可能是后天性的。据此,本试验研究了未成年和成年鸭的生长激素     

血管紧张肽Ⅱ在哺乳动物卵巢中的作用

肾素-血管紧张肽系统(renin-angiotensin system,RAS)是哺乳动物体内重要的生理功能调节系统,血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)是RAS发挥功能的主要活性物质。AngⅡ通过与其受体(AT1R和AT2R)的特异性结合,激活细胞内多种信号转导通路,在动物卵巢功能调节过程中起着重要的作用。本文就AngⅡ及其受体在哺乳动物卵巢的分布、作用和发挥作用的信号通路等进行综述。     

禽类免疫系统

当人们谈到家禽免疫学,都不自觉地将之与哺乳动物,尤其是人类和小鼠等脊椎动物进行分析、比较和推导。确实,哺乳动物和禽类在应答各种病原(如病毒、细菌、寄生虫和其他微生物)时有很大的相似性,比如主要表现为两者均有先天性免疫和获得性免疫,其中获得性免疫又包括细胞介导免疫和体液免疫;两者均有免疫学记忆等。但是应该看到不仅仅是哺乳动物的基因组特点和免疫学结构要远比禽类复杂和完善,而且哺乳动物免疫学发展的广度和深度要远超家禽免疫学。     

Ghrelin在哺乳动物免疫系统中的作用研究进展

Ghrelin是一种具有多种生物学功能的生长激素释放肽,近年来其在哺乳动物免疫系统中的作用研究日益丰富,而在禽类免疫系统中的研究相对较少。论文就Ghrelin在调节哺乳动物淋巴细胞增殖、细胞因子分泌、炎症及组织损伤等方面的研究进展进行了综述,同时将禽类Ghrelin在免疫系统中的研究与之进行比较,为深入探索禽类Ghrelin在免疫系统中的功能及机制提供参考。     

法氏囊提取物和囊素对抗体生成的影响及其机制

抗体的生成与机体的免疫功能或抗病力密切相关。因此 ,研究和探讨抗体生成的机制具有重要的理论和实际意义。本文主要就法氏囊提取物和囊素对抗体生成的影响及机制进行了综述 ,希望对有关的研究提供有益的启示。1　法氏囊与免疫球蛋白的形成法氏囊 (ＢｕｒｓａｏｆＦａｂｒｃｉｃｕｓ,ＢＦ)是禽类特有的中枢免疫器官 ,是Ｂ淋巴细胞发育分化和成熟的场所。分化完全的Ｂ淋巴细胞由ＢＦ迁移到外周淋巴器官中定居、繁衍 ,并执行重要的免疫功能。现代免疫学认为 ,法氏囊对禽类体液免疫的形成起中心作用。Ｂ细胞系胚胎发育过程早期 ,免疫球蛋白基…     

三肽囊素对环磷酰胺诱导的鸡红细胞免疫功能低下的阻断作用

本文研究了三肽囊素对环磷酰胺诱导的墟岗黄鸡红细胞免疫功能的抑制模型的影响。180只一日龄墟岗黄母鸡随机分成对照组,三肽囊素组,三肽囊素 环磷酰胺组,环磷酰胺组四个组,三肽囊素组和环磷酰胺 三肽囊素组每只鸡肌注0.01mg/kg剂量的三肽囊素;环磷酰胺组和环磷酰胺 三肽囊素组每只鸡肌注40mg/kg剂量的环磷酰胺,对照组鸡注射等量的生理盐水。结果表明,14日龄和35日龄时各试验组鸡的红细胞总数没有显著差异,而在56日龄时,环磷酰胺组显著低于其它三组(P<0.05);从14日龄开始,环磷酰胺纽的RBC-C3bR花环率显著低于其它三组,而环磷酰胺组的RBC-IC花环率显著高于其它三组,并持续到实验结束。结果提示,三肽囊素可阻断由环磷酰胺诱导的鸡红细胞免疫功能低下。     

抗三肽囊素单克隆抗体的制备

为研制抗三肽囊素(bursin,KHG-NH₂)的单克隆抗体,本试验采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA或OVA)定向偶联,分别制备三肽囊素免疫抗原(BSA-KHG-NH₂)和检测抗原(OVA-KHG-NH₂)。以BSA-KHG-NH₂免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术,筛选到18株能稳定分泌抗三肽囊素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这18株单克隆抗体与三肽囊素人工抗原的结合均能被三肽囊素、GKHG-NH₂四肽阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明18株单抗与三肽囊素分子的结合具有高度特异性。以本研究制备的单抗2D2建立间接竞争ELISA方法,检测三肽囊素含量,检测下限为4 ng/mL,线性范围为4~500 ng/mL,加标检测回收率为85.0%~92.4%。     

三肽囊素研究进展及应用前景

三肽囊素是从法氏囊中提取的一种活性因子,其化学成分已被确定．为更好地研究和利用囊素的免疫活性，主要对三肽囊素的化学本质、生物活性、作用机理、分子生物学研究及应用前景进行了的阐述。     

三肽囊素对环磷酰胺诱导的免疫器官细胞凋亡的影响

研究了三肽囊素对环磷酰胺诱导的鸡免疫抑制模型中免疫器官细胞凋亡的影响。将180只1日龄粤黄鸡随机分成环磷酰胺组、正常对照组、三肽囊素组以及三肽囊素 环磷酰胺组。利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dTUP缺口末端标记法(TUNEL)，对不同组鸡的免疫器官细胞凋亡进行计数。结果发现，环磷酰胺组细胞凋亡数比对照组明显增多(P＜0．05)，而三肽囊素 环磷酰胺组细胞凋亡数显著少于环磷酰胺组(P＜O．05)；三肽囊素组的细胞凋亡数比环磷酰胺组少，且差异显著(P＜0．05)。由此可知，三肽囊素对环磷酰胺所诱导的细胞凋亡具有抑制作用。