2株H7N9亚型重组禽流感病毒的生物学特性和免疫原性研究

为评估经反向遗传构建的H7N9亚型重组禽流感病毒(AIV)H7-Re1株和H7-Re2株的生物学特性及免疫原性,本研究将这2株病毒分别以104倍稀释接种10日龄SPF鸡胚后,36℃培养,观察鸡胚存活情况并检测病毒HA效价,结果显示96 h时,2株病毒接种的鸡胚全部存活,培养至72 h时其HA效价均为9 log2,均显著高于亲本分离株。测定2株病毒的静脉内接种致病指数(IVPI),结果显示均为0。将2株病毒分别以10~6EID_(50)剂量鼻腔内接种5周龄SPF鸡,进行致病性试验,结果显示,接种后14 d内,2株病毒接种鸡均无临床症状,也不排毒。以2株病毒为种毒分别制备油乳剂灭活疫苗,以0.3 mL/只接种3周龄SPF鸡后3周时检测免疫鸡血清中HI抗体,结果显示,两种疫苗免疫鸡平均HI效价均可达到8.0 log2。于免疫后21 d,H7-Re1株免疫组鸡分别攻击10~6EID_(50)的H7N9亚型低致病力AIV(PG/SHH/S1069/13株)和10~5EID_(50)的高致病力AIV(CK/GX/SD098/17株),进行攻毒试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均全部存活,且无发病和排毒出现。H7-Re2株免疫组鸡于免疫后21 d分别以10~5EID_(50)的剂量进行高致病力H7N9亚型AIV(CK/GX/SD098/17株)和H7N2亚型AIV(DK/FJ/SE0195/18株)的攻毒保护试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均不发病、不死亡、不排毒。以上结果表明,以H1N1亚型A/Puerto Rico/8/34株病毒为内部基因供体、经反向遗传学方法构建的H7-Re1株和H7-Re2株均具有生长滴度高、生物安全性高和免疫原性好的特点。本研究为H7N9亚型禽流感疫苗的研制和应用奠定了基础。     

关注H7N9流感病毒

当前,全球对发生在我国的人感染H7N9流感病毒事件保持密切关注。这是一种在人类中从未被发现过的新型病毒,病毒基因组初步分析表明,该病原体可能在家禽中传播,但并不会引起严重症状,这使得病毒难以监测,截至目前,该病毒的动物宿主仍未发现。本期聚焦了《Nature》等对该病毒研究的相关报道。     

H7N9流感病毒的防控

H7N9病毒是甲型流感中的一种,给家禽养殖业和消费者健康构成了重大威胁,为积极有效应对,本文将甘肃省酒泉市肃州区预防和控制H7N9病毒中的一些实际做法进行了总结分析,以供参考。     

H7N9流感病毒的动态

1采取生物安全措施应对H7N9流感病毒联合国粮农组织表示,中国政府需要采取强有力的生物安全措施应对出现的H7N9禽流感病毒。与其它流感病毒如H5N1高致病性禽流感病毒相比,这种新病毒在家禽中很难被发现,因为感染动物并没有患病的迹象。     

1株H9N2亚型重组禽流感病毒的生物学特性

为研制高效特异的H9N2亚型AI疫苗,试验对利用反向基因操作技术构建的1株表面基因由A/chicken/Shanghai/10/01(H9N2)(简称SH10)提供、内部基因由12质粒系统提供的重组病毒SH/PR8的生物学特性进行了研究.结果表明,与亲本毒相比重组病毒的毒力有所下降,重组病毒在鸡胚上生长的适应性能更好,更适于作为新型疫苗株使用.     

H7N9亚型流感病毒感染与传播研究概况

鉴于H7N9亚型流感病毒易变异的特点以及人感染后的高死亡率,该病毒是否具备人际间传播的能力成为研究的热点。研究显示,H7N9亚型流感病毒的氨基酸突变不仅会影响病毒的毒力、耐药性,而且对病毒的跨种传播至关重要。为此,本文在参考国内外相关文献的基础上,从H7N9亚型流感病毒的溯源、感染宿主与传播媒介、传播与复制3个方面对病毒的最新研究进展进行整理,为更加全面了解该病毒的来源、传播与复制,科学理解该病毒对不同宿主的感染及防控提供参考。     

H7N9流感病毒的动态重配与遗传多态性

自2013年2月以来,我国部分地区发生的人感染H7N9亚型流感病毒案例引发人们对其出现潜在大流行的担忧。而在最近的数周,我国东南部地区再次出现了新的发病高峰。因此,开展病毒的演化和疾病流行模式的研究,对于H7N9流感的防控至关重要。2014年1月出版的《NatureCommunications》刊发了中国科学院微生物研究所、中国疾病预防控制中心等单位科研人员的相关研究论文,深度解析了H7N9亚型流感病毒的动态重配模式和传播路径。     

不同致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白的比较分析

为明确高致病性和低致病性H7N9亚型流感病毒血凝素(HA)蛋白的血清学特性是否有差异,通过体外表达两种H7N9亚型流感病毒HA蛋白并进行分析。利用RT-PCR方法扩增出高、低致病性H7N9亚型流感病毒HA基因,测序,并克隆于真核表达载体pCAGGS-Flag中,构建两个重组表达质粒,命名为pCAF-H7HPHA和pCAF-H7LPHA,分别转染293T细胞,用间接免疫荧光试验和Western blot试验观察HA蛋白的表达情况。结果显示:与低致病H7N9亚型流感病毒比较,高致病性H7N9亚型流感病毒HA基因裂解位点有连续的碱性氨基酸插入,糖基化位点和受体结合位点没有差异。不同致病性毒株的HA蛋白均能表达良好,表达蛋白分子量约为70 ku;高致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白(或血清)可以与低致病H7N9流感血清(或蛋白)发生反应。结果表明:不同致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白在血清学上没有差异性,为H7N9亚型流感病毒HA蛋白的研究奠定基础。     

新型重组H7N9禽流感研究进展

H7N9禽流感病毒是威胁人类健康的主要病原之一,自2013年3月爆发至2018年3月,已造成1438人感染,病死率高达39.63%。从H7N9病毒的生物学特性和遗传演化分析、H7N9病毒流行病学调查数据、病毒致病机制方面综合系统地对H7N9禽流感的综合防控措施进行综述,预测H7N9存在人际传播的可能性,以期为新型H7N9流感病毒的监测和预防提供参考。     

蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较研究

为比较新发蝙蝠流感病毒H17N10亚型与禽流感病毒H9N2亚型的M蛋白(包括M1和M2蛋白)的免疫原性,分别构建两种亚型流感病毒M1、M2的原核表达载体和真核表达载体,利用前期反向遗传学技术拯救获得两种重组病毒感染MDCK细胞,并分别与相应的单抗或多抗进行免疫印迹和免疫荧光鉴定。结果显示,两种亚型病毒的M1蛋白的原核表达产物均与M1多抗反应,均不与2株M1单抗反应;拯救的两种重组病毒感染细胞后及其M1蛋白的真核表达产物均与M1的单抗5F2反应,不与单抗3G8及M1的多抗反应,两种亚型的结果一致;而两种亚型的M2蛋白通过与单抗和多抗反应,出现了不一致的结果,M2的单抗仅与蝙蝠流感病毒M2的原核表达产物反应,不与H9N2禽流感病毒M2的原核表达产物反应,M2的多抗则反之;且M2的多抗仅与H9N2禽流感M2的真核表达产物以及拯救病毒反应,均不与蝙蝠流感病毒M2的真核表达产物及拯救病毒反应。本研究证实这两种亚型流感病毒的M2蛋白之间确实存在免疫原性的差异,并且筛选到了可以区分蝙蝠流感病毒和禽流感病毒的M2抗体,为进一步研究流感病毒M蛋白相关的生物学机制提供了基础。     

H9N2禽流感病毒与H1N1流感病毒易发生重排

猪源H1N1/2009流感病毒自2009年暴发以来,在世界范围迅速传播。重排是流感病毒进化的主要方式之一,历史上多次流感的流行都是病毒重排的结果。中国农业大学动物医学院刘金华教授课题组研究表明:H9N2禽流感病毒与H1N1流感病毒很容易发生重排,     

H7N9亚型禽流感病毒研究进展

H7N9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)是一种新重组A型流感病毒。2013年首次发现可以感染人类,引起呼吸道综合征,致死率极高,给全球公共卫生安全带来严重威胁。截止目前,中国已经暴发5次H7N9亚型禽流感疫情,2016年10月的第5次流行人感染病例数急剧增加,且向西部省份蔓延,引起了国内外的广泛关注。本研究总结H7N9亚型AIV的流行情况、病毒起源与进化、病毒受体结合特性和预防控制等方面的研究进展,以期为H7N9亚型AIV的防控提供理论参考。     

H7N9病毒尚未变异耐药

西省卫生厅18日证实，近日，江西省南昌市一名73岁女子罹患H10N8甲型禽流感，12月6日因呼吸衰竭、休克死亡，系全球首例因H10N8致死者。据江西省卫生厅应急办通报，南昌市通过监测在这例病例标本中检测出甲型流感病毒，经中国疾病预防控制中心进一步检测确定为H10N8禽流感病毒。     

H7N9亚型禽流感病毒研究进展

禽流感病毒（AIV）属于 A 型流感病毒,它不仅可感染其天然宿主野鸟,而且还可以感染家禽或某些哺乳动物,也会感染人。近年来 AIV 感染人的病例呈上升趋势,我国于2013年首次发现 H7N9亚型 AIV 感染人并致死的病例。H7N9 AIV 感染人的病例至今仅限于中国大陆、香港和台湾,目前尚未在其他国家和地区被发现。H7N9亚型 AIV 虽然对家禽致病性低,但感染人后可以引起严重的呼吸系统症状及多个器官衰竭,甚至死亡。H7N9亚型 AIV 的感染不仅会影响人们的日常生活,而且对人的身体健康危害很大,同时还可能有引发流感大流行的潜在危险。目前仍缺乏用于预防和治疗 H7N9亚型 AIV 感染的有效疫苗及药物。论文简要介绍 H7N9亚型 AIV 的流行现状、病毒基因的来源及毒力等特点,并比较 H7N9与 H5N1亚型 AIV 之间的差异。     

新型H7N9流感病毒产生深层原因阐明

<正>在国家自然科学基金等的资助下,中国农业大学刘金华课题组和国外学者合作发现,单一基因型H9N2流感病毒在我国鸡群中的优势流行为H7N9流感病毒的重排提供了充分条件,从而阐明了新型H7N9流感病毒产生的深层原因。相关成果日前发表于美国《国家科学院院刊》。据了解,H7N9禽流感病毒是一种新型重排病毒,其6个内部基因全部来自鸡源H9N2病毒。     

H7N9亚型流感病毒病原学及流行病学分析

2013年2月以来,我国华东地区出现了H7N9亚型流感病毒感染人的事件,引起了国内外的广泛关注。我国政府采取了迅速而有效的防控措施,在短时间内控制了H7N9病毒的扩散和传播,但是目前此病仍处于散发状态,并且可能在禽类中长期存在,因此会在一段时间内对公共卫生安全造成威胁。该病的病原学研究发现,病毒的8个基因片段全部为禽源,为三源重排的病毒。病毒的HA和PB2蛋白已出现哺乳动物适应性突变,NA和M蛋白出现了金刚烷胺和奥司他韦的抗药性突变。带毒禽类及其污染物是本病的主要传染源,病毒可以通过直接接触和气溶胶在雪貂模型间传播,老年人对此病更加易感。对活禽市场的严格管理,对病毒流行和变异的严密监测,以及对疾病预防意识的增强,是对H7N9有效防控的保证。     

一株禽源高致病性H7N9亚型流感病毒分子特性研究

为了研究一株禽源高致病性H7N9亚型流感病毒,分析其变异进化及部分生物学特性,试验以从H7N9亚型流感病毒阳性病死鸡的肺脏组织中提取的总RNA为模板,利用特异性引物扩增出全基因序列,分析其核苷酸和氨基酸序列,利用同源建模在线服务软件SWISS-MODEL对突变位点附近的氨基酸序列空间结构进行研究。结果表明:PCR扩增出H7N9亚型流感病毒8个基因片段,即HA、NA、PA、PB1、PB2、NP、NS、M,这8个基因片段均与A/Chicken/Heinan/ZZ01/2017(H7N9)的相应片段具有较高的同源性; HA的第135,226位和NA第401,429位氨基酸存在突变;除A135V突变外,L226Q、A401T、K429R突变均能导致受体结合位点或唾液酸结合位点体积的改变。说明根据基因同源性分析结果,黑龙江省的H7N9流感疫情可能是从中国中部地区传播而来;根据受体结合位点的分析结果,L226Q、A401T和K429R突变可能影响病毒与宿主细胞间的相互作用。     

HA蛋白位点变异影响H7N9亚型流感病毒特性的研究进展

2013年春,我国首次出现人感染H7N9亚型禽流感疫情,对家禽养殖和公众健康均产生了严重危害,并且在第5波流行期又演变出血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白裂解位点处存在插入突变的高致病性禽流感病毒株.HA作为A型流感病毒表面表达丰度最高的糖蛋白,在介导病毒与宿主细胞表面受体的结合、促进病毒囊膜与细胞膜的融合...     

重组高繁殖力疫苗株H5N2(H5/PR8)病毒的制备和鉴定

作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现用的A/Turkey/England/N28/73(H5N2)疫苗株,血凝价28,生长滴度较差.本研究利用自然重组法,预制备一株高繁殖力的预备疫苗株,使它的表面基因血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)来源于A/Turkey/England/N28/73(H5N2)毒株,并使其保持原有的良好的免疫原性,内部基因来源于流感病毒PR8,A/Puerto Rico/8/34(H1N1)毒株,并使其重组病毒赋有了流感病毒PR8高繁殖力的特性.实验结果表明,已获得一株高繁殖力的重组流感病毒H5/PR8,血凝价达到211,生长繁殖特性明显增强.抗原性分析显示,H5/PR8重组病毒与亲本毒株H5N2抗原性无明显差异;致病性分析发现,H5/PR8重组病毒的致病能力较亲本毒株H5N2有明显下降.这为疫苗株的改良奠定了坚实的基础,对禽流感灭活疫苗的生产具有重大意义.     

研究称H7N9流感病毒人传人趋势需警惕

<正>英国帝国理工学院研究人员在新发表的一份研究报告中说,最近几次出现的H7N9流感疫情显示,这种病毒在人与人之间传播的概率有上升趋势,有必要加强相关预防措施。报告称,在2013年和2014年间,约有400例人感染H7N9流感病例,其中177人死亡,多数是因为与禽鸟接触后被感染。研究人员对这些数据进行