柱前衍生RP-HPLC法测定桑叶中氨基酸含量

以邻苯二甲醛(OPA)与9-芴基羰酰氯(FMOC-Cl)作衍生剂,正缬氨酸为内标利用二极管阵列(DAD)可变波长检测程序,采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定5个桑叶品种的氨基酸含量。结果表明,各种氨基酸的保留时间(Rt)、相对峰面积(Ax/AI)的RSD均较满意,回收率为93.21%～114.24%;5种桑叶品种中含有大量的氨基酸,含量较高的是异亮氨酸(Ile)、谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、亮氨酸(Leu)和丙氨酸(Ala),占总含量的60%以上。5种桑叶品种的氨基酸含量从大到小为:南2、粤诱36、粤诱18、粤诱32、粤诱87。该方法适合桑叶种氨基酸含量的测定。     

高效液相色谱法快速测定黄粉虫氨基酸含量

建立了反相高效液相色谱测定黄粉虫中氨基酸含量的方法.采用柱前自动衍生,反相C18短柱梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,内标法定量的色谱分析条件.方法的线性范围为4.5～900μmol/L,相关系数0.9976～0.9998,最低检出限为2.93～9.45μmol/L.除蛋氨酸(87.99%)外,其他氨基酸的加标回收率为94.17%～103.96%,相对标准偏差为2.02%～5.36%.对氨基酸含量的测定结果表明黄粉虫氨基酸总量为51.64%(干基重),必需氨基酸占氨基酸总量的比例为42.53%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为0.74,是优质的蛋白质资源.     

三种不同方法测定鱼粉中氨基酸含量的比较

为进行不同方法测定鱼粉中16种氨基酸含量的比较研究,采用日立L-8900氨基酸分析仪(amino acid analyzer,AAA)、Agilent高效液相系统和岛津高效液相系统测定鱼粉中16种氨基酸含量。AAA法采用茚三酮柱后衍生紫外分析,OPA法(Agilent HPLC)采用邻苯二甲醛柱前衍生紫外分析,PITC法(岛津HPLC)采用异硫氰酸苯酯柱前衍生紫外分析。三种方法的曲线范围为5μmol/l(10μmol/l)~500μmol/l,相关系数都大于0.999。三种方法测定值具有相关性,不具有显著性差异,测定结果的平均相对标准偏差为3.10%(0.91%~6.61%)。     

高效液相色谱法测定饲料中氨基酸含量的改进

对高效液相色谱(HPLC)测定饲料中氨基酸含量的方法进行了改进。简化了样品的水解液制备过程,采用内标法定量,色谱分析采用邻苯二甲醛和氯甲酸芴甲酯联合柱前在线衍生,用反相C18短柱梯度洗脱,二极管阵列检测器检测。此方法线性关系好(相关系数为0.9876～0.9996),线性范围为20～1000μmol/L。大部分氨基酸的加标回收率94.55%～103.35%,相对标准偏差为2.36%～4.87%,在不需预先除去干扰物质的情况下,提高了氨基酸测定的准确度。     

柱前衍生高效液相色谱法检测血浆粉中氨基酸含量

文章采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化高效液相色谱法检测血浆粉中氨基酸的含量。使用Venusil-AA氨基酸分析专用柱,紫外检测器,35min内17种氨基酸得到较好的分离,各氨基酸浓度150~2,500nmol/mL,线性相关系数均大于0.9976,加标回收率88.69%~101.3%范围内。试验结果表明,本方法操作简单、灵敏度高,可用于血浆粉氨基酸含量的检测。     

牦牛肉中游离氨基酸含量的分析

采用反相高效液相色谱法测定了7头麦洼牦牛后腿肌肉中游离氨基酸的含量。在牦牛肉中检测到16种游离的标准氨基酸,总含量为532.34±86.74 mg/100 g,其中含量最高的游离氨基酸为精氨酸,其次为组氨酸,这两种氨基酸约占游离氨基酸总量的75%。     

柱前在线衍生-反相高效液相色谱法测定鱼粉中的肌胃糜烂素

试验建立反相高效液相色谱法测定鱼粉中肌胃糜烂素。采用邻苯二甲醛(OPA)为衍生试剂,应用ZORBAX XDB-C_(18)色谱柱,以磷酸盐缓冲溶液(10 mmol/L的磷酸二氢钠和10 mmol/L的磷酸氢二钠,pH7.2)-乙腈(92∶8,体积∶体积)为流动相进行等度洗脱,用DAD检测器在338 nm处进行检测,外标法定量。结果表明,肌胃糜烂素线性关系良好,相关系数为0.999 9,回收率为91.20%~94.10%,相对标准偏差0.77%~3.36%,检出限为1 mg/kg。反相高效液相色谱法测定鱼粉中肌胃糜烂素操作简便、灵敏度高和重现性好,适用鱼粉中肌胃糜烂素含量的测定。     

柱前衍生高效液相色谱法测定乳与乳制品中羟脯氨酸的含量

本实验建立了羟脯氨酸含量的柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)测定乳与乳制品中皮革水解蛋白特征性成分。样品经酸水解后采用异硫氰酸苯酯(PITC)衍生后采用高效液相色谱-紫外可见检测器进行测定。采用AgelaVenusil-AA氨基酸分析专用色谱柱(4.6 mm×150 mm,i.d.5μm),柱温40℃,检测波长254 nm,梯度洗脱,流速1.0mL/min,进样量50μL。方法定量限为0.046μg/mL(S/N=10),高中低不同浓度加标回收率为98.2%～99.0%。该法具有样品处理简单,灵敏度高,回收率高,分析时间短等优点,适用于乳及乳制品中羟脯氨酸含量测定。     

不同生长时期桑叶游离氨基酸含量变化

以坎下白桑、辽桑和慈山3个桑树品种为供试材料,6-9月间4次采样,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用反相高效液相色谱法测定桑叶游离氨基酸种类和含量。结果表明,桑叶中游离氨基酸总量和人体必需氨基酸总量,6月时分坎下白桑明显高于另外2个桑品种,7月分3个桑品种接近,8月分均降到较低水平,9月分均又回升并接近7月的水平。春季含量较高的丝氨酸到初霜时降低,春季含量较低的苏氨酸到初霜时升高。不同生长时期不同品种桑叶游离氨基酸种类和含量均有一定差别。     

西藏地区两种传统发酵乳的氨基酸含量分析

本试验应用柱前衍生-反相高效液相色谱法,对西藏地区传统发酵的29份酸牦牛乳样品和15份酸黄牛乳样品的氨基酸含量进行了检测分析。共检测出15种氨基酸,酸牦牛乳的氨基酸总量(856.60±321.77mmol/L)高于酸黄牛乳(223.40±61.58mmol/L)。两种传统发酵乳中酸牦牛乳的Phe、Tyr、Val、Ile、Lys、His、Asp、Ser、Gly、Arg、Ala、Cys含量显著高于酸黄牛乳。结果表明,酸牦牛乳中的氨基酸营养优于酸黄牛乳,是西藏高原牧民的主要氨基酸摄取来源。