不同激素对“五彩珍珠”番茄再生体系的影响

以"五彩珍珠"番茄为试材,选取6d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同激素浓度及配比对番茄愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响,以建立番茄再生体系。结果表明:诱导"五彩珍珠"番茄愈伤组织的最佳培养基为MS+0.4mg·L~(-1)IAA+2.0mg·L~(-1)6-BA,其子叶的诱导率为100%,下胚轴的诱导率为95%;不定芽分化的最佳培养基为MS+0.2mg·L~(-1) IAA+(1.0~3.0)mg·L~(-1) 6-BA;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.10mg·L~(-1)NAA。子叶为最佳外植体,其不定芽的分化率及生长情况均优于下胚轴。     

南瓜子叶节再生体系的建立

为建立南瓜子叶节再生体系,试验以‘上桔’‘金栗’‘银栗’‘贝栗灰’‘永安2号’和‘永安5号’共6个南瓜品种的子叶节为材料,以MS培养基为基本培养基,通过设置9种芽分化培养基,研究6-BA和IBA组合、KT对南瓜的子叶节诱导芽的影响。结果表明,1.0 mg·L~(-1)6-BA和0.02 mg·L~(-1)IBA质量浓度组合是6-BA与IBA浓度组合中不定芽诱导率最高的,为66.67%。在培养基中添加2 mg·L~(-1)和3 mg·L~(-1)的KT可以显著提高不定芽的诱导率;基因型不同南瓜的子叶节出芽率不同,其中南瓜品种‘银栗’最易诱导出芽,诱导率为93.75%,而‘上桔’的诱导率最低,诱导率为47.92%。试验得出南瓜子叶节诱导芽的最佳诱导培养基为MS+3 mg·L~(-1)KT+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.02 mg·L~(-1)IBA,平均诱导率为83.33%。     

甜瓜“黄旦子”再生体系的建立

以甜瓜品种"黄旦子"的子叶为试材,采用组织培养的方法,研究了子叶日龄、不同浓度6-BA、IAA和头孢霉素对不定芽的影响。结果表明:子叶日龄对其不定芽的诱导具有较大影响,最佳诱导时间为子叶光照下培养2d,不定芽诱导率达80%;MS+6-BA 1.2mg·L~(-1)为最佳诱导培养基,诱导率达67%。此外,500mg·L~(-1)头孢霉素可作为脱菌和抑菌过程的最佳浓度,最佳卡那霉素浓度为25mg·L~(-1)。     

小果型西瓜子叶节离体培养

为了进一步优化小果型西瓜组织培养技术,建立无菌体系流程,以小果型西瓜自交品系K1为试验材料,探索了小果型西瓜种子无菌萌发的条件及植物生长调节剂对子叶节再生不定芽的影响。结果表明,小果型西瓜种子最佳浸种及消毒灭菌方式为先用3%NaClO消毒20 min,无菌水浸种6 h,去除种皮,然后用70%酒精消毒60 s,再用3%NaClO消毒20 min,最后用无菌水清洗3次,每次1 min。在1/8 MS培养基上的萌发率最高,西瓜子叶节诱导不定芽的最佳培养基为MS培养基中附加BA 2.0 mg·L~(-1)、NAA 0.1 mg·L~(-1)。     

新疆甜瓜“伽师”再生体系的建立

以厚皮甜瓜"伽师"为试材,研究了6-苄氨基嘌呤(6-BA)、硝酸银(AgNO3)对诱导不定芽的影响,建立以子叶为外植体的快速高效再生体系。选取5d的"伽师"无菌苗子叶,在添加了不同浓度6-BA的MSB培养基中诱导不定芽;并且探讨了在最适6-BA浓度的培养基中添加不同浓度AgNO3对诱导不定芽的影响。结果表明:甜瓜子叶外植体接种在MSB+1.5mg·L~(-1) 6-BA诱导分化培养基上,诱导率可达75%;添加不同浓度AgNO3诱导不定芽,以MSB+1.5mg·L~(-1)6-BA+2.0mg·L~(-1) AgNO3最适,诱导率可达65%,产生单芽较多,缩短了再生周期。丛生芽或单生不定芽转至MSB+0.1mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) GA3的培养基中伸长,不定芽均可伸长且生长状况良好;再将单芽转至MSB+0.01mg·L~(-1) NAA培养基进行生根。     

苦瓜下胚轴的离体再生体系

为了建立高频的苦瓜离体再生体系,为苦瓜遗传转化提供技术基础,筛选了最适消毒方法和外植体类型。以MS培养基为基础培养基,添加不同浓度激素组合,筛选最适于苦瓜不定芽诱导、伸长和生根的培养基。最佳的消毒方法为:用水浸泡去壳的种子15 min,在超净工作台中用75%酒精浸泡30 s后再用4%NaClO浸泡6 min,用无菌水冲洗4～5遍,污染率为0,发芽率为98%;最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2.5 mg·L~(-1)6-BA+0.01 mg·L~(-1)IBA,愈伤组织密度为0.79 g·cm~(-3),不定芽的分化率为39%,最佳外植体为下胚轴(12 d),诱导率为41%;最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.005 mg·L~(-1)IBA;最佳的生根培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)IBA,移栽存活率为74%。初步建立了苦瓜离体再生体系。     

富花青素紫色番茄组织培养再生体系的建立

以樱桃型紫色番茄"砚紫1号"种子为试材,通过无菌处理获得无菌苗,用无菌苗的幼嫩子叶为外植体,研究了诱导愈伤组织分化及生根情况,以期建立高效的离体培养再生体系。结果表明:紫色番茄无菌苗子叶在MS+IAA 0.1mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)培养基条件下的愈伤组织诱导状态最佳;将愈伤组织进行暗培养处理,可诱导愈伤产生不定芽,其中最佳的培养基条件是MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+6-BA 2.0mg·L~(-1);诱导再生的不定芽经过2周光培养接种至MS+NAA 0.05mg·L~(-1)培养基中,诱导生根良好,可获得完整的再生植株。     

梨矮化砧木'青砧D3'叶片高效再生体系的构建

以梨矮化砧木'青砧D3'为试材,进行了离体叶片组织培养高效再生体系的构建。结果表明:TDZ和IBA均可以促进'青砧D3'离体叶片不定芽的诱导,但TDZ效果更显著,其诱导效果和TDZ的浓度成正比,研究发现'青砧D3'离体叶片不定芽再生最佳培养基为NN69+TDZ 3.0 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),再生率与再生芽数分别为100.00%和7.69;IBA对'青砧D3'不定根的诱导优于NAA,不定根再生最佳培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),根诱导率达到100%。该研究的开展为梨矮化砧木'青砧D3'的工厂化育苗奠定了基础。     

笃斯越桔高效再生体系的建立

以笃斯越桔带叶嫩茎为外植体,研究植物生长调节剂对其叶片、茎段等不定芽再生及组培苗瓶内生根壮苗的影响;探索不同移栽技术对组培苗移栽成活率的影响。结果表明:玉米素(ZT)能够促进叶片、茎段等外植体高效分化出不定芽,联合使用吲哚丁酸(IBA)能够降低增殖系数,使不定芽叶片更绿、茎较粗壮,MWPM+1.0mg·L~(-1) ZT+0.1mg·L~(-1) IBA为最佳不定芽再生培养基;且低浓度的IBA能有效促进组培苗生根,矮壮素(CCC)具有壮苗作用,MWPM+0.5mg·L~(-1) IBA+5.0mg·L~(-1) CCC为最佳壮苗生根培养基;该研究提出的育苗袋辅助移栽技术,使组培苗移栽成活率达到100%,建立了笃斯越桔高效再生体系。     

八棱海棠高效再生体系的建立及潮霉素的抗性试验

以八棱海棠子叶为外植体,比较了不同浓度植物激素、不同激素组合、不同暗培养时间及不同浓度潮霉素对八棱海棠再生体系的影响,建立了八棱海棠高效再生体系,筛选并分析了潮霉素在八棱海棠遗传转化中的适宜浓度。结果表明:诱导子叶愈伤的最佳培养基为Sc+2.0 mg·L~(-1) TDZ+0.2 mg·L~(-1) NAA+0.5 mg·L~(-1) GA_3,芽再生的最佳培养基为Sc+2.0 mg·L~(-1) TDZ+0.2 mg·L~(-1) NAA,暗培养最佳时间为10 d,生根最佳培养基为1/2MS+0.25 mg·L~(-1) IBA。八棱海棠在整个再生过程中均对潮霉素敏感,在潮霉素浓度为2.0 mg·L~(-1)的愈伤诱导培养基上,外植体的愈伤诱导率仅为23.33%,分化率仅为9.88%;当潮霉素浓度为4.0 mg·L~(-1)时,愈伤诱导率下降为13.00%,而且愈伤不分化,随着培养时间延长,愈伤组织变得更加致密,之后变褐死亡。在诱导生根培养基上添加3.0 mg·L~(-1)潮霉素,生根率仅为3.52%,大部分外植体再生芽底部只会诱导出愈伤组织,没有根原基形成。八棱海棠子叶愈伤诱导及分化的潮霉素筛选临界浓度为2.0～4.0 mg·L~(-1),生根时潮霉素筛选浓度为2.0～3.0 mg·L~(-1)。