猪粪中除臭微生物的筛选和鉴定

用感官法初筛出20株菌株,再通过定性复筛试验,最后从猪粪便中共分离出5株除臭微生物,都具有很强的除臭效果,其中假单孢菌属(ZY-1)氨气的去除率高达47.70%,巴氏芽孢杆菌(WJ-2)硫化氢的去除率高达62.5%,显示出这类细菌在猪场粪便的处理过程中具有良好的应用前景.     

猪粪中除臭微生物的筛选和鉴定

用感官法初筛出20株菌株,再通过定性复筛试验,最后从猪粪便中共分离出5株除臭微生物,都具有很强的除臭效果,其中假单孢菌属(ZY-1)氨气的去除率高达47.70%,巴氏芽孢杆菌(WJ-2)硫化氢的去除率高达62.5%,显示出这类细菌在猪场粪便的处理过程中具有良好的应用前景。     

畜禽粪便除臭微生物的分离与筛选

从10份样品中分离出169株菌株,通过硼酸吸收法测定各菌株对新鲜猪粪中氨气排放量的影响,从中初步筛选出可减少氨气排放的菌株31株。再通过碱性锌铵络盐吸收比色法筛选出可减少硫化氢释放的菌株11株,这11株菌株都可使氨气的释放减少30%以上。而菌株10MG可使氨气和硫化氢气体的释放量分别降低67.95%和26.6%,具有明显的除臭效果,在改善养殖环境中具有重要的应用前景。     

芽孢杆菌不同菌种抑菌性强度试验比较分析

研究从不同环境中分离鉴定12种共21株芽孢杆菌,应用滤纸片法进行芽孢杆菌抑菌性的比较试验。结果表明:枯草芽孢杆菌07菌株、枯草芽孢杆菌16菌株、贝莱斯芽孢杆菌02菌株和韦氏芽孢杆菌A菌株对经黄色葡萄球菌抑菌强度达到"++++",对大肠杆菌的抑菌强度达到"++"以上。芽孢杆菌sp.菌株对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌强度达到"+++"。研究表明,芽孢杆菌同一菌种的不同菌株抑菌强度不同;不同菌种之间的抑菌强度差别明显,且对大肠杆菌的抑菌强度尤为突出。     

大庆地区猪场中除臭菌的分离筛选及初步鉴定

为了获得高效除臭菌株,试验在大庆地区不同猪场采集猪粪、土壤和淤泥样本,通过感官初筛试验及定性复筛试验筛选除臭菌株。结果表明:共筛选出2株除臭菌株,X-3菌株的氨气与硫化氢去除率为46.6%、6.8%;X-5菌株的氨气与硫化氢去除率为5.6%、54.5%;经染色镜检与生化鉴定,X-3菌株为短状杆菌属(Brachybacterium sp.),X-5菌株为副球菌属(Paracoccus sp.)。     

西宁地区清真屠宰场中除臭菌的分离筛选及初步鉴定

本试验从西宁市清真屠宰场采集牛羊肚粪、屠宰产生的污样本,从中分离纯化菌种,对菌种通过感官试验、菌种的初筛及复筛试验筛选除臭菌株。结果表明,共筛选出2株除臭菌,菌株M3.7与菌株R3.8,菌株M3.7氨气和硫化氢去除率分别为12.03%和55.04%;菌株R3.8氨气和硫化氢去除率分别为43.82%、13.86%。经染色镜检及生化试验初步鉴定,M3.7菌株为短状杆菌属,R3.8菌株为副球菌属。     

鸡粪堆肥脱氨氮菌株的分离筛选与鉴定

为筛选具有较好脱除鸡粪堆肥所产生氨气效果的菌株,采集鸡粪及鸡粪堆肥样品,将样品驯化后通过富集、分离、纯化获得一定数量的氨氮降解菌,检测不同菌株的氨氮降解率,筛选降解氨氮能力强的菌株进行鉴定及复配试用于鸡粪堆肥。研究最终获得三株具有较强氨氮降解能力的细菌,包括两株嗜温菌株和一株嗜热菌株,通过形态学观察和16 S rDNA序列同源性分析,确定3个菌株分别为成团泛菌、努比卤地无氧芽孢杆菌和产气肠杆菌,三株细菌72h降解氨氮的能力分别为46.1%、32.2%和44.7%。由三株细菌复配制备的复合菌剂能够降低鸡粪堆肥氨气释放量。获得的菌株不但可用于堆肥过程氨气的脱除,也可以应用于除臭滤塔、除臭室,具有潜在的应用价值。     

猪粪高效除臭微生物菌株筛选及发酵条件优化

为了探索微生物除臭剂对畜禽粪便环境污染的治理效果,本研究利用平板划线分离法从5份样品中分离出130株菌株,通过氨气和硫化氢选择性培养基定性初筛和硼酸吸收法、锌胺络盐吸收比色法定量复筛相结合的方法,分别筛选出了可高效抑制氨气、硫化氢释放的菌株5株和3株,其中命名为BX3的菌株对氨气和硫化氢的去除率分别达到80.07%和76.92%;采用L₈(2⁷)正交试验优化设计其高效除臭组合,结果表明,“AF2+DZ1+BX3+DZ3+BZ1+EZ3+AX4”组合氨气和硫化氢的释放量显著或极显著低于其他组合,为最佳组合;与空白对照相比,第5天时氨气和硫化氢的去除率达到82.14%和80.84%。对最佳组合除臭发酵工艺研究,在接种量分别为10%和15%,含水率40%和30%,麸皮添加量为10%时氨气和硫化氢的释放量最小。筛选的微生物在除臭剂制备及治理畜禽粪便对环境污染方面具有较大的应用潜力。     

复合生物制剂应用于除臭抑菌豆腐猫砂的研究

猫砂作为宠物猫饲养的日常消耗品,近年来出现了很多新型猫砂产品,对猫砂研究的重点也逐步放在舒适度、安全性、除臭和抑菌性能上。本研究制备了以蒲公英提取物、复合酶制剂和益生菌粉、豆渣、玉米粉、瓜尔胶等复合生物制剂为主要成分的新型豆腐猫砂。该猫砂与未添加复合生物制剂的普通豆腐猫砂进行除臭试验、抑菌试验和酸败试验,结果表明,该复合生物制剂猫砂具有显著的除臭抑菌作用,对氨气和硫化氢的清除率分别高达97.62%和96.61%,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌的抑菌率均超过96%,且常温下不易酸败。     

响应面法优化微生物除臭效果的研究

为了减少畜禽粪便引发的恶臭气体污染,本研究选用具有除臭功能的贝莱斯芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母和干酪乳杆菌4种微生物菌种作为Box-Behnke设计的4个因素,将4种菌种经活化后接入粪便中,以对应活菌数1×10~4、1×10~5和1×10~6 CFU/g作为Box-Behnke设计的3个编码水平。利用响应面设计构建得到29种复合微生物菌株组合,以其对猪粪中吲哚、氨和硫化氢的去除率作为参考指标,优化得到了4株除臭菌种的最优添加比例。结果表明,当菌液浓度为1×10~8 CFU/mL的贝莱斯芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母和干酪乳杆菌分别以0.47%、0.05%、0.01%和1.00%的比例加入猪粪便中,堆积发酵7 d后对猪粪便中的吲哚、氨和硫化氢的去除率分别为73.59%、63.60%和70.29%。由此可见,经响应面设计优化后的除臭微生物菌种组合具有良好的除臭效果,对控制畜禽粪便恶臭污染具有较高的应用价值。     

响应面法优化微生物除臭效果的研究

为了减少畜禽粪便引发的恶臭气体污染,本研究选用具有除臭功能的贝莱斯芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母和干酪乳杆菌4种微生物菌种作为Box-Behnke设计的4个因素,将4种菌种经活化后接入粪便中,以对应活菌数1×10⁴、1×10⁵和1×10⁶ CFU/g作为Box-Behnke设计的3个编码水平。利用响应面设计构建得到29种复合微生物菌株组合,以其对猪粪中吲哚、氨和硫化氢的去除率作为参考指标,优化得到了4株除臭菌种的最优添加比例。结果表明,当菌液浓度为1×10⁸ CFU/mL的贝莱斯芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母和干酪乳杆菌分别以0.47%、0.05%、0.01%和1.00%的比例加入猪粪便中,堆积发酵7 d后对猪粪便中的吲哚、氨和硫化氢的去除率分别为73.59%、63.60%和70.29%。由此可见,经响应面设计优化后的除臭微生物菌种组合具有良好的除臭效果,对控制畜禽粪便恶臭污染具有较高的应用价值。     

黄颡鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药性及其消失速率研究

在离体条件下通过测定最小抑菌浓度MIC值,研究4株黄颡鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药产生速率与耐药性消失速率。结果表明:以37℃条件下培养48h为1代,HSY02菌株对氟苯尼考的最小抑菌浓度为3.906 3μg/m L,HSY01、HSY03、HSY04菌株对氟苯尼考的最小抑菌浓度为1.953 1μg/m L。在含有氟苯尼考的药物营养肉汤培养基中连续传代8代后,氟苯尼考对3株嗜水气单胞菌HSY01、HSY03、HSY04的最小抑菌浓度(MIC)由1.953 1μg/m L上升至62.50μg/m L,耐药性增长了32倍。HSY02菌株的最小抑菌浓度(MIC)由3.906 3μg/m L上升至62.50μg/m L,耐药性增长了16倍;且耐药性获得后保持稳定,其消失速率为0。     

一例兔大肠杆菌与魏氏梭菌混合感染病例诊断与药敏试验

为诊断患病死亡兔,对死亡兔进行临床剖检、细菌分离培养,获得PL01、PL02、PL03、PL04、PL05、PL06、PL07、PL08、PL09、PL10、PL11等11株细菌。对以上菌株使用生化鉴定试剂盒(GB4789.38-2012)进行生化鉴定,结果:PL01、PL02、PL03、PL04靛基质+、MR+、VP-、西蒙氏柠檬酸盐-,与大肠杆菌一致;利用多重PCR方法测定PL05、PL06、PL07、PL08、PL09、PL10为A型魏氏梭菌,PL11为C型魏氏梭菌。按照琼脂扩散法做药敏试验,显示大肠杆菌对替米考星、丁胺卡那敏感,魏氏梭菌对头孢唑林、强力霉素、氧氟沙星敏感。     

不同芽孢杆菌对雏鸡细菌性腹泻病原菌的体外抑菌试验

研究不同芽孢杆菌对雏鸡细菌性腹泻病原菌的体外抑菌作用。采用稀释分离法从不同来源的样品中分离得到芽孢杆菌菌株41株;以3种雏鸡细菌性腹泻病原菌为指示菌,采用牛津杯法进行体外抑菌试验,发现6株菌株对病原菌均具有明显的体外抑菌作用,抑菌效果最好的为菌株B332,其次为菌株D4;经形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析,菌株D4和B332应分别归属于巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。     

5株凝结芽孢杆菌的鉴定及抗逆性分析

通过细菌形态学、生理生化特征分析,5株鉴定均为凝结芽孢杆菌。以总菌数、抑菌性、热稳定性、耐人工胃肠液、耐胆盐能力等为评价指标,比较5个凝结芽孢杆菌产品的抗逆性。结果表明,5株凝结芽孢杆菌经65℃处理30 min后,存活率均超过100%;A株抑菌性最好,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌率分别可达99.85%和101.4%,显著高于D株(P0.01)和E株(P0.01)。经过人工胃液和人工肠液处理后,菌株A和B在模拟胃液(pH 2.0)存活率较高,均在80%以上,同时这A株菌完全耐受模拟肠液(pH 7.6);A株和B株耐受胆盐浓度可达1%,其他三株的耐受胆盐浓度可达0.3%。A株较其他株凝结芽孢杆菌具有较好的益生特性,在饲料生产上具有重要的应用价值。     

牛源抗氧化芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究

【目的】从奶牛瘤胃中分离具有抗氧化能力且耐受性好的芽孢杆菌,为牛源益生菌作为抗氧化添加剂使用提供理论依据及参考。【方法】采集3头成年荷斯坦奶牛瘤胃内容物,通过细菌分离纯化、形态观察、生化检测及16S rDNA分子检测进行鉴定,同时检测筛选菌株的超氧自由基和羟自由基清除率、耐酸、耐胆盐能力及对抗生素的耐药性。【结果】从奶牛瘤胃液中共获得了12株菌,通过特异性培养基与革兰氏染色共筛选出5株芽孢杆菌(X-1～X-5)。对5株芽孢杆菌进行分子鉴定,确定X-1为热噬淀粉芽孢杆菌,X-2为短小芽孢杆菌,X-3为解蛋白芽孢杆菌,X-4为枯草芽孢杆菌,X-5为沙福芽孢杆菌。抗氧化能力检测结果显示,5株菌均具有一定的抗氧化能力,X-5菌株抗氧化能力最高,超氧自由基和羟自由基清除率分别达到73.81%和73.54%。当pH为2.5时,5株芽孢杆菌存活率均在25%以上;胆盐浓度为0.6%时,5株芽孢杆菌存活率均在60%以上,说明菌株具有良好的耐受性。药敏试验结果显示,试验分离出来的大多数菌株对氧氟沙星、呋喃妥因、红霉素等高度敏感;对头孢呋辛、头孢噻肟、链霉素等耐受;对卡那霉素、环丙沙星、氨苄西林等中度敏感。...     

枯草芽孢杆菌抑菌强度比较试验研究

本实验室从不同来源分离鉴定16株枯草芽孢杆菌,应用滤纸片方法进行抑菌强度的试验比较.试验分析结果表明:枯草芽孢杆菌菌株抑菌强度不同,从16株中比较筛选出4株抑菌性较强的枯草芽孢杆菌.芽孢杆菌的抑菌作用强度主要取决于产生抗菌肽的性质和产生量.本试验比较筛选出的4株枯草芽孢杆菌所产生的抗菌肽的性质,如何优化培养条件、培养基...     

牡丹内生真菌高抑菌活性菌株的筛选及培养基优化

为了从牡丹内生真菌中筛选具有高抑菌活性的菌株,并对其发酵培养基进行优化,试验采用测量抑菌圈的方法,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌株,筛选一株抑菌活性最强的菌株并通过正交试验对培养基各营养组分进行优化。结果表明:抗菌活性菌株筛选发现,JYH4的抑菌圈直径最大;优化后的培养基组分为葡萄糖6%、蛋白胨6%、磷酸氢二钾0.5%。说明JYH4具有较高的抑菌活性,在优化后的培养基中对枯草芽孢杆菌的抑菌效果更为显著,其抑菌圈直径达到18.77 mm。     

技术转让

该项成果以芽孢杆菌和酵母菌为研究对象,充分利用芽孢杆菌的抗逆性能和酵母细胞含有丰富蛋白质、维生素等多种营养成分,筛选出三株有益微生物TS-01、TS-02和TS-03,并通过了中国科学院微生物研究所的鉴定;对三株有益微生物进行了系统的细菌特性研究;菌株耐酸、耐热和耐受高浓度微量元素等研究;提出了以芽孢数(芽孢率)     

9种兽药对益生菌制剂组份菌株的抑菌试验

益生菌制剂作为一种新型饲料添加剂，具有安全、无毒副作用、无公害和无残留等特点，因而市场应用前景广阔，也成为竞相研究开发的热点。我们用筛选的地衣芽胞杆菌01株、植物乳酸杆菌03株和双歧杆菌05株研制了复合益生菌制剂。为研究3种组份菌株是否含有某些抗药性基因，该制剂能否与抗生素等抗菌促生长药物同时使用，我们用生产实际中常用的7种抗生素和2种抗球虫药进行了此项试验，旨在为此益生菌制剂科学合理的使用提供依据。现将试验情况报道如下。1 材料和方法1．1 材料 （1）试验菌株：地衣芽胞杆菌01株（下称01株）、植物乳酸杆菌03株…