应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒

应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。     

用酶联免疫吸附法检测细胞培养物中兔出血症病毒

用本实验室提纯的兔出血症病毒抗体（IgG）,采用改良过碘酸钠（NaIO4）交联法,将辣根过氧化物酶（HRP）标记在抗体上,以4×10聚苯乙烯微量酶标板作为载体,用酶联免疫吸附法双抗体夹心法检测了兔肾上皮细胞（RK）培养的RHDV16代、18代细胞毒和羊睾丸细胞（ST）培养的RHDV19代、24代、26代细胞毒,均呈特异性阳性反应,P/N值〉2．1,正常细胞培养物标本为阴性结果,P／N值〈2．1,试验结果与免疫荧光试验相吻合。     

基因重组抗原酶联免疫法检测兔出血症病毒抗体及其标准化

以重组兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白为抗原，建立了RHDV抗体间接ELISA检测方法。优化的试验反应务件为：重组VP60的包被质量浓度为1．0mg／L，用10％牛血清封闭，以大肠杆菌提取物稀释被检血清以消除非特异性反应。将所建立的ELISA与现行血凝抑制(HI)试验比较发现，不同免疫状态的兔血清的RHDV ELISA抗体与HI抗体均呈正相关。对11个RHD免疫兔场1130份血清样品的抗体检测表明，各免疫兔群血清RHDV抗体水平不完全一致，D值在1．09～1．76之间，显著高于非免疫兔(0．05)及SPF兔(0．02)，低于高免兔(2．34)。在此基础上，研制了RHDV抗体酶联免疫检测试剂盒，测定了其主要指标，制定了各成分的质量控制标准，为兔群进行免疫学监测及评价疫苗的免疫效果提供了便利。     

酶联免疫吸附试验检测猪盖他病毒血清抗体

盖他病毒是甲病毒属的成员,证明可引起赛马急性发热,后肢伴有荨麻疹和肿胀。近来该病毒已从健康猪和死于过急性疾病的新生仔猪中分离到,经实验接种猪复制出了发热病症,并使妊娠猪胎盘感染。     

用酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎病毒抗体

用酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎病毒抗体曹永长毕英佐何洁（华南农业大学动物科学系，广州５１０６４２）禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，简称ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起的一种危害严重的传染病，主要侵害幼年鸡群，其特征是...     

应用阻断酶联免疫吸附试验检测牛白血病病毒抗体

多年来,都用琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验检测牛白血病病毒(BLV)抗体。而此疫病的普查和根除需要检测大量的样品,酶联免疫吸附试验就可满足这一要求,间接法是先将提纯的抗原包被到固相载体,再加试验血清和特异性IgG结合物,阻断法是利用试验血清中的抗体干扰或阻断标准抗原-抗体     

应用葡萄球菌蛋白A酶联免疫吸附试验检测病毒抗体

提出了应用葡萄球菌蛋白A联接辣根过氧化物酶的改良间接酶联免疫吸附试验。应用蛋白A联接辣根过氧化物酶代换间接EliSA中的抗球旦白酶结合物,检测在马、牛、猪、猫、犬、兔类动物(兔)和人血清中的病毒抗体。比较这个EliSA的结果与病毒中和试验的结果,在实验室内应用这个试验对不同种类的动物血清进行检测作了讨论。     

酶联免疫吸附试验检测山羊关节炎脑炎病毒抗体的评价

当前,诊断山羊关节炎脑炎病毒(CAEV)感染的方法包括用琼脂免疫扩散(AGID)试验及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CAEV抗体。ELISA由于简便易行,成本低并适于大批量操作而更受人们欢     

斑点免疫结合试验和酶联免疫吸附试验检测绵羊蓝舌病病毒抗体的比较

蓝舌病,一种由节肢动物传播的家畜和野生反刍动物的病毒性疾病,世界范围发生。虽然所有反刍动物可能易感,但通常只见绵羊出现严重的临床疾病。 蓝舌病病毒(BTV)有24个血清型。这些血清型可用中和试验区别。全部血清型具有一种群特异性抗原,其抗体能用不同免疫学方法如补体结合、免疫扩散(ID),免疫     

ELISA检测兔出血症病毒抗体的研究

用人“O”型红细胞吸附解脱法提纯制备的兔出血症病毒抗原,成功地建立了ELISA检测兔出血症病毒抗体的方法。实验证明,该ELISA方法敏感、特异,与HI试验结果有极好地相关性。     

间接酶联免疫吸附试验检测抗黄曲霉素抗体

为检测抗黄曲霉素抗体建立了一种新颖而简便的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),该法是用黄曲霉素M_1-牛血清白蛋白(AFM_1)-BSA)结合物免疫雌性BALB/CJ小鼠制备抗黄曲霉素M_1抗体。试验用易得的-AFM_1-BSA和黄曲霉素B_1牛血清白蛋白(AFB_2-BSA)来包被试验板,适于检测普通环戊并甲氧基碳-肟法结合的任何黄曲霉素。本法对开发及改进测定黄曲霉素代谢产物抗体的免疫测定方法很有价值。     

应用间接血凝试验检测兔出血症病毒抗体的研究

应用纯化兔出血症病毒抗原,以戊二醛醛化绵羊红细胞为载体,成功地建立了间接血凝试验用以检测兔出血症病毒抗体.与血凝抑制试验和琼脂双扩散试验比较,其敏感性比血凝抑制试验高32倍,比琼脂双扩散试验高1024倍.致敏红细胞于4°C保存四个月仍有效.     

酶联免疫吸附试验检测羊传染性脓疱病毒

用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记经兔体高免提纯的兔抗羊传染性脓疱病（Ｏｒｆ）ＩｇＧ，用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测不同毒株的传染性脓疱病毒及病毒基因在载体中重组克隆后转化到受体菌中的表达情况。结果表明，ＨＲＰ标记的ＩｇＧ，经自动酶标光度计检测，对ＨＣＥ、ＨＬＲ、ＬＭＥ、ＤＰＥ、ＨＢＧＥ、ＹＬＧＥ毒、ＬＴＥ囊膜蛋白及ＨＣＥ１０代细胞毒都呈现特异性反应。在模式２的检测中，ＯＤ值均在０．０７以上，在模式３的检测中，都呈现阳性。受检的４株重组转化大肠杆菌中，一株表现阳性，说明重组菌对Ｏｒｆ病毒的抗原产生表达。试验证明，ＥＬＩＳＡ是对羊传染性脓疱病毒进行诊断检测的一种快速、灵敏、准确的方法。     

应用葡萄球菌蛋白A的酶联免疫吸附试验用作检测病毒抗体

研制了一种用辣根过氧化物酶标记葡萄球菌蛋白A的改良间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。用辣根过氧化物酶标记蛋白A结合物取代抗球蛋白酶结合物作间接酶联免疫吸附试验,检测马、牛、猪、猫、狗、兔和人血清中的病毒抗体。该试验结果与血清—病毒中和试验作比较。并讨论了在实验室中应用该试验对各种动物血清作血清学试验的可能性。自从在1971年Engvall和Perlmann与Van Weemen和Schunrs研制了酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,该方法已广泛用于抗体或抗原的检测。因为ELISA和放射免疫测定法同样敏感,且所用试剂稳定,又不需要复杂设备,故当今已于许多诊断实验室中应用。与大多数其它常用方法比较,ELISA方法价廉、快速、简单。各种改良ELISA试验证明是有用的,特别间接方法适用于传染病研究。然而,因为许多实验室工作用各种动物血清,故需要各种抗球蛋白酶结合物,而商业上制备的结合物种类是有限的。显然,如果有一种能够检测各种动物免疫球蛋白的结合了酶的试剂,将大大促进了间接ELISA试验的多种用途。虽然早已知道葡萄球菌蛋白A与大多数动物种类的IgG结合,但这种现象得到广泛应用仅仅是近年的事。在放射免疫电泳,免疫铁蛋白技术和免疫荧光试验中,这种蛋白已用作代替抗IgG血清。本报告的目的是叙述在间接ELISA方法中,酶标记蛋白A的应用。这种改良方法用单一种试剂可以检测多种动物的抗体。强调了此种方法便于对多种动物病进行实验室诊断。