冷诱导转录因子基因CBF3转化黄瓜的研究

从拟南芥Columbia生态型基因组DNA中扩增并克隆了冷诱导转录因子CBF3基因,将其与CaMV35S启动子和Nos终止子融合后构建成植物表达载体pBINP-35S-CBF3。通过农杆菌介导转化黄瓜子叶,获得了具有卡那霉素抗性的黄瓜再生植株。经PCR检测鉴定,表明CBF3基因已整合到黄瓜基因组中。     

多毛番茄冷诱导转录因子CBF 1转化番茄的研究

番茄在气温低于12℃时即不能正常开花结实,因此番茄生产受到了很大限制。多毛番茄是一种野生番茄,具有耐低温甚至抗冻的特性,短暂遭受0℃的低温,仍能正常开花结实。构建了多毛番茄冷诱导转录因子CBF1的植物表达载体,并通过农杆菌介导法转入番茄中,获得8株转基因阳性植株。转基因植株经冷诱导处理后,丙二醛（MDA）含量和超氧自由基（O2－·）含量均低于非转基因对照,而超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、脯氨酸（Pro）含量、过氧化氢酶（CAT）活性、抗坏血酸过氧化物酶（ASA）活性和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性则高于非转基因对照,表明转多毛番茄CBF1基因（ShCBF1）可以提高番茄的抗冷性。     

我国将CBF转录因子应用于基因工程的研究进展

总结了近年来我国将CBF（c-repeat binding factor）转录因子应用在基因工程中的研究进展,重点介绍了我国在CBF转录因子的克隆和基因转化方面的研究内容,并对其应用前景进行了展望。     

CBF转录因子在植物抗冷育种中的应用

CBF转录因子能调控一系列低温诱导基因的表达,是目前植物抗低温分子生物学领域研究的热点之一。本文对CBF转录因子的结构、功能及其在植物抗冷育种中的应用等进行了综述。     

山葡萄转录因子CBF1基因的克隆及其遗传转化体系

根据山葡萄的CBF1基因序列设计一对特异引物,克隆出山葡萄(Vitis amurensis)栽培品种‘双优’的抗寒转录因子CBF1基因,并将其构建到pBI121表达载体中,获得山葡萄转录因子CBF1基因的植物表达载体,命名为pBI121-ViCBF1,利用农杆菌介导叶盘转化‘巨峰’葡萄以研究高效的‘巨峰’葡萄转化体系。结果表明,以农杆菌LBA4404为介导菌株,以‘巨峰’葡萄叶片为外植体、3 d为预培养时间和4~5 d共培养时间、400 mg·L-1羧苄青霉素,50 mg·L-1卡那霉素筛选浓度转化效果较好,并已筛选到6株转基因植株,PCR检测均为阳性,为提高‘巨峰’葡萄的抗寒性建立了初步的技术基础。     

侧金盏花CBF转录激活因子基因片段的克隆

[目的]探索CBF转录激活因子基因在侧金盏花中是否存在。[方法]以侧金盏花基因组DNA为模板,根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计1对特异性引物,通过PCR扩增获得1个DNA片段,将其克隆到pUCm-T载体中,转化大肠杆菌TG1,筛选阳性克隆并对其进行测序鉴定。[结果]测序结果显示通过PCR扩增获得的基因片段长448 bp。在GenBank中检索,该序列与从拟南芥和其他作物中克隆的CBF同源基因序列同源性较低,说明是一个新的基因片段,初步认定该片段是侧金盏花CBF基因片段。[结论]该研究为进一步克隆侧金盏花CBF转录激活因子基因全长序列、鉴定其生物学意义奠定了基础。     

植物抗寒转录因子CBF和ICE研究进展

CBF是一类植物所特有的转录因子,是植物抗寒途径的枢纽,调控下游大量抗寒基因的表达,对增强植物的抗寒能力非常重要。ICE属于一种类似MYC的bHLH转录因子,可特异结合到CBF启动子的MYC作用元件并诱导CBF下游基因的转录表达。综述了CBF和ICE两类转录因子的发现、应用及两者之间的关系,为作物抗寒分子改良提供参考。     

CBF转录因子在提高植物抗逆性中的作用

CBF转录因子在植物胁迫应答途径中发挥十分重要的作用,对CBF转录因子的结构特点、表达调控及其在提高植物抗寒性、抗旱性及抗盐性中的作用的研究进展进行了综述。     

植物CBF转录因子抗寒作用机制研究进展

综述了抗寒转录因子CBF(C-repeat binding factor)的分离鉴定、结构特征、表达特性、在植物抗寒过程中的作用机理及其与其他分子元件的相互作用等信息,系统阐述了CBF的最新研究进展,为其在植物抗寒方面的研究与应用提供理论依据。     

植物CBF转录因子抗寒作用机制研究进展

综述了抗寒转录因子CBF(C-repeat binding factor)的分离鉴定、结构特征、表达特性、在植物抗寒过程中的作用机理及其与其他分子元件的相互作用等信息,系统阐述了CBF的最新研究进展,为其在植物抗寒方面的研究与应用提供理论依据。     

加工类型黄瓜品质性状的主成分及聚类分析

对19个加工类型黄瓜品种的7个品质性状进行了主成分和聚类分析.结果表明19个品种分为产量、形态和品质3个主成分因子,其主成分的累计贡献率达89.81%,而且基本上可描述7个品质性状的遗传变异.当类平均距离为1.035时,19个品种被聚为短果和长果2种类型,而当类平均距离为0.942时,19个品种被聚为短果中等品质、短果优质和长果高产3种类型.     

银杏叶黄瓜与普通黄瓜性状比较研究

本试验结果表明银杏叶性状为一对核基因控制的隐性性状。与普通黄瓜相比，银杏叶黄瓜叶缘上卷、叶片较小且呈匙状，其叶片叶绿素含量及光合速率无明显差异，瓜条性状亦一致。与前人报道的银杏叶不同。     

加工黄瓜品质性状遗传力和遗传相关的初步研究

对 1 9个加工黄瓜品种的 7个果实性状的遗传力、遗传变异系数和遗传相关进行了研究。结果表明 :可溶性总糖含量、果实长度和果肉厚度的遗传力较高 ,对其进行早世代单株选择有较好的效果 ;遗传变异系数以可溶性总糖含量和果实鲜重较高 ,选择潜力较大。性状间遗传相关的研究结果表明 :通过对果实长度的选择 ,可实现对果实鲜重、果实干重性状的间接选择 ,而对总蛋白质含量的选择可通过对果肉厚度的间接选择而实现。     

黄瓜单性结果形态及生理机制的研究

黄瓜单性结果品系ＥＰ－６授粉与不授粉处理花后均能正常发育,不授粉处理花后果实的发育显著慢于授粉处理,表现为单果重低、果形短、头部尖细,同时不授粉处理的果肉厚／果瓤厚值显著高于授粉处理;非单性结果品系ＹＤ－１、ＺＱ－１授粉处理果实均能正常发育而不授粉处理大多化瓜或果实发育畸形。从花前２ｄ天至开花当天ＥＰ－６子房中ＩＡＡ、ＡＢＡ含量与ＰＯＤ活性均高于ＹＤ－１、ＺＱ－１;从开花当天至花后４ｄ的子房（幼果）,４个能正常结果的处理,ＩＡＡ、ＡＢＡ含量（单果）均上升而ＰＯＤ活性下降,２个未能正常结果的处理ＩＡＡ、ＡＢＡ含量（单果）仍维持低水平而ＰＯＤ活性上升。     

甜瓜种质RAPD体系的优化研究

研究了不同ＤＮＡ提取方法的护增效果。采用Ｌ９（３＾４）正交试验设计,快速、有铲地确定了适合甜瓜的最佳扩增条件（包括ｄＮＴＰ、引物、Ｍｇ＾２＋和ＴａｐＤＮＡ聚合酶等浓度的最佳组合）。并通过试验确定了省时的ＲＡＰＤ－ＰＣＲ反应程序。最终得到了一个重复性好、清晰度高、较理想的甜瓜ＲＡＰＤ技术体系。     

侵染蚕豆的黄瓜花叶病毒的分离和鉴定

根据鉴别寄主反应、寄主范围测定、介体传播特性、粒体形态以及血清学诸项试验,将蚕豆病毒分离物B_5鉴定为黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic virus,CMV)。B_5液接种能侵染7科20余种植物。在蚕豆的接种叶上形成红褐色坏死斑,有或无系统侵染;局部侵染苋色藜和昆诺藜;系统侵染心叶烟和番茄分别引起花叶和蕨叶症。B_5可经桃蚜、棉蚜和甘篮蚜的非持久方式传播。B_3在电镜下粒体形态为球状,直径28～30nm。B_5病株的粗制液在免疫双扩散试验中能和黄瓜花叶病毒的抗血清起反应,且在免疫电镜试验中,黄瓜花叶病毒抗血清处理的铜网能捕获大量B_5粒体。     

转基因甜瓜研究进展

甜瓜基因工程是利用分子克隆技术,分离、提取或人工合成具有抗病、抗虫、提高品质等某一特性的基因片段,并利用根癌农杆菌介导或基因枪等技术转入甜瓜植株,可获得前所未有的甜瓜新种质,这是提高甜瓜遗传育种、品种改良,拓宽种质资源范围的一条有效途径。目前,转基因甜瓜研究主要集中在抗病、抗虫与提高果实品质和控制果实成熟等方面,本文就转入的上述外源基因研究做一综述。     

寒地粳稻外源基因转化途径研究初报

试验研究了寒地粳稻（ＤＳ２＃）成熟胚为受体的ＪＱ７００型基因枪转化，寒地粳稻（ＤＳ３＃）下胚轴愈伤悬浮细胞与细胞团为受体的农杆菌ＬＢＡ４４０４共培养转化，以及寒地粳稻（ＤＳ２ＧＧ＃）未受精胚囊为受体的花粉管通道等转化途径的初步尝试。结果首先在基因枪转化途径上得到突破——成功地将ＮＰＴⅡ基因、ＧＵＳ基因及抗虫基因（Ｂ．ｔ）的ＤＮＡ片段导入寒地粳稻（ＤＳ２＃）成熟胚。以ＧＵＳ基因组织化学法检测外源基因的表达，结果转化水稻细胞的短暂表达为阳性。经过一系列组织培养过程，诱导获得了绿色转基因水稻植株，取其叶片进行外源基因的稳定遗传与表达检测，结果ＧＵＳ基因组织化学检测亦为阳性，Ｏｌｙｍｐｕｓ倒置显微镜镜检结果——转基因水稻（ＤＳ２＃）植株叶片的叶脉等维管组织中ＧＵＳ基因表达更强烈。本文只是对转化途径进行研究，关于Ｂ．ｔ基因的整合与表达的检测工作正在进行中