辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)不同发育阶段对嘧菌酯的敏感性研究

 细胞色素bc₁位点抑制剂包含作用于线粒体内膜外壁CoQ氧化位点抑制剂(Q_oIs)和作用于线粒体内膜内壁CoQ的还原位点抑制剂(Q_iIs)。从未使用过Q_oIs和Q_iIs的江苏省南京市和安徽省和县随机采集分离获得48个辣椒疫霉单游动孢子囊菌株,并测定了它们不同发育阶段对嘧菌酯的敏感性。结果表明,辣椒疫霉菌丝生长对嘧菌酯的敏感性最低,EC₅₀值范围在1.225~86.100 μg/mL,平均值为(21.041±14.397)μg/mL,其活性低于甲霜灵47.7倍;游动孢子囊形成和萌发对嘧菌酯的敏感性较高,EC₅₀值范围分别在0.006~0.996 μg/mL和0.053~0.334 μg/mL,平均值分别为(0.161±0.126)μg/mL和(0.155±0.023)μg/mL,其活性高于甲霜灵516.8倍;游动孢子萌发对嘧菌酯的敏感性最高,EC₅₀值范围在(0.018~0.111)μg/mL,平均值为(0.057±0.011)μg/mL,活性是甲霜灵的142.4倍。离体生物测定结果表明,水杨肟酸对嘧菌酯抑制菌丝生长的增效作用最强,对游动孢子囊形成的增效作用次之,而对游动孢子囊和游动孢子萌发过程的增效作用则不明显。     

恶疫霉有性生殖交配行为的研究

 对同宗配合疫霉种——恶疫霉(Phytophthora cactorum Schroter)抗甲霜灵突变株和抗地茂散突变株的抗药性在游动孢子和卵孢子后代的遗传分析,筛选到抗性分别由细胞核纯合显性单基因控制的抗甲霜灵突变株和由细胞质可稳定遗传的线粒体基因控制的抗地茂散突变株。将携带抗甲霜灵对地茂散敏感(即Mt^rCn^s)标记的亲本与携带抗地茂散对甲霜灵敏感(即Mt^sCn^r)标记的亲本共同培养,在200个有性生殖单卵孢后代中检测到携带3种不同抗药性标记的单孢株,其中32株携带Mt^rCn^s标记,165株携带Mt^sCn^r标记,另有3株同时携带双亲的标记性状即MtrCnr。结果表明:恶疫霉种内不同菌株共同培养时,有性生殖以配对亲本的各自自交为主,同时配对亲本间也可发生一定频率的杂交。     

冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)的快速分子检测

 由冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)引起的疫病是一类植物检疫性病害。为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了冬生疫霉和其它疫霉的ITS序列,在此基础上设计了一对检测冬生疫霉的特异性引物751F/752R,该对引物从冬生疫霉中扩增得到一条616bp的条带,而其它19种疫霉和其它真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对冬生疫霉具有特异性。在25μL PCR反应体系中,引物751F/752R检测灵敏度为10龟基因组DNA;而以卵菌ITS区通用引物ITS1/ITS4和751F/752R进行套式PCR扩增,能够检测到10ag的基因组DNA,使检测灵敏度提高了1000倍。该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0.5个游动孢子。结合快速碱裂解法提取发病组织的DNA,采用该PCR检测技术,在1个工作日内即可从人工接种发病的植物组织中特异性的检测到该病原菌。表明本研究建立的检测方法可用于冬生疫霉的快速分子检测。     

绿粘帚霉(Gliocladium virens)厚垣孢子的诱导

 通过对8种培养基的筛选,获得了绿粘帚霉产厚垣孢子的最佳培养基(PD培养基),进一步研究得到了厚垣孢子产生的最佳培养条件为14 w、24 h/d光照,120 r/m in振荡,pH 3,30℃。在此条件下可完全抑制其分生孢子的产生,并在1周内产生8.00×10⁶个/mL厚垣孢子。     

长枝木霉Trichoderma longibrachiatum T6水分散粒剂的研制

以土壤中分离得到的一株拮抗菌——长枝木霉Trichoderma longibrachiatum T6为研究对象,通过优化培养基配方及助剂类型的筛选,成功研制了长枝木霉T. longibrachiatum T6水分散粒剂,并测定了其贮存稳定性。结果表明:制备长枝木霉T6水分散粒剂的最佳配方(质量分数)为:羧甲基纤维素(紫外保护剂)0.5%,碳酸钙(稳定剂)4%,聚乙烯基吡咯烷酮(PVP,黏结剂)5%,可溶性淀粉(崩解剂)5%,凹凸棒土(载体)5%及十二烷基硫酸钠(润湿剂)5%。由此配方制备的水分散粒剂中孢子含量为5.6×108 cfu/g,悬浮率53%,pH值6.0,水分含量3.5%,湿润时间52 s,且在冷藏温度为(4±2)℃条件下的稳定性显著高于在室温(25℃)下的。各项检测结果均符合国家标准。     

浙江小麦根围土壤腐霉(Pythium spp.)的一些生态学研究

 本文对小麦根围土壤中的腐霉Pythium种类、种群数量消长及其致病性作了初步研究。作者从不同生育期的小麦根围和内根围共分离出203个腐霉菌株,除69个菌株缺乏产生有性器官而未能鉴定外,其余134个菌株分别属10个腐霉种,其中粘腐霉P.adhaerens、链状腐霉P.catenulatum和绚丽腐霉P.pulchrum为浙江省分布新记录。P.spinosum是优势腐霉种类,在小麦根围和内根围出现率分别为27.43%和35.71%,P.ultimum和P.irregulare也较为常见,而P.aphanidermatum却极少出现。在小麦苗期和分蘖期腐霉数量较丰富,生育中后期较贫乏,这一消长变化可能主要与小麦生育期和土壤温度有关。致病性试验结果表明:P.irregulare和P.spinosum分别对小麦和水稻有较强的致病作用;P.aphanider-matum、P.irregulare和P.spinosum则对茄子、辣椒和番茄的致病力较强。P.spinosum、P.ultimum和P.irregulare的种内菌株间致病性差异不明显。     

广东省白背飞虱病原真菌的分离鉴定和培养

［目的］ 了解广东省白背飞虱（Sogatella furcifera）的昆虫病原真菌资源及其生物学特性。［方法］ 对从广东韶关市曲江区感染真菌病的白背飞虱中分离出的2种昆虫病原真菌进行了形态学鉴定,并测定了不同温度（10、15、20、25、30、35 ℃和37 ℃）和光周期（L∥D=24 h∥0 h和 L∥D=0 h∥24 h）对2种虫生真菌生长的影响。〖JP+1〗［结果］ 寄生白背飞虱的2种虫生真菌经鉴定为大孢巴科霉（Batkoa major）和冠耳霉（Conidiobolus coronatus）,对它们的形态特征进行了描述。生物学试验表明,2种真菌在15～30 ℃均可生长,生长速度随着温度升高而加快。在35 ℃冠耳霉生长速度开始下降,在37 ℃其生长速率接近于0。L∥D=24 h∥0 h和L∥D=0 h∥24 h 2种光周期对2种真菌生长影响不显著。［结论］ 寄生白背飞虱的虫生真菌分别为大孢巴科霉和冠耳霉,其生长主要受温度影响。     

大豆疫霉RNA结合蛋白PsM90的基因功能研究

 真核生物的基因表达能够在转录与转录后等水平受到调控,以适应不同时空环境中的生长与发育等生物学过程,其中PUF家族RNA结合蛋白是一类具有保守PUM-HD(Pumilio homology domain)功能域的转录后调节因子,通过与靶标mRNA特异性结合控制其稳定性及翻译。本研究利用CRISPR/CAS9介导的疫霉菌基因组编辑技术,对大豆疫霉的PUF家族基因PsM90进行敲除和功能研究。结果表明,PsM90敲除突变体的卵孢子产量减少至野生型的32%,卵孢子壁明显变薄,卵孢子中的细胞器未能正常分化;游动孢子对大豆黄化苗下胚轴的致病力有所下降。此外,PsM90的敲除不影响营养菌丝生长、孢子囊发育、游动孢子释放和休止孢萌发等生物学性状。上述结果揭示了PsM90是大豆疫霉有性发育等过程的重要相关基因,为深入揭示卵菌中卵孢子发育这一独特生物学过程的分子调控机制奠定了基础。     

棉花黄萎菌(Verticillium dahliae)菌系及鉴定技术

 山东省是我国产棉大省之一,棉花黄萎病是山东棉花生产上的重要病害,长期以来得不到有效的防治。近几年来,由于品种缺乏抗性,病菌致病性变异和适宜的发病条件,致使棉花黄萎病不断发展蔓延,1993年达到发病高峰。     

棉铃疫病菌(Phytophthora boeh meriae)对甲霜灵的抗性遗传研究

 本文在实验室条件下,经药物直接诱变,筛选获得棉铃疫病菌(Phytophthora boehmeriae Sawada)抗甲霜灵突变株,研究了其抗药性性状的遗传。结果表明,棉铃疫病菌易对甲霜灵产生抗性,抗性菌株对甲霜灵的抗性水平可高达其敏感亲本的5161.3倍以上;部分抗性菌株的抗药性性状在无性及有性单孢后代均可稳定遗传,另有部分抗性菌株的抗性性状在无性单孢后代出现分离甚至完全丧失。初步认为,供试棉铃疫病菌对甲霜灵的抗性遗传可能与细胞质遗传因子有关     

大豆疫霉选择性分离技术研究

 由大豆疫霉(Phytophthora spiae)引起的大豆疫霉根腐和茎腐病广泛分布于世界大豆主产区。是大豆毁灭性病害之一。     

土壤棉黄萎病菌选择性培养基——棉选一号

 棉花黄萎病的发生发展与土壤中微菌核的数量有着密切关系.本文介绍一种用于检验土壤内棉黄萎病菌的选择性培养基——棉选一号.其成份为:NaNO₃ 2g、MgSO₄·7H₂O 0.5g、K₂HPO₄ 1g、Fe₂（SO₄）₃·XH₂O 0.01g.KCl 0.5g、蔗糖5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml、氯霉素300mg、井岗霉素2.5ppm、五氯硝基苯350ppm、克菌丹0.5ppm.这种培养基能有效地分离自然土壤中黄萎病菌的微菌核,而极少受其他微生物的干扰,由于培养基上菌落大、黑色、微菌核呈放射状,故易用肉跟计数微菌核的数量.     

氯嘧磺隆对精禾草克、精稳杀得防除马唐、蟋蟀草的拮抗作用

在盆钵中以3叶的马唐、蟋蟀草测定了氯嘧磺隆与精禾草克、精稳杀得的相互影响。结果表明,氯嘧磺隆在混用时能明显降低精禾草克、精稳杀得对马唐、蟋蟀草的效果。处理后20天,氯嘧磺隆(12,18,24g ai/hm~2)使精禾草克(15～30g ai/hm~2)对马唐的防效分别降低6.01％～42.59％,23.96％～40.85％,19.63％～27.50％。相同剂量的氯嘧磺隆使精稳杀得对马唐的防效下降2.70％～58.91％,对蟋蟀草的防效下降2.67％～51.73％。对各试验的结果进行Colby法和等效线法分析,判定氯嘧磺隆与精禾草克、精稳杀得的相互影响为拮抗作用。     

食物对荔枝蝽生殖和存活的影响

食物显著地影响荔枝蝽的卵巢发育,产卵量和成虫的产卵期寿命,罩养于支树花（果）枝上,荔枝蝽每雌平均产卵２２２．３粒,净增殖率为１１０．５７;雌、雄成虫的平均寿命分别为９６．２５和９３．１９ｄ。罩养于嫩枝上者,每雌平均产卵１９３．４ ,净增殖率为９６．２６;雌、雄成虫的平均寿命分别为８９．６９和８９．２５ｄ。罩养于老枝上的成虫不能产卵,雌,雄成虫的平均寿命分别为７０．４４和７０．３１ｄ。在花（果）枝上     

座壳孢菌剂生产及其防治温室白粉虱的方法

我们初步探索了座壳孢 Aschersonia 的实验室生产条件及其防治温室白粉虱 Trialeurodes vaporariorum(Westwood)的应用方法。建立以玉米粉为主要培养基的生产流程,与通用的麦芽汁琼脂为培养材料相比,菌剂的材料成本降低95%,菌剂的寄生率显著提高。干菌剂、粉剂的体积小,便于密封、长期低温贮藏和运输等。而粉剂的制成,又使微生物农药商品化具备技术条件。     

温度对菜蛾绒茧蜂生长发育、存活和繁殖的影响

在１５－３５℃范围内的９个温度下测定了温度对菜蛾绒茧蜂Ｃｏｔｅｓｉａ ｐｌｕｔｅｌｌａｅ Ｋｕｒｄｊ．的个体发育,种群存活率和种群增长潜能的影响。卵－结茧,结茧羽化两阶段的发育速度与温度均呈直线关系,发育起点温度分别为１０．６和１１．８℃,有效积温常数分别为１０５．６和６２．０日度。     

温度、湿度对嗜虫书虱生长发育和繁殖的影响

嗜虫书虱以全麦粉及酵母粉作饲料时,其各期发育速率与温度呈逻辑斯蒂曲线关系,世代发育起点和有效积温分别为15.16℃,306.75日度。在20—35℃范围内,世代存活率、种群内禀增长率以及成虫产卵量较高,高低温区均呈下降趋势。理论上29.55℃时周限增长率(λ)最大,达1.0628倍/天。高湿有利于其生长发育和繁殖,湿度低于60％时,各虫态均不能发育存活。结果表明,嗜虫书虱生长发育、繁殖最适温区为28—30℃,最适相对湿度在80％左右。     

温度、湿度和光照对苹果炭疽叶枯病菌(Glomerella cingulata)产孢的影响

苹果炭疽叶枯病(Glomerella cingulata)是我国苹果上新发现的一种病害,为了了解病原菌的产孢条件和产孢动态,为病害的预测预报与防控提供依据。本研究在人工控制条件下,测试了温度、湿度和光照对苹果炭疽叶枯病菌产生分生孢子和子囊孢子的影响。结果表明,苹果炭疽叶枯病新形成的病叶润湿后,在15℃~30℃下保湿培养2~6 d后可产生大量橘黄色的分生孢子堆,其中30℃下产孢量最大,产孢速度最快,仅需2 d时间。炭疽叶枯病菌在新形成的病叶上于15℃~30℃下培养20~30 d可形成子囊孢子,最适温度为25℃,子囊孢子的形成需要高湿环境或叶片润湿。炭疽叶枯病菌的单孢分离菌株于15℃~25℃下,在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上培养20~30 d也可形成子囊孢子,最适产孢温度25℃。紫外光、黑光和日光都能促进子囊孢子的形成。     

水稻白叶枯病菌鸡卵黄抗体的制备及其初步应用

 通过免疫产蛋母鸡制备了针对水稻白叶枯病菌菌株ZJ-173的卵黄抗体(IgY),比较了一种中草药佐剂和福氏佐剂对抗体产生和效价的影响。结果表明:与福氏佐剂相比,中草药佐剂对免疫母鸡的生活力和产蛋影响较小,母鸡恢复产蛋较早(免疫后7天)。卵黄中抗体出现后,两种佐剂处理的抗体都能在抗体出现后15天达到较高效价,并维持较高效价达2个月以上。卵黄抗体经PEG方法提纯后可得到比较纯净的IgY。提纯的IgY蛋白含量平均为11.843mg/ml,双扩散效价为1:128~512。将卵黄抗体IgY作为包被抗体用于异动物抗体双夹心ELISA可有效地检测水稻病叶病种上的白叶枯病菌,其检测灵敏度为10⁴cfu/ml。