大肠杆菌O157显色培养基在饲料检测中的应用研究

为探讨大肠杆菌O157显色培养基在饲料微生物检测中的应用价值,试验利用免疫磁珠法和大肠杆菌O157显色培养基对60份饲料样品进行大肠杆菌O157分离鉴定,对疑似阳性的菌落提取基因组DNA,利用PCR扩增蜡样芽胞杆菌ofb基因进行测序验证。结果表明,饲料样本经过免疫磁珠法筛选后,亚碲酸钾山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂检出阳性的样本数为13例(21.67%);大肠杆菌O157显色培养基阳性样本为8例(13.33%);通过ofb基因测序验证CT-SMAC琼脂和显色培养基方法检测假阳性率分别为84.60%和75.00%。大肠杆菌O157显色培养基用于饲料中大肠杆菌O157的检测,能够有效抑制其他杂菌的生长,降低普通培养基检测的假阳性率,适合于饲料中大肠杆菌O157的检测。     

蜡样芽胞杆菌显色培养基在饲料检测中的应用研究

为探讨蜡样芽胞杆菌显色培养基在饲料微生物检测中的应用,利用普通培养基和蜡样芽胞杆菌显色培养基,对60份饲料样品中蜡样芽胞杆菌进行分离培养,疑似阳性的菌落提取基因组DNA,利用PCR扩增蜡样芽胞杆菌gyr B基因进行测序验证。结果表明,普通培养基和显色培养基检出的阳性样品分别为13例(21.7%)和10例(16.7%)。通过gyr B基因测序验证普通培养基和显色培养基检测方法的假阳性率分别为76.9%和70.0%。蜡样芽胞杆菌显色培养基用于饲料中蜡样芽胞杆菌的检测,能够有效抑制其他杂菌的生长,降低普通培养基检测的假阳性率,适用于饲料中蜡样芽胞杆菌的检测。     

显色培养基在金黄色葡萄球菌检测中的应用研究

探讨葡萄球菌显色培养基在饲料微生物检测中的应用。利用Baird-Parker琼脂培养基和显色培养基对120份饲料样品进行金黄色葡萄球菌检测,疑似阳性的菌落进行unc基因的PCR扩增与测序验证。结果表明,显色培养基检出假阳性率(58.82%)低于普通培养基(73.91%)。显色培养基用于饲料中金黄色葡萄球菌的检测,能够有效抑制其它杂菌的生长,降低普通培养基检测的假阳性率。     

科玛嘉显色培养基在检测饲料中沙门氏菌的应用评价

将随机抽检的95份饲料样本采用CAS显色培养基和常规实验室方法(GB/T13091-2002)进行沙门氏菌的分离培养和初步鉴定。经24h孵育后共有7份样本在CAS显色培养基上呈典型的紫色菌落,经氧化酶试验排除2份假阳性,其余5份阳性样本经用VITEKID32E进行生化鉴定和血清学试验确认,证实均为沙门氏菌属,CAS实际检出5份阳性,90份阴性,与常规法检测结果完全一致。     

饲料中志贺氏菌的PCR快速检测方法的建立

为建立饲料中快速检测志贺氏菌的有效方法,本研究根据志贺氏菌(Shigella)侵袭性质粒抗原H基因(invasion plasmid antigen H,ipaH)设计了一对引物,PCR扩增片段长度为386bp。通过对引物的特异性检测发现,4株志贺氏菌的PCR结果均为阳性,12株非志贺氏菌的检测结果均未扩增出特异性片段。PCR对志贺氏菌纯培养物的检测灵敏度达120cfu/ml,检测快速、便捷。该方法操作简单、检验周期短、特异性和灵敏度高,能够快速地实现对饲料中志贺氏菌的检测和监控。     

志贺氏菌检测和分群PCR方法的建立

为弥补目前志贺氏菌分子生物学检测方法的不足,根据志贺氏菌的invC、rfc、wbgZ和rfpB等基因,分别设计引物建立了鉴定志贺氏菌属、福氏志贺氏菌、宋内志贺菌和痢疾志贺氏菌的PCR方法。同时,以根据ompA基因设计的引物作为参照,通过特异性试验和人工接种试验等,对该方法进行验证。结果显示:17株志贺氏菌和19株非志贺氏菌均出现100%的特异性反应;对增菌肉汤直接进行PCR检测时,在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中的志贺氏菌检出限为1~3 cfu/(25 g·mL~(-1)),在原奶、生肉和奶粉中的检出限分别为≤12、27和≤27 cfu/(25 g·mL~(-1));分离培养后再对可疑菌落进行PCR鉴定时,所有样品检出限均为1~3 cfu/(25 g·mL~(-1)),与传统培养法检出限一致。结果表明,该PCR方法快速、敏感、特异,适合用于志贺氏菌的常规检测分析。     

变性高效液相色谱高通量检测动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌

应用复合PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,通过通用增菌培养,建立动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌的快速高通量检测方法.根据沙门氏菌和志贺氏菌特异基因序列分别设计特异性引物,复合PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测.以49株参考菌株做特异性试验,并开展了精密度检测试验.试验结果表明,该方法具有很好的特异性和精密度,经通用增菌和复合PCR-DHPLC技术可同时检测饲料中的沙门氏菌和志贺氏菌.该方法可以快速、准确、高通量检测,是动物源性饲料中致病菌高通量检测的新技术.     

菌糠在饲料中的应用研究

对食用菌废弃菌糠的资源量及其利用现状进行了分析,对其营养价值进行了归纳总结,对其消化率和饲用安全性等进行了阐述,简要概括了菌糠在畜禽日粮中的应用效果,并简单介绍了其加工调制方法及其在生产应用中需注意的问题和事项.     

志贺氏菌的生化特性及检测方法的研究进展

志贺氏菌属于革兰氏阴性杆菌,在自然界中分布较为广泛,其主要入侵人和动物肠道,具有高度传染性,对人类和动物健康造成严重的影响。本文通过对志贺氏菌的生化特性及检测方法的研究状况作一综述,为该菌在临床检测中提供理论依据及其所致疾病的防控奠定基础。     

志贺氏菌的耐药性研究及防治对策

志贺氏菌能感染雏鸡，主要引起雏鸡拉脓血样粪便，该菌耐药性在兽医领域报道较少，本试验通过药敏试验，试管二倍稀释法测定三代头孢抗生素诱导志贺氏菌后可产生多重耐药性。     

菌糠在饲料中的应用

用秸秆等培养食用菌，食用菌能在生长繁殖过程中，产生大量的胞内酶和胞外酶，分解秸秆培养料中的纤维素、半纤维素，使培养料（秸秆等）的内部结构发生质变，纤维素含量大大降低，可溶性碳水化合物和蛋白质含量显著增加，营养成分大幅度提高。据报道，这种用于培养食用菌后所得的菌糠，粗蛋白较接种前提高了31.0％─642.2％，粗纤维降低了52.3％─124.2％。1棉籽壳菌糠营养成分据浙江省饲料公司研究室测定，棉籽壳菌糠含粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、无氮浸出物、钙、磷分别为（％）：6.42、29.21、0.96、43.89、17.2、0.28，总能为14.83兆焦／…     

志贺氏菌检测和分群实时荧光PCR方法的建立

为对志贺氏菌属细菌进行快速、准确检测和分群鉴定,根据志贺氏菌invC、rfc、wbgZ和rfpB基因,分别设计引物和探针,建立了鉴定志贺氏菌属以及福氏志贺氏菌、宋内志贺氏菌和痢疾志贺菌氏菌实时荧光PCR方法,同时将根据ompA基因设计的引物和探针作为内参照,并通过特异性试验和人工接种试验等对该方法进行验证。结果显示,该方法对17株志贺氏菌和19株非志贺氏菌均出现100%的特异性;用增菌肉汤直接进行PCR检测,发现在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中的志贺氏菌检出限为1～3 cfu/25 g(mL),在原奶、生肉和奶粉中的检出限分别为≤8 cfu/25 mL、12 cfu/25 g和≤12 cfu/25 g;分离培养后再对可疑菌落进行实时荧光PCR鉴定,发现所有样品的检出限为1～3 cfu/25 g(mL),与传统培养法检出限一致。结果表明,该实时荧光PCR方法是一个快速、敏感、特异的检测方法,适合于志贺氏菌的常规检测分析。     

袋鼠源志贺氏菌的分离鉴定

志贺氏菌(Shigella),是一类革兰阴性、不活动、不产生孢子、无荚膜、无鞭毛、多数有菌毛的杆状细菌,可引起人和其他哺乳类动物的细菌性痢疾.根据其抗原构造的不同,可分为4个种,即称痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae)、福氏志贺氏菌(Sh.flexneri)、鲍氏志贺氏菌(Sh.boydii)、宋内氏志贺氏菌(Sh.sonnei).     

小肠结肠炎耶尔森氏菌的增菌培养基

小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y.ec)在实验动物中分布较广,经粪-口传播,有症状的感染可能干扰动物实验结果,因此,规定清洁级以上标准实验动物必须无此菌。     

西宁市售鲤鱼鳃中志贺氏菌的检测及血清学分型

志贺氏菌是最常见的肠杆菌科的病原菌,可引起人类肠道传染病。应用常规细菌分离法对西宁市售的80份鲤鱼鳃样品进行了志贺氏菌的检测,同时对阳性菌株进行了血清学分型。结果显示,在80份鲤鱼鳃样品中共检出志贺氏阳性6份,阳性率为7.5%(6/80)。通过形态学观察、生化试验和血清学鉴定为志贺氏菌A群2株,其血清型为痢疾志贺氏菌1型;B群4株,其血清型为福氏志贺氏菌1b型。此次检测为以后西宁地区志贺氏菌流行病学的调查和相关疾病的防治提供了理论依据。     

菌糠在兔饲料中的应用效果研究

本研究分冬季（全喂饲合饲料）和夏季（增喂一定量的青草）两次试验，每次试验选用比利时兔和日本大耳白兔各３６只，将菌糠以１０％和２０％的比例添加于饲料中，探讨了菌糠对兔的增重、产肉性能等的影响。结果表明，饲料中添加１０％的菌糠，在增重、料肉比、屠宰率和经济效益等方面与对照组无显著差异，添加２０％的菌糠有不良影响。同时还表明，比利时兔比大耳白兔能更好地利用菌糠，在冬季全喂配合饲料时能获得较好的饲养效果。