从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f，用其培养物人工感染80日龄健康绵羊，28d后剖杀，剖检可见肺表面肉粉色实变，显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列，设计一对扩增700bp片段的通用引物，直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序。将该序列与GenBank中33种支原体序列比较，结果证明该序列与绵羊肺炎支原体（M．ovipneumonia）标准株Y．98同源性为99．9％，而与山羊支原体山羊亚种（M．capricolum subsp．capricolum，Mcc）、丝状支原体山羊亚种（M．mycoides subsp．Capri，Mmc）、丝状支原体丝状亚种LC型（M．mycoides subsp．mycoides LC，M．mmLC）等同源率为81％。以感染羊血清和Y．98与从发病羊肺脏中分离出的三株支原体茵体蛋白进行Western blot，证明均与感染羊血清有特异性反应，且与Y．98相比无明显差异，故确定分离株为绵羊肺炎支原体（M．ovipneumonia）。     

绵羊肺炎支原体和丝状支原体双重PCR检测方法的建立

绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumonia)和丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.Capri,Mmc)是羊传染性胸膜肺炎(又称为羊支原体性肺炎)的常见病原.此外,山羊支原体山羊肺炎亚种和山羊支原体山羊亚种等支原体也可引起羊传染性胸膜肺炎.     

牛支原体双重PCR检测方法的建立

为鉴别牛支原体(Mycoplasma bovis)与丝状支原体丝状亚种SC(M.mycoides subsp.mycoides SC),本实验通过优化M.bovis特异性引物pMB81-1/pMB81-2s和MmmSC特异性引物SC1/SC2的退火温度,建立了鉴别M.bovis和MmmSC的双重PCR检测方法。该方法能够分别由M.bovis和MmmSC扩增得到528bp和270bp片段。敏感性试验结果显示该方法检测M.bovis和MmmSC培养物的最低浓度分别为106cfu/mL和105cfu/mL。特异性试验结果显示,该方法对无乳支原体代表株PG2、丝状支原体丝状亚种LC型代表株Y-goat、山羊支原体山羊肺炎亚种Mccp、绵羊支原体Y-98、猪鼻支原体BST-7、巴氏杆菌以及结核分枝杆菌扩增结果均为阴性。应用该方法对临床病料的检测结果与培养鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于临床检测。     

应用PCR方法快速检测绵羊肺炎支原体

有研究表明,在引起羊只发生羊支原体性肺炎的病原中,绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae ,MO)的Y98株和丝状支原体山羊亚种LC型( M. mycoides subsp.mycoides LC, MmmLC)的 Y-goat株是目前流行于我国一些地方的优势致病菌,两者均可引起绵羊和山羊的严重发病,而且常呈混合感染.同时还证明,这两种菌型缺乏共同抗原和免疫原.以往仅以流行特点、临床症状及病理变化对本病进行诊断,但两者所致的病例在这些方面都很相似,因此建立一种简便、快速、特异、灵敏的检测方法用于该病早期诊断和流行病学普查对于及早发现和控制该病具有重要意义.     

山羊地方性鼻内肿瘤病毒和支原体混合感染山羊的诊断

<正>2016年10月福州市一山羊养殖户的山羊发病,经临床症状、剖检病变及实验室检验,确诊为羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus,ENTV)、绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)和丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri,Mmc)混合感染引起的山羊呼吸     

山羊传染性胸膜肺炎的防治

正山羊传染性胸膜肺炎是由丝状支原体引起的高度接触性传染病。支原体是一类无细胞壁的细菌,细胞柔软,呈多形性,能通过细菌滤器,能在无细胞的人工培养基中生长繁殖,含有DNA和RNA,以二分裂或芽生方式繁殖。丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.capri)细胞呈多形性,可形成丝状,长10~30μm,是引起山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)的病原体。本病流行分布广,以发热、咳嗽、浆液性和纤维渗出性肺炎     

应用双重PCR方法检测羊支原体肺炎病原

通过对丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.capri,Mmc)特异性引物MmcF/MmcR和绵羊肺炎支原体(M.ovipneumontiae,Mo)特异性引物LmF/LmR退火温度、引物浓度比例等条件的选择,建立了一个可以同时检测Mmc和Mo的双重PCR方法。该方法可同时扩增出Mmc 195 bp和Mo 361 bp目的片段,但对其他病原菌不能扩增出任何条带,具有良好的特异性。敏感性试验表明,该方法能够分别检测出0.1ng的Mmc DNA和0.01 ng的Mo DNA,或同时检测出1ng Mmc和1ng Mo混合的DNA。用该双重PCR方法可对实验室保存的4株绵羊肺炎支原体和2株丝状支原体山羊亚种进行准确鉴定,并可从临床病料中检测出相应支原体,表明建立的双重PCR方法可用于Mmc和Mo的快速鉴定、实验室诊断和病原学调查。     

山羊传染性胸膜肺炎诊治

<正>1病原引起本病的病原主要有丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体丝状亚种和绵羊肺炎支原体。该类支原体均为细小的多形性微生物,革兰氏染色呈阴性,用姬姆萨氏法、卡斯坦奈达氏法或美蓝染色法着色良好。2流行病学自然条件下,丝状支原体山羊亚种只感染山羊,以感染3岁以下的山羊为多,绵羊肺炎     

贵州奶牛传染性胸膜肺炎的血清学调查

牛肺疫亦称牛传染性胸膜肺炎（contagious bovine pleuropneumonia,CBPP）,是由丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp．mycoides）SC型（牛致病性）所引起的对牛危害严重的一种接触性传染病。病程多呈亚急性或慢性经过,有时也呈急性经过。其主要侵害肺和胸膜,病理剖解的特征性变化为肺小叶淋巴结缔组织和肺泡组织发生浆液-纤维蛋白性胸膜炎和纤维蛋白性肺炎。     

羊传染性胸膜肺炎诊治

<正>1流行特点导致羊传染性胸膜肺炎的病原有丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体。病羊与耐过羊是引起传染性胸膜肺炎的主要传染源。该病是典型的接触性传染病,主要经过呼吸道传染。绵羊与山羊是易感动物。自然条件下,丝状支原体山羊亚种只感染山羊,以3年内的山羊最易感染,而绵羊肺炎支原体能感染山羊与绵羊。传染性胸膜肺炎无明显的季节性,一年四季均可发生,早春、秋末冬初时易大范围流行。     

丝状支原体山羊亚种LppA蛋白N末端基因真核表达载体构建及小鼠免疫效果分析

基于丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri,Mmc)贵州株的LppA蛋白N末端基因,构建真核重组表达质粒pVAX1-LppA,并对免疫效果进行分析,为防控羊支原体肺炎提供新思路.以构建的真核重组表达质粒pVAX1-LppA(50、100、150 μg)、pVAX1空载体、无菌...     

一例山羊肺炎的诊断报告

正山羊肺炎是广泛流行于山羊的疾病,主要支原体病原有绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊亚种、精氨酸支原体等,此外,细菌(如溶血曼氏杆菌、多杀巴氏杆菌、化脓隐秘杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌等)、寄生虫(肺丝虫等)均可引起山羊肺炎[1]。其中最为常见的是以绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种、细菌发生的单感染或混合感染为主,具有发病率和死亡率较高的特点,对养羊业的发展造成巨大的经济损失。1发病情况2019年8月,兴安县     

反刍兽支原体病

尾形学牛的支原体现在已由生长抑制试验(G.I)、补体结合反应(C.F)分成19个血清型,其中1个血清型尚未命名。此外,还从母牛的生殖器、公牛的精液、犊牛肺炎病灶分离出T—支原体。绵羊、山羊的支原体,已确认有4个菌种。 1.丝状支原体(M.mycoides subsp.mycoides) 本菌是牛肺疫的病原菌。支原体的研究历史是从本菌和本病开始的。牛肺疫是传播迅速的牛的呼吸器病,早在1713年在德国和瑞士,1935年在英国都曾有过本病的记载。到19世纪中叶从欧     

山羊支原体性肺炎研究进展

山羊支原体性肺炎(caprine mycoplasmal pneumonia,CMP)是由支原体(Mycoplasma)引起的山羊的一种接触性传染病,以高热、咳嗽、纤维素肺炎和胸膜炎为特征,发病率为22%～30%,有的高达60%～80%,死亡率为15%～30%.1873年Thomas首次报道了阿尔及利亚发生由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)引起的山羊支原体肺炎[1].     

山羊传染性胸膜肺炎病原分离与鉴定

本试验从传染性胸膜肺炎的山羊体内分离获得两株支原体Y1和Y2，通过病原分离、形态学观察、生化试验、HA、生长抑制试验和代谢抑制试验等试验，证实Y1和Y2的形态与培养特性、生化反应特性和血清学特性分别与模式株丝状支原体山羊亚种PG3和绵羊支原体Y98相接近；动物回归试验成功复制出山羊传染性胸膜肺炎的典型临床症状和病理剖解变化。结果表明Y1和Y2分别为丝状支原体山羊亚种和绵羊支原体。     

一例羊支原体肺炎感染的诊治

正羊支原体肺炎是羊易感的细菌性接触性传染病,病原有两种,丝状支原体山羊亚种和绵羊支原体。丝状支原体山羊亚种主要感染山羊,而绵羊支原体可以感染绵羊和山羊。在自然条件下,本病主要通过飞沫传播,经呼吸道感染,发病后死亡率较高。本病有一周左右的潜伏期,羊营养不良及饲养环境差可以成为发病的诱因。2018年11月,师宗县葵山镇养殖户饲养的山羊感染绵羊支原     

山羊传染性胸膜肺炎的诊断与防治

山羊传染性胸膜肺炎是由山羊丝状支原体（Mycoplasma mycoides capri）引发山羊特有的高度接触性传染病。从病原特点、症状识别、病理变化、诊断技术等方面对该病进行了总结，并提出了相应的防治措施，以期为防控山羊传染性胸膜肺炎提供参考。     

山羊支原体肺炎亚种Hsp70基因克隆与序列分析

山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(M.capricolum subsp.Capripneumoniae,Mccp)引起的高度接触性传染病,热休克蛋白Hsp70,在Mccp所有蛋白翻译后功能和结构的表达起作用。以Mccp中国分离株87001为模板,扩增了Hsp70的全序列,将该序列克隆到pMD18T载体上并测序。将序列与其它已知动物支原体的Hsp70序列进行分析比较。测序结果87001株Hsp70基因全长1773bp,编码591个aa,第631～633位TGA在支原体编码色氨酸而不是作为终止密码子。将该序列与多种致病支原体Hsp70基因进行分析比较,发现87001株Hsp70基因与山羊支原体山羊亚种(Mcc)、丝状支原体丝状亚种SC的DNA同源性为99.3%～99.4%,氨基酸同源性为99.2%～99.3%,而与非同种支原体猪肺炎支原体232株等Mhp菌株的DNA和氨基酸同源性仅为64.5%～74.4%和59.3%～77%。这表明DnaK基因在种内高度保守,种间差异较大。原核表达得到大小为41Kd的目的蛋白,经Westernblot证实,纯化蛋白可与Mhp阳性猪血清反应,具有免疫活性。     

山羊传染性胸膜肺炎分子诊断方法的研究进展

山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,MCCP)引起的山羊急性或慢性呼吸道传染病,其病原MCCP的分离培养困难,同丝状支原体簇其他成员之间具有相似的生化和血清学性质,因此用传统的病原学和血清学方法无法对其进行准确鉴定。而基于PCR的分子检测技术,凭借其特异性高和敏感性强等诸多优点已被广泛应用于疾病的早期临床诊断。本文综述了CCPP的分子诊断方法,以期为该病的防治提供技术参考。     

广西山羊传染性胸膜肺炎病原的二重PCR快速诊断方法的建立

根据绵羊肺炎支原体标准株Y98和丝状支原体山羊亚种标准株PG3的16S rRNA两端的保守区序列设计了2对引物,建立了广西山羊传染性胸膜肺炎病原的二重PCR快速检测方法.试验结果显示,所建立的二重PCR能特异地扩增绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种的基因片段,其敏感性可达lPg,,用建立的二重PCR检测了20份临床病例肺组织,检出率为70%(14/20),其中6份扩增出丝状支原体山羊亚种的基因片段,10份扩增出绵羊肺炎支原体的基因片段,有2份同时扩增出两种支原体的基因片段.培养法检出率为40%(8/20),而这8份病料均为PCR阳性.