杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

平陆百合愈伤组织诱导的正交试验研究

[目的]筛选平陆百合愈伤组织诱导的最佳培养基配方。[方法]以平陆百合的鳞片作为外植体,分别在光照和黑暗培养条件下,利用正交试验设计法研究了不同浓度2,4-D、NAA、KT组合对平陆百合愈伤组织诱导效果的影响。[结果]光照培养条件下,百合愈伤组织的适宜诱导培养基配方为MS+2,4-D 1mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1)+KT0.5mg·L~(-1),诱导率为57.143%,各因子影响程度依次为NAAKT2,4-D;黑暗培养条件下,百合愈伤组织的适宜诱导培养基配方为MS+2,4-D 5mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)+KT 0.2mg·L~(-1),诱导率为50%,各因子影响程度依次为KTNAA2,4-D。[结论]平陆百合愈伤组织诱导的最佳培养基配方为:MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1),培养条件为光照。     

谷子种子愈伤组织的诱导与植株再生

[目的]研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子种子愈伤组织诱导及植株再生的影响,旨在筛选最佳的愈伤组织诱导和分化的激素配比,建立稳定高效的谷子种子再生体系。[方法]以晋谷21号谷子的成熟种子为外植体,研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子愈伤组织诱导及植株再生的影响。[结果]愈伤组织的诱导以MS培养基中附加2,4-D的效果要优于NAA,同时加入适合浓度的6-BA与之配比可以提高愈伤组织的质量,以MS培养基中附加2,4-D 2.0 mg·L~(-1)、6-BA 0.2 mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率最高,达92.86%; 6-BA诱导愈伤组织分化的效果优于ZT,培养基中附加6-BA 1.0 mg·L~(-1)时,愈伤分化率最高,为13.33%;将谷子分化苗转接于MS培养基上可诱导生根。[结论]诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA。     

朝鲜淫羊藿愈伤组织诱导及分化

以朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)幼叶叶尖(称叶尖)和嫩叶柄分枝点(称分枝点)为外植体,研究外植体灭菌时间;采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨1/2MS、MS、WPM 3种培养基和质量浓度不同的2,4-D、6-BA、NAA对愈伤组织诱导的影响,目的是筛选叶尖和分枝点诱导愈伤组织最佳培养基;同时进行叶尖愈伤组织分化条件及不同质量浓度KT对不定芽增殖效果的研究。结果表明:叶尖和分枝点灭菌时间均为6 min,存活率分别为71.67%和73.33%,诱导叶尖愈伤组织最佳培养基为1/2MS+2,4-D2.0 mg·L~(-1)+6-BA0.4 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),诱导率为48.33%,分枝点最佳培养基为MS+2,4-D3.0 mg·L~(-1)+6-BA0.2 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),诱导率为31.67%;叶尖愈伤组织在(4±0.5)℃低温处理180 d后能够分化,分化率为54.4%;KT质量浓度为1 mg·L~(-1)时增殖效果最好,增殖系数为2.35。     

铁皮石斛愈伤组织稳定培养体系的建立

为了建立稳定的铁皮石斛愈伤组织培养体系,试验开展了铁皮石斛愈伤组织最佳外植体类型、诱导培养基配方以及继代培养基配方的筛选等研究。结果表明,采用铁皮石斛茎段为外植体,愈伤组织诱导效果最好;初步诱导出的愈伤组织在MS+2 mg·L~(-1)KT+2 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1)NAA的培养基上能够诱导生长速度快、质地硬、结构松散的理想愈伤组织;经过筛选的愈伤组织在MS+0.5 mg·L~(-1) KT+1 mg·L~(-1) 2,4-D的培养基上进行继代培养,愈伤组织可以长时间保持理想状态。     

杉木愈伤组织的继代增殖与植株再生

通过建立杉木愈伤组织增殖和植株再生体系,旨在为杉木体细胞杂交和遗传转化等基因工程研究提供高效受体系统。以杉木子叶、下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合及浓度、培养条件对愈伤组织的继代及植株再生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对愈伤组织的继代有显著影响,2,4-D有利于降低继代过程中的褐化现象,NAA、KT有利于愈伤组织的继代增殖。DCR+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)和DCR+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+KT1.5 mg·L~(-1)+NAA 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织继代增殖的最佳培养基。暗培养和800 lx光照强度是愈伤组织继代的最佳培养条件。愈伤组织在继代30~45 d期间内需转移至新培养基。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)再生芽诱导率最高,诱导率为80%。经过一次继代的愈伤组织比未经过继代的单个再生芽数多,平均可达3~4个。再生苗在1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)培养基中生根率高达89.5%。     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

马铃薯松散型胚性愈伤组织的诱导

为了建立马铃薯松散型胚性愈伤组织体系,用于脱毒繁殖和诱变育种,试验采用马铃薯块茎为外植体,在含有不同浓度2,4-D,BA和MS的培养基上进行松软型、松散型和胚性愈伤组织的诱导。结果显示,在1/4 MS+1.0 mg·L~(-1) 2,4-D+15 g·L~(-1)蔗糖的培养基上可以诱导出松软型马铃薯愈伤组织;在MS+0.5 mg·L~(-1) BA+0.25 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,继代3~5次,即可获得松散型愈伤组织;在MS+1.0 mg·L~(-1) BA+1.0 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,继代5~8次,即可获得松散型胚性愈伤组织。而且上述类型的愈伤组织生长迅速,结构特点突出。     

花椰菜松散型胚性愈伤组织的诱导

本研究采用花椰菜组培苗不同外植体诱导愈伤组织,从中筛选出理想外植体类型;将诱导出的愈伤组织转移到不同培养基上进行松散型愈伤组织的诱导,从中筛选出理想的培养基配方;将诱导出的花椰菜松散型愈伤组织转接到不同的胚性愈伤组织诱导培养基上,找到理想的培养基配方。试验结果表明,选用花椰菜组培苗茎段为外植体,在MS+0.5 mg·L~(-1)BA+1.0 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上进行愈伤组织诱导,可以获得松散型愈伤组织;在MS+1 mg·L~(-1)BA+1 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上通过3～4次继代培养,可以诱导出花椰菜松散型胚性愈伤组织。     

花椒愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

以花椒试管苗叶片为试验材料,研究了不同激素浓度对花椒愈伤组织继代培养的影响,并以多次继代得到的疏松、活性高的愈伤组织建立花椒细胞悬浮系。结果表明:花椒愈伤组织最适继代培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂6g·L~(-1);花椒细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+葡萄糖30g·L~(-1),接种量0.05g·mL~(-1),摇床转速110r·min~(-1),25℃暗培养,该条件下悬浮细胞生长良好,最大生长量为4.52g;花椒悬浮细胞生长呈"S"型曲线,最适继代周期为16d。     

东方百合Tiger Woods离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Tiger Woods的组培快繁技术,以其花器官为外植体获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片和叶片为次级外植体诱导不定芽形成,通过扩繁、生根获得完整植株,炼苗后移栽。结果表明:花梗与花丝诱导能力较强,其最适诱导培养基分别为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)与MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)。无菌苗鳞片、叶片直接诱导产生不定芽的最适培养基为MS+TDZ 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)与MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1),诱导率为100%和93.33%,诱导系数为4.48和2.88;而上述两种外植体间接诱导愈伤组织的最适培养基为MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+TDZ 0.5mg·L~(-1)与MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),愈伤诱导率为93.33%和96.67%,分化系数为4.53和3.63。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖75g·L~(-1),生根最佳培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1),移栽最佳基质为草炭:蛭石:珍珠岩=1∶1∶1,成活率达91.11%。     

不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响

为筛选出适宜百合鳞片愈伤组织诱导的最佳激素配比,以给百合大规模的培养与繁殖创造有利的条件,以百合鳞片作为外植体,利用正交试验设计,研究不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响。结果表明:以MS为基本培养基,2,4-D浓度,6-BA浓度,NAA浓度3个因素对愈伤组织诱导率的影响表现为6-BANAA2,4-D。最优的激素配比组合为A2B1C3,即2,4-D 0.6 mg·L-1,6-BA 0.3 mg·L-1,NAA0.9mg·L-1,其愈伤组织诱导率为91.21%。     

‘闽牧6号’狼尾草组织培养再生体系的建立

为建立杂交狼尾草高效再生体系,以‘闽牧6号’狼尾草为材料,研究外植体、培养基、植物激素等对‘闽牧6号’狼尾草愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果表明:选择侧芽作为适宜外植体;诱导培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1)),诱导率最高,为89.9%;继代培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1))+KT(1mg·L~(-1)),愈伤组织形态最好;分化培养基采用NB+KT(1mg·L~(-1))+6-BA(2mg·L~(-1))+NAA(0.5mg·L~(-1)),分化率最高,为75%;生根培养基采用1/2MS培养基,形成了较为完善的组织培养再生体系。     

大蒜鳞茎诱导技术研究

植物激素对大蒜鳞茎愈伤组织再生的各个环节中都发挥重要的作用.实验结果表明:2,4-D对鳞茎愈伤组织诱导具有主要作用,2,4-D有利于大蒜愈伤组织的诱导.MS 2,4-132 mg·l-1 BA0.5mg·1-1培养基适宜大蒜鳞茎愈伤组织的诱导MS 6-BA3.01mg·1-1 NAA0.05mg·1-1培养基适宜不定芽的分化.     

枝干番杏组织培养技术

以枝干番杏的带叶茎段为外植体,比较不同灭菌方法的灭菌效果,及不同激素浓度对丛生芽诱导及生根的影响。结果表明:本研究中枝干番杏组织培养不经过愈伤组织阶段,芽诱导最适宜的培养基为MS+6-BA 8.325 mg·L~(-1)+NAA 16.65 mg·L~(-1)。芽丛生继代最适培养基为MS+6-BA 2.4 mg·L~(-1)+NAA 9.6 mg·L~(-1),根诱导最适培养基为1/2 MS+6-BA 1.2 mg·L~(-1)+NAA 4.8 mg·L~(-1)。枝干番杏的离体快繁体系有望用在番杏科其他植物的组培中。     

彩叶凤梨愈伤组织诱导及不定芽分化的研究

以实验室现有彩叶凤梨为材料,探讨激素对其愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。取彩叶凤梨无菌苗上生长的短缩茎(侧芽)接种于不同激素配比的MS培养基中诱导产生愈伤组织,然后将愈伤组织切块接种到不同的分化培养基上,诱导器官分化,统计出芽率,观察芽生长状态。试验结果为,诱导彩叶凤梨愈伤组织产生的适宜培养基为MS+2,4-D 4 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1),出愈率可达83.6%。愈伤块大、质地致密,有芽点;愈伤组织芽分化培养优先选择MS+6-BA 4 mg·L~(-1)+NAA 0.4 mg·L~(-1)培养基,分化率可达96.7%,出芽速度较快,出芽数较多,长势良好。试验表明,NAA能促进彩叶凤梨愈伤组织诱导及不定芽分化;高浓度2,4-D可以促进彩叶凤梨愈伤组织的生成,而高浓度的6-BA可以促进愈伤组织分化不定芽。     

结缕草成熟胚愈伤组织的诱导及再生体系的研究

以结缕草的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。结果表明在MS+2,4-D(2.0mg/L)+VB1(4mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为43.20%,但愈伤组织质量较差。将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA,ABA的继代培养基中继代培养,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(2.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)中,分化率45.6%。本研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体结缕草组织培养再生体系。     

东北刺人参愈伤组织诱导和继代的研究

[目的]研究东北刺人参愈伤组织的诱导和继代方法。[方法]以取自长白山的刺人参植株为材料,研究不同外植体、培养基、激素对刺人参愈伤组织诱导的影响。[结果]叶片为刺人参组织培养的最适宜外植体;5月为外植体的最佳取材时期;以MS为基本培养基,并添加1.0 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L 6-BA的培养基中愈伤组织诱导率最高;最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L。[结论]东北刺人参的最适愈伤诱导培养基和继代培养基分别是:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。     

西瓜愈伤组织诱导研究

为促进西瓜离体快繁和工厂化育苗,以西瓜无菌苗为试验材料,研究影响西瓜愈伤组织形成的条件因素。结果表明:在25℃暗培养条件下,西瓜子叶节最适合进行愈伤组织诱导培养,西瓜子叶节外植体愈伤组织诱导率最高,为87.55%。7d龄期西瓜无菌苗子叶节诱导出的愈伤组织,诱导率最高,达到89.62%,状态良好。西瓜子叶节诱导愈伤组织适宜激素浓度配比为2.0mg·L~(-1) 2,4-D+1.0mg·L~(-1) 6-BA。因此,西瓜愈伤组织形成的最佳条件为选用7d龄期西瓜无菌苗子叶节为外植体,在MS+2.0mg·L~(-1) 2,4-D+1.0mg·L~(-1)6-BA的培养基上进行诱导。     

冰灯玉露松散型胚性愈伤组织的诱导方法

为了获得冰灯玉露松散型胚性愈伤组织,采用冰灯玉露组培苗叶片为外植体,在含有不同激素的培养基上,通过不同的继代培养,从中找到诱导出松散型胚性愈伤组织的最适条件。结果显示,在1/2 MS+2 mg·L~(-1) 2,4-D+20 g·L~(-1)蔗糖的培养基上可以诱导出松软的愈伤组织。再将这些松软的愈伤组织转接到MS+1 mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,经过3~5次继代培养,继代培养时选择质地较硬、结构松散的愈伤组织进行转移,最终获得结构松散的愈伤组织。再将这些松散型愈伤组织在MS+2 mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上继续培养,经过2~3次继代培养即可获得冰灯玉露松散型胚性愈伤组织。该试验结果可为冰灯玉露离体诱变育种及其相关的科学研究提供良好的试材。