一株致病性奇异变形杆菌的分离与鉴定

从江苏某猪场病猪中分离到一株病原菌,通过纯化、生化鉴定以及16SrDNA序列分析技术鉴定,结果表明,该分离株是奇异变形杆菌。奇异变形杆菌病已成为危害我国养猪业的一种新的细菌性传染病,并且还可引起人类的原发性或继发性感染,造成人类食物中毒,其作为人畜共患传染病病原,应引起高度重视。     

一株猪源奇异变形杆菌的分离鉴定

试验通过对阿克苏某生猪养殖场腹泻仔猪肛拭子进行病原分离,并成功分离到一株细菌。细菌纯化后通过革兰氏染色观察其形态结构,并提取其DNA测序。分离菌株得到的基因序列标记为W1,通过DNA star生物软件将菌株W1与国内外菌株进行基因序列对比,并做同源性和进化树分析。结果表明:W1与国内外15株奇异变形杆菌的同源性为96.4%~99.4%,其中与W1同源性最低的是KT216564,与W1同源性最高的是AB272366。遗传进化树分析表明,分离株W1与南京株JF775415处于同一分支,属于奇异变形杆菌,该菌株的成功分离为阿克苏地区对奇异变形杆菌的研究提供参考。     

3株鸽源奇异变形杆菌的分离与鉴定

对从江苏省某鸽场病死鸽脏器中分离的细菌进行分离鉴定。通过细菌培养、革兰染色镜检及生化特性测定等对分离株进行初步鉴定;扩增分离株的16S rDNA片段并测序,Blast搜索比对确定细菌的种属;通过动物致病性试验和药敏试验来检测分离株的致病力及耐药性。结果:3株细菌的16S rDNA序列测定和Blast分析表明与奇异变形杆菌参考株的同源性达99.4%～99.8%,确定为奇异变形杆菌;致病性试验显示奇异变形杆菌对鸽子和小鼠均有致病力;药敏试验表明奇异变形杆菌对头孢菌素类抗生素和氟苯尼考敏感,对青霉素类和磺胺类抗生素等有耐药性。结果表明,从鸽子脏器中所分离的细菌为奇异变形杆菌,具有较强的致病力和多重耐药性。     

1株樱桃谷鸭奇异变形杆菌的分离与鉴定

为研究鸭源奇异变形杆菌的耐药性和毒力因子,本试验在大体剖检检有心肌和肝脏出血,胸腔有少量积液,关节剖开后有少量积液的病鸭肝脏和出血部位中,用血平板培养分离病原菌。经纯化和革兰氏染色后,分离菌在显微镜下呈长、短杆状,革兰氏染色呈阴性;生物化学反应表明分离菌具有明显的运动特性,M-R试验、V-P试验结果呈阳性,与特异变形杆菌的生物化学特征一致;分离菌16srDNA进化树结果表明,分离菌属奇异变形杆菌;药敏试验结果表明,分离菌对多种药物有耐药性,耐药率达75%;PCR检测ureC、ucaA、zapA、atfA、mrpA、pmfA、atfC毒力基因,除ucaA外其他6种毒力基因均被检出。以上结果表明,奇异变形杆菌是引起雏鸭发病的重要病原体,应引起高度的重视。     

一株驴源奇异变形杆菌的分离鉴定与毒力基因检测

为探明山东聊城地区某驴场驴驹腹泻并死亡的原因,试验采集死亡驴驹的肝脏、脾脏、肾脏等组织病料,采用RT-PCR方法检测病料中的马轮状病毒和马冠状病毒病原,并对病料中的细菌进行分离纯化,通过革兰氏染色、形态特征观察、生化鉴定和16S rDNA基因序列分析对分离菌进行鉴定,并进行药敏试验、毒力基因检测及小鼠致病性试验。结果表明：病料中马轮状病毒、马冠状病毒检测均为阴性,从肝脏组织中分离出一株细菌,该菌在SS琼脂培养基、LB琼脂培养基、血琼脂培养基、MAC琼脂培养基上均能生长,经镜检确定为短杆状或球杆状的革兰氏阴性小杆菌,生化特性与奇异变形杆菌相符。该菌16S rDNA基因序列与GenBank中的10株奇异变形杆菌的核苷酸相似性在99.87%～100%之间,进一步确定该菌为奇异变形杆菌,命名为LC1株(GenBank登录号为ON018729)。LC1株对氨苄西林、诺氟沙星、氧氟沙星、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢噻肟、氨曲南、左氧氟沙星、丁胺卡那、大观霉素、庆大霉素、环丙沙星敏感,对红霉素、克林霉素、亚胺培南、多西环素和多黏菌素B耐药,对头孢氨苄中介。在LC1株中共检测到9种毒力基因,分别为MrpA...     

水貂奇异变形杆菌的分离与鉴定

2005年7月,辽宁省某水貂养殖场出现了以零星散发、高死亡率和多种内脏器官出现出血性败血症为主要流行病学特点的病例。从病死水貂内脏中分离出1株细菌,经染色、镜检和生化试验鉴定为奇异变形杆菌。应用药敏试验筛选出了高度敏感的抗菌药,控制了该病的继续发生。     

一株藏猪源奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验

本研究从某藏猪场发病仔猪病料中分离细菌,对分离菌进行形态学、染色特性、生化特性鉴定,并分析16S rDNA基因同源性,同时进行了药敏试验。分离鉴定结果得出：分离菌呈多形性,多为革兰氏阴性短杆菌,少数为长杆状,在SS培养基上形成中心黑色、边缘白色的单菌落;生化反应对鸟氨酸脱羧酶、尿素酶、葡萄糖、柠檬酸盐、山梨醇、硫化氢等呈阳性反应;分离株16S rDNA基因的PCR扩增目的条带约为1 410 bp,在GenBank上进行同源性比对,与奇异变形杆菌的相似度为99%。从形态学、生化特性和16S rDNA序列分析结果鉴定出所分离的菌株为奇异变形杆菌。药敏试验结果显示：菌株的耐药性很强,只对头孢他啶、氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考、左氧氟沙星、麦迪霉素等敏感。     

一株与奶牛关节脓肿相关的致病性奇异变形杆菌的分离与鉴定

为查明甘肃省某奶牛场奶牛关节脓肿的病因和选择治疗用敏感药物,采用细菌分离培养、革兰染色镜检和16 S rDNA测序分析对采集的奶牛关节脓液进行细菌分离鉴定,通过小鼠致病性试验和药敏试验检测其致病性和耐药性.结果表明,分离的细菌为奇异变形杆菌;该菌对小鼠有较强的致病性,对头孢类抗生素和氟苯尼考中度敏感,对青霉素、阿莫西林、庆大霉素、卡那霉素、四环素、氟哌酸、复方新诺明严重耐药,抑菌圈直径均为0.表明从奶牛关节脓肿的脓液中分离的奇异变形杆菌有较强的致病力和多重耐药性.     

一株松鼠猴假结核耶尔森菌的分离与鉴定

2014年12月22日,扬州动物园内的1只松鼠猴突然发生死亡。解剖该松鼠猴可见其肺脏、肾脏、脾脏及肠道上呈现白色圆形、干酪样、大小不等的坏死病灶。无菌采集肝脏和脾脏后,在麦康凯琼脂板、血清琼脂板和鲜血琼脂板上进行细菌的分离鉴定。纯培养后,鲜血琼脂板上可见干燥的灰黄色的菌落。经生化试验和16S rDNA试验鉴定为假结核耶尔森菌:致病性试验的结果也表明该菌为该松鼠猴的致病菌。药敏试验结果表明该菌对羧苄青霉素和头孢噻肟比较敏感。     

一株仔猪源腹泻奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验

正奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)是一种革兰氏阴性菌,无荚膜、芽孢,有鞭毛,同时又是重要的人畜共患条件性致病菌,广泛存在于人和动物的体表、黏膜及消化道上,主要引起机体出现高热、腹泻、呕吐等症状,严重者导致死亡,对畜禽养殖危害极大~([1-3])。1976年首次从死亡鸡胚中分离到了变形杆菌,接着     

1株鸭源奇异变形杆菌的分离鉴定与毒力基因检测

试验旨在研究鸭源分离菌的耐药性及致病性,通过细菌分离鉴定、药敏试验、耐药基因和毒力基因PCR检测及动物致病性试验,成功分离到1株细菌,经纯化和革兰氏染色,显微镜下显示两种形态：短杆状以及细长如发丝,革兰氏染色为阴性菌,将其命名为GZGY2020。生化反应显示,分离菌具有明显的运动性,M-R试验、V-P试验均为阳性,生化特性符合奇异变形杆菌。分离菌16S rDNA进化树结果显示,其与奇异变形杆菌处于同一分支。药敏试验结果发现,分离菌对多种药物耐药,对18种药敏纸片中羧苄西林、头孢氨苄、苯唑西林等16种药物耐药,耐药率高达88.9%,仅对头孢他啶和环丙沙星敏感;PCR检测其含有磺胺类耐药基因基因sul1和sul2及β-内酰胺类耐药基因VIM,并含有hpmA、rsmA、atfA、ucaA、ureC、zapA、pmfA、fliL和mrpA 9种毒力基因。动物回归试验结果显示,分离菌对雏鸭致病力强,即1×10⁸ CFU/mL菌液能使雏鸭1 d内全部死亡。在药敏特性上,从病死鸭中分离到的菌株GZGY2020与以往报道的奇异变形杆菌有一定差异,表明该菌可能发生变异,导致毒力增强,而检测的10种毒力基因中仅有1种毒力基因没有出现相应的条带,表明奇异变形杆菌是引起该鸭死亡的重要致病菌,应引起高度重视。     

1株竹鼠奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏分析

为确定广东某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,本研究从发病竹鼠血液和组织中分离到可疑细菌,并对分离的菌株进行革兰氏染色、生化特性分析和16S rRNA基因鉴定及序列分析,同时进行药敏试验.结果显示:分离的细菌为杆状、球状和球杆状形状不一的革兰氏阴性菌;生化特性与奇异变形杆菌基本一致;16S rRNA序列与NCBI数据库中奇...     

病猪中奇异变形杆菌的分离鉴定

国外学者陆续发现了变形杆菌能感染多种动物,在国内,叶树株(1991)首次报道了变形杆菌可引起猪发病。我们从5月龄病死猪的脏器中分离出两株奇异变形杆菌,并对其形态特征、培养特性、生化特性及致病性等方面进行了较详细的观察。现将试验结果报告如下。     

一起奇异变形杆菌引发松鼠猴群发病的诊治

我园一群松鼠猴在进行转场后陆续出现食欲不振、拉绿色稀便,连续有3只幼松鼠猴死亡,后经化验室采样诊断,结合临床发病症状、疾病流行病学调查,确定为大肠杆菌属的奇异变形杆菌感染,采用高敏抗生素给予口服或肌注治疗,松鼠猴群病情得到了稳定控制。     

1株鸡源奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验

[目的] 阐明青海省大通县某鸡场病鸡发病原因,为奇异变形杆菌病防控提供参考。[方法] 无菌采集病鸡肝脏、脾脏和泄殖腔拭子等样品,接种普通琼脂和SS琼脂平板进行细菌分离纯化培养,挑取平板上生长的疑似菌落进行革兰染色镜检,再将分离的菌落接种生化鉴定管进行生化鉴定,同时通过PCR扩增16S rDNA和tuf特异性基因并测序。将分离菌接种雏鸡进行致病性试验,采用K-B法评价分离菌对27种抗菌药物的敏感性。[结果] 分离菌为短杆、长杆状多形性杆菌,生化特性与奇异变形杆菌相符。PCR成功扩增出1 400 bp的16S rDNA,序列比对显示与奇异变形杆菌同源性最高,为99.9%。雏鸡致病性试验结果表明,该株奇异变形杆菌对雏鸡有致病性。药敏试验结果显示,该菌株对哌拉西林、头孢吡肟和头孢噻肟等高度敏感,对环丙沙星、奥格门汀中度敏感,对氨苄西林、阿莫西林和头孢唑啉有耐药性,提示该菌对头孢类药物高度敏感。[结论] 分离到的一株奇异变形杆菌对鸡具有较强的致病性,且对多种药物表现出耐药性。     

AA肉仔鸡奇异变形杆菌的分离与鉴定

ＡＡ肉仔鸡奇异变形杆菌的分离与鉴定朱瑞良，牛钟相，张绍学，唐珂心（山东农大动物科技学院，泰安２７１０１８）１９９３年下半年，山东某ＡＡ肉种鸡场孵化出的肉仔鸡投放到养鸡户之后，在３～２８日龄陆续发病、死亡，发病率７０～９５％，死亡率２０～３０％，经病原...     

貂奇异变形杆菌的分离及其生物学鉴定

为分离貂奇异变形杆菌(P.mirabilis)并鉴定其生物学特性,本研究从临床病死貂的肝脏样品中分离出一株细菌,通过生物学特性检验及16S rRNA基因比对对该分离株进行鉴定.其中,应用PCR方法扩增出1504 bp的16S rRNA基因片段.经BLAST比对分析表明,与其同源性最高的均为P.mirabilis各株系的16S rRNA序列,同源性均高达98％以上.通过系统进化树分析表明,该分离菌株与10株参考菌的同源性为98.9 ％～99.9％,其中与HQ259932同源性最高(99.9％),检验结果表明,该分离菌为貂P.mirabilis.以0.2 mL/只(3.2×109 cfu/mL)菌液的剂量接种小白鼠,其发病率为100％,死亡率为60％,表明分离菌具有较强致病性.免疫保护性实验表明分离菌具有良好的免疫原性.此外,该分离菌株对头孢哌酮钠、卡那霉素、链霉素和阿米卡星敏感,对氧氟沙星、红霉素、恩诺沙星和阿莫西林等药物具有一定的耐药性.     

1株番鸭源奇异变形杆菌的分离鉴定及其毒力基因分析

为查清引起滁州地区某养殖场雏番鸭死亡原因,本研究通过对分离细菌的鉴定和动物致病性试验,确定奇异变形杆菌是引起此次雏番鸭发病的病原体,并将分离的奇异变形杆菌命名为AHcz-1株.根据其16S rRNA基因序列,建立其遗传进化树;根据已报道的8个毒力基因ureC、zapA、mrpA、ucaA、rsbA、pmfA、atfA、atfC序列,设计引物进行PCR扩增,并对毒力基因进行序列分析.结果显示:AHcz-1株与日本株(AB932526.1)亲缘关系最近,同源性高达100%;毒力基因pmfA、atfA、ureC均未发生变异;AHcz-1株具有较强的致病性;致病菌对丁胺卡那高度敏感,对庆大霉素、恩诺沙星中度敏感,对其它17种抗生素不敏感,表明AHcz-1株具有多重耐药性.本研究为番鸭源奇异变形杆菌临床诊断、临床用药及遗传变异研究奠定了基础.     

猪源奇异变形杆菌的分离鉴定与耐药性分析

为了对河南省某猪场疑似细菌感染病例进行确诊,本试验采集了病猪肠道中的样品从中分离到1株革兰阴性短杆菌,进行了培养特性观察、生化试验、药敏试验以及16S rRNA基因序列分析。结果显示,分离菌的生化特性、培养特性基本符合奇异变形杆菌的特征,16S rRNA基因序列与奇异变形杆菌的同源性在98%以上,将该分离菌株命名为ZB17;序列分析表明,该分离菌株与猪源奇异变形杆菌(HQ259935.1和KR133627.1)的同源性最高,与大肠杆菌、沙门菌,克雷伯菌的同源性相对较低;分离株具有较强的致病性和多重耐药性,对复达欣、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星敏感;但对氨苄西林、美洛西林、先锋霉素IV、先锋霉素V、先锋霉素VI、卡那霉素、新霉素、四环素、强力霉素耐药。本试验为猪源奇异变形杆菌的分离、鉴定及治疗提供了参考。     

鸡传染性眼炎致病性奇异变形杆菌的分离与鉴定

从江苏、安徽、山东等地６７例患鸡传染性眼炎病例中分离到１３株细菌分离物。经培养特性，形态学观察，生化试验鉴定，１３株细菌分离物均属于奇异变形杆菌，该细菌在浸润的营养琼脂表面呈迁徒生长，在鲜血琼脂上不溶血，在麦康凯琼脂生长良好，形成单个菌落，人工感染ＳＰＦ雏鸡可导致发病死亡，并且能从肝脏和上呼吸道到相应的细菌，表明分离的奇异变形杆菌具有一定的致病力，它在鸡传染性眼炎中是不可忽视的病原菌之一。