二花脸猪和大白猪睾丸IGF-Ⅰ和IGF-IR基因表达发育变化的研究

为了研究生长轴激素对猪繁殖性能发育的影响,随机选取0、3、20、30、90、120、180日龄纯种二花脸公猪和大白公猪各4头,屠宰并采取睾丸组织样,以18S rRNA为内标,用相对定量RT-PCR法研究睾丸IGF-Ⅰ和IGF-IR mRNA的表达及发育性变化。结果表明,二花脸猪与大白猪睾丸IGF-ⅠmRNA表达的发育模式在30日龄前完全相同,即随着日龄的增加而呈极显著增加（P〈0.01）;二花脸猪睾丸IGF-Ⅰ mRNA相对表达量在30-180日龄无显著变化;大白猪睾丸IGF-Ⅰ mRNA相对表达量在90日龄有所下降,而在120和180日龄又恢复到30日龄水平。二花脸猪睾丸IGF-Ⅰ mRNA相对表达量显著高于大白猪（P〈0.05）。二花脸猪与大白猪睾丸IGF-IR mRNA表达的发育模式不同。二花脸猪睾丸IGF-IR mRNA相对表达量在90-120日龄呈显著下降趋势（P〈0.05）;大白猪IGF-IR mRNA相对表达量在0日龄较高,随后显著下降（P〈0.05）,并在观察期内持续保持较低水平。二花脸猪IGF-IR mRNA相对表达量显著高于大白猪（P〈0.05）。睾丸IGF-Ⅰ mRNA和IGF-IR mRNA相对表达丰度呈极显著正相关（r=0.575,P〈0.01）。结论：（1）不同品种猪睾丸IGF-Ⅰ和IGF-IR mRNA表达具有特定的发育模式;（2）猪睾丸中IGF-Ⅰ和IGF-IR mRNA的协同表达可能对猪繁殖性能的发育有重要调节作用。     

香猪睾丸发育的形态学变化

为了解香猪睾丸发育过程中的形态学变化,外科手术取30、40、50、60、90、110日龄（每个年龄组n=3～4）香猪右侧睾丸经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,组织切片采用HE染色,40倍物镜下观察细胞数量变化,经显微照相后用Scion image软件测量生精小管、输出小管和附睾管的管壁面积。结果发现30～50日龄时睾丸生精...     

酪蛋白酶解产物对仔猪肠道黏膜IGF-I及其受体基因mRNA水平的影响

研究了酪蛋白酶解产物对新生仔猪肠道黏膜胰岛素样生长因子I（IGF-I）及其受体基因mRNA水平的影响。从五窝仔猪中选出10头仔猪,每窝选2头,分别分至酪蛋白饲喂组（对照组）和酶解酪蛋白饲喂组（试验组）。两组仔猪均以牛乳为基础日粮,并分别加入1．59,6的酪蛋白和酪蛋白酶解液取代10％体积的牛乳,人工饲喂3d后屠宰取样。试验结果表明,试验组仔猪空肠黏膜IGFI受体基因和IGFI基因mRNA水平分别显著（P〈0．05）和极显著（P〈0．01）高于对照组仔猪。说明酪蛋白酶解产物促进肠道发育可能与提高IGFI及其受体基因的mRNA水平有关。     

酪蛋白酶解产物对仔猪肠道黏膜IGF-I及其受体基因mRNA水平的影响

研究了酪蛋白酶解产物对新生仔猪肠道黏膜胰岛素样生长因子I(IGF-I)及其受体基因mRNA水平的影响.从五窝仔猪中选出10头仔猪,每窝选2头,分剐分至酪蛋白饲喂组(对照组)和酶解酪蛋白饲喂组(试验组).两组仔猪均以牛乳为基础日粮,并分别加入1.5%的酪蛋白和酪蛋白酶解液取代10%体积的牛乳,人工饲喂3d后屠宰取样.试验结果表明,试验组仔猪空肠黏膜IGF-I受体基因和IGF-I基因mRNA水平分别显著(P＜0.05)和极显著(P＜0.01)高于对照组仔猪.说明酪蛋白酶解产物促进肠道发育可能与提高IGF-I及其受体基因的mRNA水平有关.     

五指山猪8种组织IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化研究

采用Q-PCR 技术检测了胰岛素样生长因子2(IGF2)和胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)基因在30、60、90、120 和150 日龄五指山猪心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、肌肉、胃脏和小肠等8种组织中的mRNA表达水平.结果表明:(1)IGF2基因在8种组织中的表达呈相似的变化规律:各组织mRNA表达量随着日龄的增加而降低,30日龄时表达量最高,150龄时表达量最低,差异显著(P<0.01);(2)IGFBP3基因在心脏、肺、脾脏、肾脏、肠、胃等组织中的mRNA表达规律相似:即从30～150日龄,依次递减;而肝脏和肌肉mRNA表达从30日龄开始上升,肝脏在90日龄达最高,肌肉在60日龄时达最高,随后二者开始下降,在150日龄时达最低水平.以上结果初步揭示了五指山猪IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化模式,为深入研究五指山猪生长发育及矮小性状形成机理提供了基础数据.     

宫内发育迟缓对环江香猪哺乳仔猪IGF发育模式的影响

本文旨在探讨宫内发育迟缓(IUGR)发生与胰岛素样生长因子(IGF)发育模式的联系。选用20头体况相近的环江香猪母猪,分娩后从每窝挑出1头体重最大(定义为正常出生重,NBW)仔猪和1头体重最小仔猪(定义为IUGR),分为NBW组和IUGR组,每组20头。分别于0、7、14和21日龄时,从各组随机选取5头仔猪,前腔静脉采血,离心分离血浆,检测IGF-1浓度;采集肝和背最长肌样品,检测IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3和IGFBP-5的基因表达水平。结果表明：与NBW仔猪相比,0～21日龄IUGR仔猪体重和血浆IGF-1含量均显著降低(P<0.05);0～14日龄IUGR仔猪的体重逐渐增加(P<0.05),而21日龄IUGR仔猪的体重与14日龄差异不显著(P>0.05)。0日龄IUGR仔猪肌肉IGF-1R、IGFBP-3和IGFBP-5、肝IGFBP-5的表达显著高于NBW仔猪(P<0.05),7日龄IUGR仔猪肌肉和肝的IGF-1表达均显著低于NBW仔猪(P<0.05),21日龄IUGR仔猪肌肉IGF-1R的表达水平显著高于NBW仔猪(P<0.0...     

猪睾丸中脂联素受体与LHR、CYP11A1、StAR基因表达的发育变化及其相关性研究

旨在了解皖南花猪睾丸组织脂联素受体mRNA与睾酮合成相关因子mRNA表达的发育性变化及其相关性,探讨脂联素与睾酮生成的关系.本研究用荧光实时定量PCR法检测0、30、45、90和180 d等不同日龄(各日龄样本数5头)皖南花猪睾丸组织脂联素受体(AdpR1、AdpR2)和LHR、CYP11A1、StAR mRNA的表达水平.结果,AdpR1、CYP11 A1和StAR mRNA的表达有极显著的发育性变化(P＜0.01),AdpR1 mRNA的表达先增加后降低,45 d达到最大值;CYP11A1和StAR mRNA的表达先升高后降低再升高,45 d达到最大表达量.LHR mRNA的表达也有显著的发育性变化(P＜0.05),整体表现为先升高后降低.AdpR1与CYP11A1 mRNA的表达量显著相关(r=0.587,P＜0.05);LHR与CYP11A1、StAR mRNA的表达量分别显著相关(r=0.528,P＜0.05;r=0.552,P＜0.05);CYP11 A1与StAR mRNA表达量极显著相关(r=0.709,P＜0.01).AdpR1mRNA在睾丸组织的高表达提示脂联素可能通过AdpR1介导对睾丸的调节作用,其发育性变化和CYP11A1 mRNA呈正相关,提示脂联素对睾酮的生成有一定的促进作用.     

金华猪肠道ANGPTL4的表达分布特征和发育性变化研究

血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)在机体脂肪和能量代谢中起重要的调控作用,并参与介导肠道微生物区系对脂肪沉积的调节.本实验以金华猪为研究对象,分析ANGPTL4在猪肠道中的分布特征及其发育性变化.分别选取45、90、150日龄和270日龄体重相近的健康金华猪各4头,取十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠等组织,通过RT-...     

猪肌肉组织LPL基因表达的发育性变化及其与肌内脂肪沉积关系的研究

以40-90 kg 6个体重组的莱芜猪和鲁莱黑猪共72头去势公猪为试验对象(每组6头),采用相对定量RT-PCR方法,以-βactin基因为内标,分析肌肉组织LPL基因表达的发育性变化及其与肌内脂肪沉积的关系。结果表明:莱芜猪与鲁莱黑猪肌肉组织中LPL基因表达的发育性变化趋势基本相似,随体重的增长,莱芜猪50-70kg阶段LPLmRNA表达丰度逐渐下降(P<0.05),80 kg阶段迅速回升出现一个峰值后再次下降;鲁莱黑猪LPLmRNA表达丰度随体重的增加呈缓慢下降趋势,70 kg以后变化不大并维持较低水平,其前期(40-60 kg)与后期(70-90 kg)的表达量差异显著(P<0.05)。总体上莱芜猪肌肉组织LPL基因表达量略高于鲁莱黑猪(P>0.05)。相关分析表明,莱芜猪和鲁莱黑猪肌内脂肪相对含量与肌肉组织LPLmRNA表达的发育性变化分别呈显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)的正相关。研究结果提示:猪肌肉组织LPL是肌内脂肪沉积的重要参与者,其编码基因的表达具有明显的体重发育特征,并对肌内脂肪的沉积具有一定程度影响。     

猪胰岛素样生长因子Ⅰ基因表达与调控的研究进展

胰岛素样生长因子-Ⅰ(Ⅰ nsulin-like growth factor-Ⅰ,I GF-Ⅰ)是机体生长、发育和代谢的一个重要调控因子,同时也是生长激素(growth hormone,GH)启动生长活性的主要介导者.血液中的I GF-Ⅰ主要来源于肝脏,以内分泌的形式作用于其他组织;许多肝外组织也能合成I GF-Ⅰ,其主要以自分泌或旁分泌的形式发挥作用.多种因素调控其表达.本文就猪I GF-Ⅰ的表达与调控方面的最新研究进展进行一综述.     

Immunolocalization of insulin-like growth factor-I (IGF-I) and its receptors (IGF-IR) in the equine epididymis

Insulin-like growth factor plays a paracrine/autocrine role in regulating testicular function in the stallion, but its presence in the equine epididymis remains unknown. The aim of this study was to test the hypothesis that insulin-like growth factor-I (IGF-I) and IGF-I receptor (IGF-IR) are localized in the caput, corpus, and cauda of the epididymis in an age-dependent manner. Immediately after castration, epididymal tissue was fixed, paraffin-embedded, and processed for immunohistochemistry (IHC). Western blot was also performed using equine epididymal extracts to verify the specificity of the antibodies against IGF-I and IGF-IR. Immunolabeling of IGF-I was observed in the cytoplasm of principal and basal cells in the caput, corpus, and cauda at the pre-pubertal (3–7 months), pubertal (12–18 months), post-pubertal (2–4 years), and adult stages (4.5–8 years). Immunolabeling of IGF-IR was observed in the cytoplasm of principal cells in all regions of the epididymis in each age group. Immunolabeling of IGF-IR was also detected in the cytoplasm of basal cells from animals of all ages. Bands observed by Western blot corresponded to the molecular weights of IGF-I and IGF-IR, ~23 kDa and 95 kDa, respectively. These results suggest that IGF-I might function as an autocrine and/or paracrine factor during the development, maintenance and/or secretions of the stallion epididymis.     

皖南花猪部分屠宰性状的发育性变化及性别差异

为了研究皖南花猪部分屠宰性状的发育性变化及性别差异,试验采用0,30,45,90,180日龄的皖南花猪公、母各5头进行屠宰测定。结果表明:皖南花猪的各项屠宰指标都有不同程度的发育性变化,30日龄时,肾脏重有显著增长(P0.05),其他指标都有极显著增长(P0.01);在30～45日龄阶段,胴体斜长、膘厚、皮厚、肺脏重有显著增长(P0.05),但眼肌面积、心脏重、肝脏重、脾脏重、肾脏重增长不显著(P0.05);在45～180日龄阶段,所有指标都呈现快速的增长。出生和180日龄时,屠宰指标的性别差异均不显著(P0.05);30日龄时母猪的膘厚显著大于公猪(P0.05);45日龄时,母猪的胴体斜长和肝脏、脾脏、肾脏重显著小于公猪(P0.05);90日龄时母猪的胴体斜长显著大于公猪(P0.05);皖南花猪的肌内脂肪含量较高,且在背最长肌和半腱肌有不同的发育规律。     

日粮色氨酸水平对生长猪的氮利用效率、血浆类胰岛素生长因子-I、生长激素及胰岛素的影响

本试验旨在研究日粮色氨酸水平对生长猪的氮利用率以及对血浆类胰岛素生长因子-I(IGF-I)、生长激素(GH)、胰岛素浓度的影响。试验以4头大白去势公猪作为试验动物,以色氨酸含量分别为1.2、1.7、2.2和2.7g/kg的4种日粮为试验处理,按照4×4拉丁方进行试验设计。结果表明,色氨酸水平对干物质消化率、有机物消化率和氮消化率没有显著性影响(P>0.05)。氮沉积和氮的生物学利用率随着日粮色氨酸水平由1.2提高到1.7、2.2和2.7g/kg而显著提高(P<0.05),但是试验处理1.7、2.2和2.7g/kg之间的氮沉积和氮的生物学价值没有显著差异(P>0.05)。不同处理之间的血浆IGF-I、GH和胰岛素浓度没有显著差异(P>0.05)。日粮色氨酸水平和血浆IGF-I、GH或胰岛素浓度之间以及氮沉积和血浆IGF-I、GH或胰岛素浓度之间均无显著的相关关系(P>0.05)。综合以上结果,日粮色氨酸水平对生长猪的氮沉积具有显著影响,而对血浆IGF-I、GH和胰岛素没有显著影响。     

猪睾丸组织与雄性生殖相关circRNA鉴定

为研究环状RNA （circRNA）在杜洛克和大白猪睾丸中的表达差异,采用去除组织总RNA中核糖体RNA （rRNA）和线性RNA的方法构建特异性猪睾丸circRNA文库,并在Illumina PE150平台上进行测序,测序数据经过质控、比对、拼接后得到用于后续分析的数据。运用生物信息学软件find_circ和CIRI识别circRNA,并进行表达水平统计,从而得到猪睾丸组织circRNA表达谱,然后用DEseq2进行组间表达差异分析,对差异表达circRNA进行功能富集分析以筛选与雄性生殖相关的circRNA。结果发现,共识别到21 743个circRNAs,其中632个circRNAs在杜洛克和大白猪中的表达差异显著（|log₂（FoldChange）|>1,P<0.05）,在杜洛克猪上调表达的circRNAs有281个,下调表达的有351个。差异表达circRNA富集结果显示,有52个GO条目与繁殖相关,其中有9个与雄性生殖相关。经进一步筛选鉴定,有6个与雄性生殖相关的circRNAs （circ_0030058、circ_0009504、circ_00178101、circ_0019933、circ_0033379和circ_0017932）,它们可能参与精原细胞分化、精子发生和精子细胞发育等生物学过程。综上所述,杜洛克和大白公猪睾丸中存在表达丰度不同的circRNA,这些circRNA可能参与精子生成,可以作为预测公猪生育能力的生物标记。     

Kiss-1基因在不同发育阶段五指山猪睾丸中的表达及定位研究

试验采用荧光定量技术研究亲吻素-1(Kiss-1)基因mRNA在30、60、80(初情期)和120日龄五指山公猪睾丸中的表达情况,并采用免疫组化技术定位其表达。结果显示,Kiss-1mRNA在五指山猪睾丸中的表达随着年龄的增长表达量逐渐升高,到初情期(80日龄)时达到最高(P0.05),随后到120日龄时显著降低(P0.05);免疫组化结果显示,睾丸间质细胞、精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、圆形精子细胞及间质细胞中均发现Kiss-1阳性反应产物,而在精子中未发现Kiss-1阳性表达产物。结果证实,Kiss-1基因在五指山猪精子发生过程中发挥着重要作用。     

贵州香猪睾丸发育中支持细胞和生精细胞数量变化观察

为了解香猪睾丸发育过程中生殖细胞和支持细胞数变化规律,用手术取出30,40,50,70,90和110日龄(每个年龄组n=3～4)香猪右侧睾丸,经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,组织切片采用免疫组化SP法,用单克隆抗体GATA-4检测睾丸支持细胞的特异生长转录因子-4,经DAB显色、苏木素复染。光镜下核呈棕色者为支持细胞,核呈蓝色者则为生殖细胞;经显微照相并用Scion image软件测量生精小管及管壁面积。结果:30～110日龄睾丸支持细胞数维持在稳定水平(P>0.05),而生殖细胞数随日龄增加而增多,70日龄生殖细胞数快速增多(P<0.05),持续到110日龄。同样,从70日龄开始睾丸生精小管和管壁面积显著性增大(P<0.05)。香猪睾丸支持细胞快速增殖发生在30日龄前,而生殖细胞数随着日龄的增长而增多。     

载脂蛋白CⅡ基因在猪肝脏组织中的发育性表达研究

试验旨在探究载脂蛋白CⅡ(apolipoprotein Ⅱ,ApoCⅡ)基因mRNA在马身猪和大白猪肝脏组织中的发育性表达规律,揭示ApoCⅡ基因表达水平与猪脂质代谢之间的关系。采用实时荧光定量PCR技术检测了马身猪和大白猪1~180日龄(1、30、60、90、120、150和180日龄)肝脏组织中ApoCⅡ基因mRNA表达。结果表明,马身猪和大白猪肝脏组织ApoCⅡ基因mRNA发育性变化趋势存在差异,马身猪ApoCⅡ表达量从1日龄到60日龄逐渐降低,在90日龄时上升,之后逐渐降低;而大白猪从1日龄到150日龄呈现逐渐降低趋势,180日龄时回升。1日龄时,马身猪和大白猪肝脏中ApoCⅡ基因mRNA的表达量差异不显著(P>0.05),在其他阶段,两品种间的表达量存在显著或极显著差异(P<0.05或 P<0.01)。这表明肝脏中ApoCⅡ mRNA的表达具有显著的日龄依赖性和明显的品种差异性,其表达可能对猪脂质代谢有显著影响。     

过氧化物酶体增殖物激活受体α在猪肝脏组织中发育性表达研究

为了探究过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)基因在不同脂肪型猪肝脏组织中的发育表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR方法,检测了马身猪和大白猪0、1、2、3、4、5和6月龄个体肝脏内PPARα基因mRNA的表达量。结果显示,马身猪和大白猪肝脏组织PPARα基因mRNA发育性变化趋势存在差异,大白猪PPARα 基因表达量呈现出前、后期高中期低的变化趋势,0月龄时表达量最高,3月龄时表达量最低,两者差异极显著(P<0.01),而马身猪表达量呈现前期高后期低的变化趋势,0月龄和1月龄的表达量极显著高于其他月龄(P<0.01)。上述结果揭示猪PPARα可能是肝脏脂质代谢的调控因子,为猪脂肪沉积的调控机制提供理论数据。