牛血铜锌超氧化物岐化酶规模化生产工艺研究

本研究利用红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术,建立了一套牛血铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)规模化生产的简便易行新工艺.该工艺采用碟式分离机对红细胞进行连续分离,其分离速度可达1000kg牛血/h以上;采用添加Cu2+、Zn2+的一次热变性方法除去血红蛋白,可以代替传统方法中的氯仿和乙醇,并且在超滤技术浓缩提取液后,沉淀过程中丙酮的用量减少了90%;减轻了这些有机溶剂对环境造成的压力.在规模化生产条件下,利用新工艺,投料14批,共570.5kg红细胞,得到SOD冻干粉36069.35 mg,平均比活达到6164.19U/mg·pro,平均收率为34.41万U/kg红细胞,并且主要化学试剂成本降低93.0%.此外试验结果还表明,冷冻红细胞热变性后,酶的平均总活力一般稳定在72.86万U/kg红细胞;与新鲜红细胞制备的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显差别,即可以以冷冻红细胞为原料制备SOD,从而解决了原料长期保存问题.     

马血超氧化物岐化酶的纯化及其性质研究

本文首次报道了以制造破伤风抗毒素马血红细胞为原料,采用乙醇—氯仿、热变性除血红蛋白和杂蛋白、丙酮沉淀、DEAE-Sephad exA-50柱层析等分离步骤制备马血SOD的简便、经济方法。制备的马血SOD经SDS-PAGE为一条带,比活为12940u/mg蛋白,回收率为62%。实验证明,马血SOD分子量为35,000;等电点为6.55,7.04和7.52。对热和pH相对稳定,二价金属离子Fe~(2 )、Mg~(2 )及L-组氨酸、L-半胱氨酸对其活性有不同程度的影响。     

猪血铜锌超氧化物歧化酶的简化提纯

探索了一条简便制备SOD的工艺路线。通过60℃热变性、氯仿—乙醇沉淀和丙酮沉淀。结果从猪血红细胞中提取的SOD的比活达3400U·mg-1,总回收率为72%。该工艺操作简单,所需的仪器设备少,易于调控,适宜工业化生产。     

动物血液中超氧化物歧化酶的提取方法研究

超氧化物歧化酶,简写为SOD,目前市场上所用SOD一般为CuZn-SOD,本文介绍了提取动物血块中CuZn-SOD的分离提取方法,在实验中利用血块采用机械破碎法破膜,采用热变性及两次乙醇-氯仿沉淀去除杂蛋白,然后用丙酮沉淀得到CuZn-SOD成品。     

孕马血清促性腺激素的提纯研究

以比活100 IU/mL以上的孕马和孕驴血清为原料,应用HPO2沉淀-超滤浓缩(或用聚 乙二醇浓缩)-乙醇分部沉淀-超滤截留-SE-SephadexC-50柱层析-羟基磷灰石柱层析,进 行PMSG提纯试验,获得了比活9 000 IU/mg左右的高纯度产品,经PAG圆盘电泳只出现一条带.     

新生牛血中Cu/Zn-SOD的提纯及肝素、壳聚糖的逐层自组装包裹

试验旨在通过对超氧化物歧化酶（super oxide dismutase, SOD）改性,提高其稳定性。本试验采用了热变性提取方法从新生牛血中提取Cu/Zn-SOD,采用逐层自组装技术,以肝素与壳聚糖为材料,对从新生牛血中分离提纯的SOD进行物理包裹试验,并对包裹后Cu/Zn-SOD的稳定性进行研究。结果显示,在耐热稳定性上,包裹的SOD相对酶活性比天然SOD提高了3.3倍;在耐酸碱性方面,在pH分别为3.0、11.0的条件下,包裹的SOD相对酶活性较天然SOD提高了2.0倍;在抗胰蛋白酶水解的能力上,包裹的SOD相对酶活性较天然SOD提高了2.7倍。采用肝素、壳聚糖制成的外壳对SOD进行物理修饰可得到较好的效果,且其具有较强的机械强度、生物相容性较好,外表面的壳聚糖有助于帮助跨细胞膜转运,可应用于口服剂型SOD的开发。     

牛血Cu/Zn-SOD提取条件的研究

本研究以牛血为试验材料,研究了Cu²+浓度、Zn²+浓度、热变性温度和热变性时间4种单因素分别对牛血中Cu/Zn-SOD活性的影响。以4种单因素为基础设计了4因素5水平正交试验,通过邻苯三酚法测定了酶活性,考马斯亮蓝法测定了蛋白含量,聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了蛋白纯度,确定了牛血Cu/Zn-SOD的最佳提取条件。结果表明：当Cu²+、Zn²+分别为6和12 mmol/L条件下,90 ℃热变性35 min,可得到较高活性和比活力的Cu/Zn-SOD。本研究意在为更简便、经济的牛血中Cu/Zn-SOD提纯方法提供参考。     

高铜对雏鸭抗氧化酶活性的影响

360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Ⅰ组Cu 100 mg/kg;Ⅱ组Cu 200 mg/kg;Ⅲ组Cu 400 mg/kg;Ⅳ组Cu 600 mg/kg;Ⅴ组Cu 800 mg/kg),试验期6周.与对照组比较,高铜Ⅳ组和Ⅴ组血清铜锌SOD、CP活性、肝脏铜锌SOD、GSH-Px活性降低(P<0.01);高铜Ⅲ组、Ⅳ、Ⅴ组肝脏黄嘌呤氧化酶、单胺氧化酶含量显著升高(P<0.01);高铜Ⅰ、Ⅱ组血清铜锌SOD、CP活性、肝脏铜锌SOD、GSH-Px活性升高(P<0.01).结果表明,日粮铜水平达400 mg/kg及以上时可引起血清和肝脏抗氧化酶活性降低,使机体抗氧化功能受损.     

高铜对雏鸭肾脏影响的病理学观察

360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜V组),试验期6周.与对照组比较,高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组雏鸭肾脏出现不同程度的病理损害,肾小管上皮细胞颗粒变性、空泡变性;超微结构观察,肾小管上皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂甚至溶解消失呈空泡状.同时,高铜Ⅳ、Ⅴ组肾脏铜含量、血清铜含量和血清肌酐含量,均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01).结果表明,日粮铜含量400～800 mg/kg即可引起雏鸭肾脏的病理损伤,功能降低.     

高铜对肉雏鸡某些血液指标的影响

选用1日龄艾维茵肉鸡420只,随机分为7组,分别喂以对照日粮(Cu11mg/kg)、高铜日粮I组(Cu100mg/kg,II组Cu200mg/kg,Cu300mg/kgⅢ,Cu400mg/kgⅣ,Cu500mg/kgⅤ,Cu600mg/kgⅥ)六周。结果显示Ⅴ、Ⅵ组雏鸡丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性显著升高,红细胞数量和血红蛋白含量显著降低穴P<0.05或P<0.01雪。结果表明,500mg/kg以上的高铜日粮对雏鸡上述血液生化指标影响明显。     

猪毛色遗传的研究进展

本文概述了猪的毛色类型、猪的毛色遗传模式,着重综述了猪毛色基因分子基础的研究进展,指出存在问题并就未来发展方向做了思考。     

不同样本商品蜂蜜中硒含量的测定

用硝酸和高氯酸消化蜂蜜,使硒游离出来,在微酸性环境下,硒和2,3-二氨基萘(DAN)生成有较强荧光的物质,用环己烷萃取,在激发波长378nm,荧光波长518nm处测定其荧光强度。蜂蜜中硒含量范围:0.10～0.82μg/g。表明:蜂蜜应视为天然富硒营养品。     

乳酸杆菌益生作用机制的研究进展

乳酸杆菌作为益生菌广泛用于人和动物。本文综述了乳酸杆菌改善宿主健康的机制。乳酸杆菌可通过产生抗菌物质如乳酸、过氧化氢、细菌素,或者通过竞争营养或肠道黏附位点来抑制致病菌;通过诱导黏附素的分泌或阻止细胞凋亡而增强肠道的屏障功能,从而保护肠道。文章重点讨论了乳酸杆菌表面成分（表面蛋白、脂磷壁酸和肽聚糖）与肠道受体（Ｃ型凝集素受体、Ｔｏｌｌ样受体和 Ｎｏｄ样受体）,阐述了他们结合后启动免疫调节信号,调控肠道免疫功能以发挥改善健康作用的机制。     

Comparison of four techniques of arthrocentesis of the lateral compartment of the femorotibial joint of the horse

Reasons for performing study: Clinical experiences indicate that centesis of the lateral compartment of the femorotibial joint is often unsuccessful. Objective: To determine the accuracy of 2 published and 2 unpublished techniques of centesis of the lateral compartment of the femorotibial joint. Hypothesis: It was hypothesised that a drug can be administered into the lateral compartment of the femorotibial joint via a diverticulum of this joint that surrounds the medial aspect of the long digital extensor tendon and that this technique is more accurate than described techniques of centesis of this compartment. Methods: Twenty‐four stifles of 12 horses were divided equally into 4 groups and a radiocontrast medium injected into the lateral compartment of the femorotibial joint of each group using a hypodermic needle inserted: 1) caudal to the lateral patellar ligament and proximal to the tibial plateau, 2) caudal to the long digital extensor tendon and proximal to the tibial plateau, 3) between the long digital extensor tendon and bone of the extensor groove of the tibia or 4) directly through the long digital extensor tendon until it contacted bone. Twelve veterinary students who had no experience using any of these techniques performed the injections. Accuracy of each technique was determined by examining radiographs obtained after injecting the contrast medium. Results: The most successful technique for arthrocentesis was by inserting a needle through the long digital extensor tendon. This approach was successful in all attempted cases, whilst other techniques had lower rates of success. Conclusions: The lateral compartment of the femorotibial joint can be accessed accurately by inserting a needle through the long digital extensor tendon as it lies within the extensor groove. Other techniques may not be as accurate for clinicians inexperienced in arthrocentesis of the lateral compartment of the femorotibial joint.     

商会自治的基石——商会自治规范研究

在现代法律秩序中,商会自治规范是制定法的基础和必要的补充,甚至在某些方面替代了制定法;商会自治规范主要包括商会组织规范、行为规范、惩罚规范以及争端解决规范等;其效力仅及于其内部成员;商会自治规范和制定法之间存在冲突,但也存在整合的基础。     

鸡败血支原体垂直传播模式及其阻断方法

以国际标准强毒Ｒ株人工感染非免疫产蛋鸡,定时扑杀,分别从鼻窦、眶下孔、气管、肺、气囊、卵巢和输卵管分离ＭＧ,并收集感染鸡所产蛋分离ＭＧ。结果表明,人工感染４８小时后上、下呼吸道及肺已被全面感染,９６小时气囊已被感染,１２０小时输卵管已能分离到ＭＧ,卵巢始终分离不到ＭＧ。人工感染鸡自１４４小时便能在其所产蛋中分离出ＭＧ。药物治疗能在７２小时内消除感染,油乳剂苗则需２４天后逐渐降低蛋内ＭＧ分离率,药物卵内注射、种蛋药浴、高温处理均能杀死卵内ＭＧ,但以研制的种蛋浸泡剂药浴效果为最好。     

Prevalence of diseases of the spinal cord of cats

A retrospective review of records of 205 cats with histologically confirmed disease of the spinal cord was performed to identify the prevalence of disease in this nonrandomly selected population of cats. Clinical records were reviewed, and age, duration of neurologic illness, and clinical and histopathologic findings in cats with spinal cord disease were abstracted. Disease processes were classified into 7 categories and 23 groups. The most common diseases affecting the spinal cord of cats were feline infectious peritonitis (FIP), lymphosarcoma (LSA), and neoplasia of the vertebral column secondarily affecting the spinal cord. Information on age, onset and duration of clinical signs, and lesion localization at the postmortem examination in cats belonging to the 7 categories of disease were analyzed to create a practical list of differential diagnoses. Cats were also subcategorized into 3 groups based on their age at death. FIP was the most common disease of cats younger than 2 years of age. LSA and vertebral column neoplasia were the most common diseases affecting cats between 2 and 8 years of age. Vertebral column neoplasia was the most common disease affecting cats older than 8 years of age. Results of this histopathologic study showed that FIP and LSA were the most common disease processes affecting the spinal cord of cats. However, at least 21 other groups of diseases and their relative prevalence were identified.     

高效液相色谱法测定鸡肉中土霉素残留量的不确定度评定

根据JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》建立了高效液相色谱法测定鸡肉中土霉素残留测量的不确定度评定方法,评定过程包括建立测量程序、分析不确定度来源、对不确定度分量进行量化。将不确定度归类为两大类。随机效应导致的不确定度可以通过一系列具有统计意义的重复观测值进行A类评定;系统效应导致的不确定度通过各测量器具、设备的说明书、校准证书提供的参数进行B类评定。本方法鸡肉中土霉素残留量的相对合成标准不确定度约为3.9%。     

几个柑橘品种实生苗的抗旱性评价研究

以5个金柑属品种、枳壳、软枝酸橘及广西土柠檬实生苗为材料,进行复水成活率、旱害指数、叶片相对含水量、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、脯氨酸等生理指标及隶属函数的综合分析,为柑橘抗性砧木品种选育提供参考。结果表明：胁迫20d复水后的成活率融安滑皮金柑和长寿金柑最高,为100%,软枝酸橘最低,为88.9%;随着干旱胁迫加剧,各品种的旱害指数呈上升趋势,长寿金柑的旱害指数最低,为0.25,软枝酸橘的旱害指数最高,为0.61;从叶片相对含水量的结果来看,长寿金柑的变化幅度最小,软枝酸橘的变化幅度最大,在第18d时分别为61.19%和37.85%;3种保护酶之间相互协同作用减轻植株受害程度,其活性变化幅度与丙二醛和脯氨酸的含量变化相似。利用隶属函数法综合分析,得出各品种的抗旱性强弱依次为长寿金柑>枳壳>融安滑皮金柑>融安金柑>山金柑>广西土柠檬>金枣>软枝酸橘。     

比格犬甲状腺显微与超微结构的观察

应用光镜和透射电镜技术，观察了3～6月龄比格犬甲状腺的显微和超微结构。结果表明，比格犬甲状腺实质由滤泡和滤泡旁细胞构成。滤泡呈圆形或椭圆形，直径20．22～220．00μm，平均90.80μm；由单层立方上皮细胞围成，细胞高度3．04～7.11μm，平均5.18μm，电镜下可见功能状态不同的两型滤泡上皮细胞；滤泡旁细胞很多，直径4．40～8．82μm，平均6．23μm，位于滤泡之间或镶嵌于滤泡上皮细胞之间，也可聚集在一起形成滤泡样结构，胞质内含有大量的分泌颗粒，电镜下也可见两种类型的滤泡旁细胞。