大孔吸附树脂纯化草莓多酚及体外抗氧化活性研究

通过静态、动态吸附和解吸实验,研究了3种大孔吸附树脂对草莓多酚的纯化效果,并分析了纯化的草莓多酚在体外的抗氧化活性。结果表明:在3种大孔吸附树脂中, HPD400树脂对草莓多酚的吸附和解吸率最高。得出的HPD400大孔树脂纯化草莓多酚的最优工艺参数如下:质量浓度为3 mg/mL、pH值为2.0的草莓多酚提取液以1 mL/min的流速进行上样,并用80 mL体积分数为50%的乙醇以1 mL/min的流速进行洗脱。经HPD400大孔树脂分离纯化后的草莓多酚纯度约是纯化前的2.71倍,其总抗氧化能力也提高了2.88倍。纯化草莓多酚清除DPPH·自由基、羟基(·OH)自由基和超氧阴离子(O_2~(·-))自由基的能力显著高于同浓度粗多酚的。     

大孔吸附树脂纯化草莓多酚及体外抗氧化活性研究

通过静态、动态吸附和解吸实验,研究了3种大孔吸附树脂对草莓多酚的纯化效果,并分析了纯化的草莓多酚在体外的抗氧化活性。结果表明:在3种大孔吸附树脂中, HPD400树脂对草莓多酚的吸附和解吸率最高。得出的HPD400大孔树脂纯化草莓多酚的最优工艺参数如下:质量浓度为3 mg/mL、pH值为2.0的草莓多酚提取液以1 mL/min的流速进行上样,并用80 mL体积分数为50%的乙醇以1 mL/min的流速进行洗脱。经HPD400大孔树脂分离纯化后的草莓多酚纯度约是纯化前的2.71倍,其总抗氧化能力也提高了2.88倍。纯化草莓多酚清除DPPH·自由基、羟基(·OH)自由基和超氧阴离子(O_2^(·-))自由基的能力显著高于同浓度粗多酚的。     

水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化工艺及体外降糖活性研究

为考察水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化静态和动态吸附解吸效果,同时探究水晶冰菜作为天然降血糖药物的潜力,对水晶冰菜总黄酮粗提物(以下简称粗提物)进行大孔树脂纯化,以吸附率和解吸率为指标,对6种不同极性大孔树脂(D101、AB-8、NKA-9、HPD-100、X-5、S-8)进行筛选,再通过静态与动态吸附与解吸试验,探讨粗提物质量浓度、pH值、洗脱液体积分数、上样流速与上样体积、洗脱流速与洗脱体积对水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化的影响;在此基础上,以对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制率为评价指标,阿卡波糖为对照,考察纯化前后体外降糖活性变化。结果表明,D101型大孔树脂吸附和解吸效果较好。当粗提物质量浓度0.30 g·L~(-1)、pH值4、上样流速60 mL·h~(-1)、上样体积56 mL、洗脱液为体积分数80%乙醇溶液、洗脱液pH值6、洗脱流速60 mL·h~(-1)、洗脱体积128 mL时,通过D101型大孔树脂纯化后水晶冰菜总黄酮纯度为57.67%,较粗提物提高了2.98倍。水晶冰菜总黄酮通过抑制α-葡萄糖苷酶活性和α-淀粉酶活性发挥不同程度的降血糖作用,粗提物、纯化物和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果均显著高于对α-淀粉酶活性的抑制效果,其中纯化物对2种酶活性的抑制效果与阿卡波糖相比无显著性差异,但显著高于粗提物。     

荔枝核多酚纯化工艺优化研究

[目的]以荔枝核为原料,优化荔枝核多酚纯化工艺,提高荔枝多酚资源利用率。[方法]以多酚纯度以及收率为衡量指标,通过对比7种大孔树脂的静态吸附与解吸,确定纯化荔枝核多酚的最佳树脂;通过大孔树脂动态吸附与洗脱,考察吸附量、洗脱溶剂、洗脱溶剂用量、洗脱速度等因素,确定荔枝核多酚纯化的最佳工艺。[结果]筛选出大孔树脂LSA-12作为最佳纯化材料,LSA-12纯化荔枝核多酚的最佳工艺为吸附量1∶4.61(g∶mL)(总固形物∶树脂体积)、洗脱溶剂70%乙醇、洗脱溶剂用量1.5 BV、洗脱速度1.0 BV/h。在该条件下,所得荔枝核多酚平均纯度为71.98%,平均收率为80.93%。[结论]大孔树脂LSA-12纯化荔枝核多酚效果良好,该工艺可在生产中推广应用。     

油茶叶多酚纯化工艺优化及其对油脂的抗氧化作用

[目的]探究适宜纯化油茶叶多酚的大孔树脂及工艺,以获得活性更强的油茶叶多酚,为提高其产品附加值提供参考依据.[方法]以油茶叶多酚粗提液为原料,采用8种不同型号大孔树脂对油茶叶多酚进行静态吸附和解吸,从中筛选出效果较好的树脂,确定纯化油茶叶多酚的最佳工艺,并考察纯化前后的油茶叶多酚对油茶籽油和花生油的抗氧化效果.[结果]大孔树脂HPD-600适宜用于纯化油茶叶多酚,吸附量为49.77 mg/g,解吸量为40.38 mg/g;纯化油茶叶多酚的最佳工艺为:上样质量浓度2 mg/mL,上样流速2 mL/min,洗脱液为60%乙醇溶液,洗脱流速3 mL/min,洗脱体积60 mL;纯化油茶叶多酚的纯度为40.05%,可有效延缓油脂氧化,呈剂量—效应关系,且活性强于粗提油茶叶多酚.[结论]纯化后的油茶叶多酚活性更强,是一种具有发展前景的新型天然抗氧化剂.     

米糠酚类物质的大孔树脂分离纯化工艺

【目的】建立米糠中酚类物质的大孔树脂分离纯化工艺,比较米糠提取物纯化前后总酚、总黄酮含量及抗氧化能力,为米糠的深加工利用提供参考。【方法】比较9种不同类型大孔吸附树脂(HPD-100、HPD-200A、HPD-300、HPD-700、D101、HPD-722、AB-8、ADS17和HPD-826)对米糠提取物中总酚的静态吸附和解吸性能,筛选出对脱脂米糠酚类物质纯化效果最佳的大孔吸附树脂类型;通过考察其静态吸附动力学曲线,比较不同上样液浓度、上样流速和上样体积下的动态吸附曲线以及采用不同浓度乙醇洗脱的解吸效果,建立米糠多酚的大孔吸附树脂吸附和解吸工艺条件;比较HPD-300型大孔吸附树脂纯化前后总酚、总黄酮含量,采用高效液相色谱法结合应用酚类标准品分析米糠提取物经大孔吸附树脂纯化前后其各单体酚类物质种类与含量,并通过氧自由基吸收能力(oxygen radical absorption capacity,ORAC)和细胞抗氧化分析法(cellular antioxidant activity,CAA)比较其纯化前后的抗氧化活性。【结果】9种类型大孔吸附树脂对脱脂米糠提取物酚类物质均有一定的吸附能力,其中HPD-300型大孔吸附树脂对脱脂米糠总酚静态吸附和解吸效果明显优于其他类型树脂,其饱和吸附量为9.04 mg GAE·g~(-1),解吸率为82.62%,同时米糠总酚静态吸附在6 h时达到饱和值。HPD-300型大孔吸附树脂最佳吸附和解吸工艺条件为:米糠酚类提取液上样浓度为1.0 mg GAE·m L-1,上样流速为3.0 BV·h~(-1),上样体积为3.5 BV,洗脱剂为70%乙醇溶液,洗脱流速为3.0 BV·h~(-1)。经HPD-300型大孔吸附树脂纯化后,米糠酚类提取物的总酚和总黄酮含量分别从纯化前的88.07μg GAE·mg~(-1)和30.04μg CE·mg~(-1)提高到320.72μg GAE·mg~(-1)和133.67μg CE·mg~(-1),分别提高了2.6和3.4倍。经高效液相色谱分析,米糠酚类提取物经HPD-300型大孔吸附树脂纯化后,其中的没食子酸、原儿茶酸、香草酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、丁香酸、表儿茶素、香草醛、对香豆酸和阿魏酸等10种酚类单体组成未见明显变化和损失,且上述酚类单体在提取物中的含量较纯化前分别提高0.4—2.4倍。纯化后提取物的ORAC和CAA值分别为3 248.21μmol TE·g~(-1)和95.24μmol QE·g~(-1),较纯化前的1 327.51μmol TE·g~(-1)和29.19μmol QE·g~(-1),分别提高了1.4和2.2倍。【结论】HPD-300型大孔吸附树脂适合米糠酚类物质的分离纯化,经其纯化后的米糠提取物中总酚、总黄酮含量及抗氧化活性提高1—3倍,且不会造成单体酚的明显损失。     

荔枝皮多酚纯化工艺的优化研究

[目的]以荔枝皮为原料,优化荔枝皮多酚的纯化工艺,提高荔枝多酚资源利用率。[方法]以多酚纯度及收率为衡量指标,通过对比7种大孔树脂的静态吸附与解吸,确定纯化荔枝皮多酚的最佳树脂;通过大孔树脂动态吸附与洗脱,考察吸附量、洗脱溶剂、洗脱溶剂用量、洗脱速度等因素,确定荔枝皮多酚纯化的最佳工艺。[结果]筛选出DM21大孔树脂作为最佳纯化材料,DM21纯化荔枝皮多酚的最佳工艺如下:吸附量93.4 mg/mL、洗脱溶剂为90%乙醇、洗脱溶剂用量1.5 BV、洗脱速度1.5 BV/h。在此最优条件下,荔枝皮多酚平均纯度为32.27%,平均转化率为69.03%。[结论]大孔树脂DM21纯化荔枝皮多酚效果良好,值得推广应用。     

大孔吸附树脂分离纯化千斤拔总黄酮的工艺研究

为研究大孔树脂分离纯化千斤拔总黄酮的最佳工艺,以总黄酮的含量为指标,通过静态吸附解析试验比较7种不同类型大孔吸附树脂的吸附解析特性,确定AB-8型大孔吸附树脂适用于千斤拔总黄酮的分离纯化。通过动态吸附试验确定了大孔吸附树脂分离纯化千斤拔总黄酮的最佳工艺条件。结果表明:大孔树脂分离纯化千斤拔总黄酮的最佳工艺为:上样液质量浓度相当于原生药质量浓度为0.12g·mL-1,最大上样量为12.83mg·mL-1,上样液的pH为5.0,上样流速为2.0mL·min-1,洗脱液乙醇体积分数为70%,洗脱剂用量为7BV,洗脱流速为1.5mL·min-1。在此条件下,千斤拔总黄酮的纯度由31.26%提高至65.7%,说明该工艺稳定可靠,可用来分离纯化千斤拔总黄酮。     

大孔树脂纯化桑葚渣中α-淀粉酶抑制剂的工艺优化及其活性成分研究

以桑葚渣为原料,研究了桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂的分离纯化方法及其成分。以α-淀粉酶抑制率为指标,对比了5种树脂(AB-8、S-8、D101、NKA-9和HZ-806)对桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂静态吸附和解吸的影响,从而筛选出适于分离α-淀粉酶抑制剂的大孔树脂;以此为基础,对桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂的分离、纯化参数,如上样流速、洗脱剂体积分数、洗脱剂流速进行优化;利用高相液相色谱分析不同体积分数(10%、30%、50%、70%、90%)乙醇洗脱液中的成分,以期探明桑葚渣中具有α-淀粉酶抑制活性的成分。结果表明:AB-8大孔树脂适于分离桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂,分离纯化最佳工艺为上样流速12 mL·min~(-1),70%体积分数乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱剂流速24 mL·min~(-1)。通过分析不同体积分数乙醇洗脱液中的物质组成及其对α-淀粉酶的抑制活性发现,槲皮苷的质量浓度变化与洗脱液对α-淀粉酶的抑制率呈相似趋势,推测其可能是桑葚渣水提物中α-淀粉酶抑制活性的主要贡献因子。     

大孔树脂在纯化杜仲总黄酮中的应用

为确定大孔树脂分离杜仲总黄酮的最佳工艺条件,以吸附率及解吸率为考察指标,确定最佳型号树脂、静态和动态吸附及解吸的相关影响因素.结果表明,D-100型大孔树脂时杜仲总黄酮有良好的吸附性,其吸附分离的工艺条件的药液浓度为0.4mg·mL-1,以2mL·min-1吸附速率进行吸附,5倍柱体积70%乙醇,洗脱速率为1 mL·min-1时洗脱效果最佳.该方法简单易行,分离效果好,适于杜仲总黄酮的分离纯化.     

紫丁香多酚提取工艺优化及抗氧化活性的研究

以紫丁香为原料,对紫丁香多酚的提取及抗氧化活性进行了研究,得到最适提取工艺条件为:乙醇浓度55%、料液比1∶50、浸提温度70 ℃、浸提时间50 min,此工艺条件下紫丁香多酚的得率为(1.73±0.05)mg/g。采用生物活性追踪法研究发现紫丁香多酚中抗氧化活性最强组分的极性为弱极性,当这部分样液质量浓度为70 μg/mL时,总还原能力为0.64±0.01,DPPH自由基的清除能力为(79.44±0.67)%。研究发现经人工胃液处理后,紫丁香多酚抗氧化活性最强组分的抗氧化能力上升,而经人工肠液处理后其抗氧化能力下降。      

高效液相色谱法检测土壤中氧化乐果残留

采用高效液相色谱法优化了土壤中的氧化乐果残留测定条件,优化结果为:色谱柱为Inertsil QDS-SP4.6*250mm,流动相为甲醇/水(V/V=10/90),溶剂为超纯水,检测波长210nm,柱温25℃,进样量为20μL,总流速1.0mL·min~(-1);氧化乐果在0.1~10.0μg·mL~(-1)范围内,其质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(R~2=0.9992),最低检测限0.1μg·mL~(-1)。采用振荡提取法,提取剂为丙酮和乙酸乙酯,提取后的溶液以弗罗里硅土为固相萃取柱,淋洗剂为丙酮/乙腈(1/3)。采用上述方法对土壤样品进行测定,加标回收率为在70%~120%,相对标准偏差在2.08%~8.08%,说明该方法的准确度和精密度均符合农药残留分析的要求,适合土壤中氧化乐果的残留量检测。     

红松种鳞多酚超声波辅助提取优化工艺及其抗氧化性研究

采用超声波辅助法提取红松种鳞多酚类物质以高效获取具有抗氧化活性的多酚。以多酚得率、DPPH·清除率为指标,通过单因素试验,研究超声时间、超声温度、超声功率对多酚得率及其抗氧化活性的影响。在单因素试验的基础上,以多酚得率为响应值,采用Box-Benhnken法设计三因素三水平的响应分析试验。结果表明:超声波辅助提取红松种鳞多酚的数学模型回归显著,最佳提取条件为:超声时间52 min、超声温度53 ℃、超声功率300 W。在此条件下,多酚得率可达27.80 mg/g,多酚得率与同温度水浴240 min得率相同,提取时间缩短2 h。此条件下提取的松多酚对DPPH·清除的IC50值为20.72 μg/mL;对羟自由基清除率IC50值为20.69 μg/mL;对超氧阴离子清除率的IC50值为259.71 μg/mL,且具有较高的总还原能力。      

响应面法优化樟子松树皮松多酚纯化工艺研究

为了促进松多酚资源的综合利用,以樟子松树皮松多酚为原料,采用静态吸附和动态吸附实验从9 种大孔树 脂中筛选出适合纯化松多酚的大孔树脂,利用Box-Benhnken 设计对樟子松树皮松多酚初级纯化工艺条件进行优 化。结果表明:樟子松树皮松多酚初级纯化的最佳条件为上样液浓度2郾5 mg/ mL、上样液体积28 mL、洗脱速率10 mL/ min、洗脱剂乙醇浓度51.6%、径高比1∶27.3。优化后樟子松树皮松多酚纯度可达到69.23%。由此可知,AB鄄8 大孔树脂能较好地纯化富集樟子松松多酚。      

解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754产纤维素酶和淀粉酶特性及发酵条件优化

采用淀粉平板和羧甲基纤维素钠（CMC-Na）平板从选取的140株芽胞杆菌中初筛出8株具有产纤维素酶和淀粉酶复合酶芽胞杆菌,经酶活力测定解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754（Bacillus amyloliquef aciens）具有较高的淀粉酶、纤维素酶活力。通过研究解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754的生长、产酶曲线以及酶学特性,确定在发酵28 h后菌体生长进入稳定期,培养44 h时发酵液中活菌数达到最大为4.41×109 cf u · mL -1,在36 h时纤维素酶、淀粉酶均达到酶活最高峰,酶活分别为135.8、1543.3 U · mL -1;纤维素酶反应最适p H值为5.5、最适温度为50℃,Vmax为5.14×10-3 mg · mL -1· min-1、 Km值为7.71×10-1 mg · mL -1;淀粉酶反应最适pH值为5.5、最适温度为55℃,Vmax为3.35×10-2 mg · mL -1· min-1、 Km值为6.03×10-3 mg · mL -1。采用3因素7水平,即U 7（73）均匀设计法优化解淀粉芽胞杆菌产酶条件,确定产纤维素酶、淀粉酶的最优条件均为：初始pH值6.2、培养温度37.5℃、转速180 r · min-1,优化后解淀粉芽胞杆菌 FJAT-8754纤维素酶活力为202.9 U·mL -1、淀粉酶活力为2392.9U·mL -1。     

山核桃仁多酚提取工艺及其抗氧化活性研究

以山核桃(Carya cathayensis)仁为材料,采用单因素试验和正交试验辅助超声波提取其中的多酚,确定多酚提取的最佳工艺,采用FRAP、DPPH和ABTS 3种方法测定了山核桃仁多酚的抗氧化能力并用Folin-Ciocalteu法测定其总酚含量。结果表明,多酚提取的最佳工艺组合为料液比1∶50(g∶m L),乙醇体积分数30%,超声时间20 min,提取温度35℃。FRAP、DPPH和ABTS法测得山核桃仁多酚的抗氧化活性分别为108.94、184.71和175.92μmol Trolox/g。山核桃仁多酚是较好的抗氧化剂。     

响应面优化热浸提法提取石榴皮总多酚的工艺研究

[目的]研究石榴皮中总多酚的热浸提最佳工艺条件并测定其含量。[方法]以石榴皮为原料、纯水为浸提溶剂加热浸提石榴皮中总多酚,通过单因素试验探究了石榴皮总多酚提取率随热浸提温度、时间、料液比以及提取次数4个客观因素的变化规律,并用响应面分析法优化提取工艺,采用Folin-Ciocalteu比色法测定石榴皮总多酚含量。[结果]通过Box-Benhnken响应面分析试验确定以热浸提法提取石榴皮总多酚的最佳工艺为热浸提温度45℃、时间30 min、料液比1∶20(g∶mL)、提取次数为3次,4个因素对石榴皮总多酚提取率的影响顺序依次为温度、料液比、提取时间、提取次数,并以此优化工艺进行试验,所得总多酚提取率为17.11%。[结论]采用热浸提工艺提取石榴皮总多酚并用响应面分析法优化试验,在保证快速、高效的同时也具有节能、不破坏有效成分的优势,以纯水作为浸提溶剂更是避免了溶剂残毒问题,极大地提高了其安全性,因此也拓宽了极具生物活性的石榴皮多酚在生产生活领域中的应用。     

石榴花中多酚、黄酮及萜类物质同步提取工艺优化

为更有效地利用石榴(Punica granaum L.)花中多种活性成分,以石榴花为原料,利用乙醇溶剂浸提法,在单因素试验的基础上选择提取温度、提取时间、液固比、乙醇体积分数4个因素进行正交试验,优化了石榴花中3种活性物质同步提取工艺。结果表明,影响石榴花中多酚、黄酮及萜类物质同步提取的因素大小顺序为提取温度提取时间乙醇体积分数液固比,其最优的工艺条件为60%乙醇溶液作为提取溶剂,液固比20∶1(m L∶g),85℃条件下提取2.0 h;在此条件下多酚、黄酮及三萜类物质的提取率分别是22.19%、6.53%、0.94%。石榴花中多酚、黄酮及萜类物质可以同步提取出来,可有效提高石榴花资源的利用率。     

番茄青枯病植物疫苗菌株FJAT-1458的培养条件优化及发酵过程状态参数研究

对番茄青枯病植物疫苗菌株FJAT-1458进行培养条件优化和发酵过程状态参数研究。采用摇瓶培养和单因素试验研究菌株FJAT-1458的培养条件,确定最适培养基为SPA(蛋白胨5g·L~(-1),蔗糖20g·L~(-1),KH2PO40.5g·L~(-1),MgSO40.25g·L~(-1)),最适培养温度为30℃,250 mL三角瓶最适装液量为35 mL。用50L发酵罐发酵FJAT-1458,发酵过程中菌体数量呈现先升后降的变化趋势,FJAT-1458的生长可分为4个时期:0~6h为发酵适应期、6~36h为对数生长期、36~60h为稳定生长期,72h后为消亡期。发酵过程中,菌体的致病性指标-弱化指数变化小,介于0.832~0.855,方差分析表明其差异不显著,P0.05;发酵液pH值从7.23上升至8.78;菌体细胞为短杆状,大小为(1.0~1.5)μm×(0.5~0.8)μm,随着发酵进程,细胞颜色变深,发酵后期细胞开始变形、裂解。     

大孔树脂纯化甜茶多酚及其对α-葡萄糖苷酶抑制活性和DPPH·抗氧化性的研究

为了从甜茶中得到降血糖和抗自由基氧化的活性成分,通过4种不同极性的大孔树脂对甜茶多酚的静态吸附-解吸性能研究,筛选出HPD-826树脂,探讨其动态纯化甜茶多酚工艺条件;采用不同极性有机溶剂对HPD-826树脂纯化的甜茶多酚进行萃取,测定各相萃取物的降血糖和抗氧化能力.结果表明:HPD-826树脂纯化甜茶多酚的优化工艺条...