铁皮石斛茎段类原球茎的诱导及植株再生

以铁皮石斛幼嫩的带节茎段为外植体,通过研究植物生长调节剂对类原球茎诱导、增殖和分化的影响,筛选出适宜铁皮石斛类原球茎植株高效再生的条件。结果表明:类原球茎诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+土豆泥60 g/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.5 g/L,茎段接种45 d后,类原球茎诱导率为97.78%;类原球茎增殖和分化的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,培养30 d,增殖倍数为7.94,培养至60 d,丛生芽诱导率为97.33%;再生苗在MS+NAA 0.5 mg/L培养基中培养30 d,生根率达到100%。     

铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

[目的]获得铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）原球茎组织培养的最佳培养基配方。[方法]用正交试验筛选出6-BA、NAA、KT最佳的浓度配比,并考察各因素对铁皮石斛原球茎增殖率的影响。[结果]铁皮石斛原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT。[结论]该研究为工业化生产铁皮石斛原球茎及其有效成分,推进铁皮石斛工厂化育苗奠定了基础。     

铁皮石斛茎段快繁技术研究

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)带节茎段为外植体,比较了不同消毒方法、培养基、激素、天然有机添加物对丛生芽诱导、增殖和生根的影响,建立了铁皮石斛茎段无性快繁体系。结果表明:茎段外植体最佳消毒方法为 75% C2H6O 30 s+0.1% HgCl28min,污染率为 24.45%,发芽率为 62.22%;诱导腋芽的最佳激素组合为 2.0 mg·L-16-BA+1.0 mg·L-1NAA,腋芽诱导系数为 1.65;最适合铁皮石斛丛生芽增殖的培养基为 Hyponex2+1.5 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 NAA+20%香蕉泥,增殖系数为 5.46;最佳生根激素组合为 1.0 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-1IBA,生根率为 95%。     

铁皮石斛高效再生体系研究与应用

以原球茎为实验材料,对影响铁皮石斛再生体系的主要影响因素进行试验,建立铁皮石斛在生产中的高效再生体系。试验结果表明,在基本培养基MS、Fonnesbech和N6中,最适合的基本培养基为MS;原球茎最佳增殖培养基为MS＋6-BA0．75mg／L＋NAA0．2mg／L＋4．0％白糖,接种35d后原球茎增殖倍数为4．19;最佳分化培养基为Ms＋6-BA0．3mg／L＋3．0％白糖,分化率为74％。分化出的丛芽在生根培养基MS＋AC0．05％＋白糖3．0％中,28d生根率达到87％。     

铁皮石斛原球茎的增殖培养研究

为探索最适宜铁皮石斛原球茎增殖的固体培养基配方,以获得高质量的组培苗,为工厂化育苗提供技术支撑,在相同的实验室培养条件下,把同一阶段的原球茎接种于不同激素比的4种培养基中,培养周期为60 d,每隔15 d取样检测1次,对不同生长状况的试验结果进行分析研究.结果表明,在基本培养基1/2 MS中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA、0.5 mg/L的NAA和浓度为20%的马铃薯提取液进行固体培养,铁皮石斛原球茎的增殖效果好.     

铁皮石斛原球茎液体悬浮培养研究进展

铁皮石斛是我国传统的名贵中药,具有很高的药用价值。为了解决铁皮石斛组织培养中存在的组培苗生产成本高、移栽苗成活率低等问题,铁皮石斛原球茎悬浮培养的研究日益增多。从影响原球茎增殖和石斛多糖积累的因素及石斛多糖药理研究等方面阐述了关于铁皮石斛原球茎悬浮培养的研究概况。     

卷丹的原球茎诱导及植株再生

以卷丹(Lilium lancifolium)的鳞茎、叶片和珠芽为外植体,建立了卷丹快速繁殖的植株再生体系,探讨了不同外植体、培养基对卷丹原球茎诱导、分化的影响。结果表明,鳞茎是最适合诱导原球茎的外植体,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA+1.00 mg/L NAA;诱导原球茎的最佳培养基为MS+0.50 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+1.00 mg/L 2,4-D;较适合原球茎出芽的培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,较适合不定芽生根的培养基为MS+0.50 mg/L NAA。     

NAA和KT对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响

为探讨铁皮石斛原球茎再生的理想培养基,以铁皮石斛原球茎为试材,研究了NAA和KT对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响。结果表明：铁皮石斛原球茎增殖较理想的培养基为MS＋KT1.0 mg.L-1＋NAA0.5 mg.L-1。铁皮石斛原球茎分化较理想的培养基为MS＋KT 1.0 mg.L-1＋NAA 0.1 mg.L-1。     

铁皮石斛原球茎与野生铁皮石斛多糖的抗菌及体外抗氧化活性比较

【目的】比较铁皮石斛原球茎多糖与野生铁皮石斛多糖的抗菌及体外抗氧化活性,为铁皮石斛组织培养物的应用提供依据。【方法】以大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、白色念珠菌(Candida albicans)为供试菌,用抑菌圈法测定2种铁皮石斛多糖对目标菌的抗菌活性;分别用羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O-·2)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)法和硫代巴比妥酸法(TBA法)结合分光光度法检测2种铁皮石斛多糖清除·OH、O-·2和DPPH·及抗脂质过氧化的能力,比较2种铁皮石斛多糖的抗菌及体外抗氧化活性。【结果】铁皮石斛原球茎多糖与野生铁皮石斛多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌均具有显著的抑制作用,且野生铁皮石斛多糖的抑菌效果比铁皮石斛原球茎多糖优;2种铁皮石斛多糖对·OH、O-·2和DPPH·均有极显著的清除作用,对小鼠肝组织脂质过氧化均有极显著的抑制作用,且野生铁皮石斛多糖比铁皮石斛原球茎多糖效果更好,2种铁皮石斛多糖的抗菌及抗氧化活性与多糖质量均存在剂量效应关系。【结论】与野生铁皮石斛多糖相比,铁皮石斛原球茎多糖在抗菌、抗氧化能力方面虽存在一定差距,但仍具有进一步开发的价值。     

浅析铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

铁皮石斛为兰科多年生附生草本植物,但是由于人类的大规模采集,在其需求量急剧增长的情况下,人工的培育变得尤为重要,通过研究铁皮石斛的原球茎增殖的培养基配方,发现1/2MS+28g葡糖糖+1g活性炭+7g琼脂+1.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA最适合于铁皮石斛原球茎的增殖。     

铁皮石斛规模化种植关键技术

铁皮石斛是一种名贵中草药材,因其繁殖率低、生长缓慢,难以实现规模化种植。作者通过为期8年的试验攻关,总结出铁皮石斛规模化种植各个阶段的关键技术：注重道地优异种质的鉴定与选择,以红皮居群或软脚类型为主;选择野生种质果实种子作组培外植体,继代增殖控制在6～8代以内;强化组培苗瓶中炼苗适应及出瓶假植驯化,培育壮苗;选择适宜的栽培方式和基质配方,移栽定植于每年3～5月或7～8月进行,大棚栽植密度为52.5万～60.0万丛/ha;科学肥水管理,及时摘除花芽,适时采收,合理加工。     

铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖

以铁皮石斛抗寒品种茎段为外植体,运用组织培养技术建立铁皮石斛无性快繁体系,筛选出铁皮石斛快繁的最佳培养基。结果显示,以铁皮石斛茎段为外植体诱导原球茎,最佳诱导培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1),诱导率为66.67%。原球茎最佳分化培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),苗整齐健壮,叶片大而浓绿。试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),生根率为100%。驯化移栽基质为碎砖瓦15%+松树皮50%+刨花25%+羊屎10%。     

铁皮石斛组织快繁及移栽培养1）

为了筛选出铁皮石斛的最佳组织培养培养基、最佳移栽基质、最适菌剂种类和施用方式,选取具有1～2片叶片的铁皮石斛分化苗在3种常用组培培养基上培养,11周后,统计平均株高、茎粗、根长、鲜质量的增长量、平均产生新根数、新孽数;选取相同长势的铁皮石斛组培苗,在2种常用兰科植物培养基质上移栽,将3株优良兰科菌根真菌制成4 g· L－1的单一液体菌剂,对铁皮石斛移栽苗分别进行蘸根、灌根,90 d后,统计成活率、平均鲜质量、株高、茎粗增长量、平均新根数。结果显示：MS＋0．34 g· L－1KNO3＋100 g· L－1土豆提取液＋2．4 g· L－1植物凝胶＋30 g· L－1蔗糖培养基上生长的铁皮石斛苗平均株高增长量、平均鲜质量增长量、平均新根数、平均分蘖数极显著大于其他两组处理;移栽于V（珍珠岩）∶V（仙土）∶V（松树皮）∶V（活苔藓）＝1∶1∶1∶2基质上的铁皮石斛幼苗除平均新芽数略低于移栽于V（花生壳）∶V（石灰岩）∶V（蛭石）∶V（活苔藓）＝1∶1∶1∶2基质上的铁皮石斛幼苗外,其他生长指标均高于后者,其中新根数显著高于后者;施用Dh57菌剂的铁皮石斛幼苗在成活率、平均新根数、生长量方面显著高于施用Do60、 Ph03菌剂的铁皮石斛幼苗,在株高、茎粗增长量方面极显著高于另外4组处理;施用 Ph03菌剂的铁皮石斛幼苗平均新芽数极显著高于施用Dh57、D6o0菌剂的处理组;同一菌剂蘸根处理的幼苗生长指标均高于灌根处理。     

铁皮石斛栽培技术研究

铁皮石斛是名贵中药材。通过试验筛选铁皮石斛栽培最佳的基质配比、光照强度及肥料浓度。结果表明:最佳基质配比为树皮∶竹炭∶水苔=6∶2∶2,遮荫率为60%遮荫,肥料浓度为2 000倍液。     

铁皮石斛组织培养快速繁殖技术

以铁皮石斛的未成熟种子作为外植体,成功建立了无菌材料,研究了不同用量的椰子水（CW）、马铃薯泥和NAA等影响因子对铁皮石斛增殖培养的影响.结果表明：在1/2 MS ＋φ（CW） =10％＋NAA 0.1 mg·L^-1的培养基上,原球茎增殖效果良好,增殖系数高达145.28;铁皮石斛组培苗在壮苗培养阶段对外源IBA,NAA和IAA的质量浓度变化均不敏感,在0～2.50 mg·L^-1范围内,植株的长势长相差异不明显,其中,IBA质量浓度为0.75 mg·L^-1和NAA质量浓度为0.5 mg·L^-1时,植株的长势相对要好一些,而且个体间相对较均匀;1/2 MS＋w（香蕉泥）=10％＋NAA 1.0 mg·L^-1的培养基生根壮苗效果较好.     

铁皮石斛无菌播种成苗体系优化

以铁皮石斛种子为起始材料,研究了其原球茎萌发、壮苗、生根出苗环节中一些关键影响因子,建立了铁皮石斛种子快速成苗组培技术体系。研究发现,培养基中加入6-BA会抑制原球茎的发育,若整个培养阶段用直径为9 cm的培养皿,起始播种密度以8 000粒种子为宜,冻干香蕉粉对于种子的萌发是必需的,以5~10 g·L^-1为宜;壮苗阶段,接种密度以100~120株·瓶^-1为宜,培养基及光质对铁皮石斛壮苗影响远小于接种密度;生根阶段,利用3 000 K LED白光代替荧光灯照明,在不降低组培苗茎粗的前提下,可有效提高组培苗株高,增加优质苗比例。研究结果还表明,冻干香蕉粉可完全代替剥皮香蕉作为有机添加物用于铁皮石斛组培苗的培养。整个培养过程中,培养温度(24±2) ℃,种子萌发阶段光照时间10 h,光照强度25~30 μmol·m^-2·s^-1;其余培养阶段均光照时间12 h,光照强度40 μmol·m^-2·s^-1左右。     

霍山石斛拟原球茎生长及植株再生过程中微观结构与元素的变化

采用SEM/EDS技术,研究霍山石斛拟原球茎生长及植株再生过程中结构和元素的变化,分析其发育过程及药效成分。结果表明：适当的组培条件会使外植体表层具有分生能力的细胞不断分裂和增殖形成拟原球茎和次拟原球茎。其中拟原球茎分化出芽和根,完成幼苗的形态发育。30d后幼苗的根无明显的根毛和根被组织;茎表皮多纵向皱褶,横切面边缘具波状棱角,细胞内含物黏液状,外韧有限维管束散生;等面叶,四列型气孔只分布于下表皮,保卫细胞肾形。拟原球茎形成期,含有较多的Na、S、K、Al、Si、Fe,分化期P、Cl、Mn、Ca增多,幼苗所含K、Ca增幅较大,其他元素减少或变化不明显。     

铁皮石斛壮苗生根与移栽种植研究

[目的]筛选出较适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基和移栽基质及移栽管理方式.[方法]以已分化出真叶的丛生苗为试材,通过研究不同植物激素配比和有机添加剂对铁皮石斛壮苗生根的影响,筛选出促进铁皮石斛试管苗快速生根和壮苗的培养基,同时对铁皮石斛试管苗的移栽进行全面研究,设置不同的移栽基质及移栽管理方式,以提高试管苗的脱瓶移栽成活率.[结果]适宜铁皮石斛生根的培养基为1/2MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+ IBA 2.0 mg/L;适宜铁皮石斛壮苗的培养基为1/2MS+ NAA 0.1 mg/L +6-BA0.5 mg/L;适宜铁皮石斛生根壮苗的有机添加剂为20％香蕉汁;适宜铁皮石斛移栽种植的管理方式为单栽,其中运用单栽管理方式适合铁皮石斛移栽种植的基质为1/3泥炭+1/3松树皮+1/3兰石,60d后成活率达80.0％.[结论]建立一套适合铁皮石斛壮苗生根与移栽种植的方法,为铁皮石斛的产业化大规模种植奠定基础.     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究

从大花蕙兰(Cymbidium hybridum)试管苗取材,诱导原球茎,建立植株再生体系,分析了不同激素及其浓度对原球茎诱导、增殖和植株生根的影响.结果表明,不定芽比叶片更容易诱导出原球茎;生长素NAA对原球茎的诱导效果好于2,4-D,最适合原球茎诱导的激素组合为1.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA;原球茎增殖培养基中添加1.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA增殖效果较好,增殖系数可达7.90;最适生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖.