紫锥菊根中菊苣酸的提取分离及其分子印迹聚合物的制备

菊苣酸为天然药物紫锥菊中有效酚酸类化合物,本试验旨在研究紫锥菊根中菊苣酸提取纯化的新方法。试验采用超声辅助提取法对紫锥菊根粉末进行提取,所得粗提物再用葡聚糖凝胶LH-20为固定相,80%、60%及40%甲醇为流动相,进行反复提取,得到菊苣酸单体。再将制得的菊苣酸单体作为模版分子,α-甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基烯酸酯为交联剂,制备菊苣酸分子印迹聚合物,并应用此分子印迹聚合物为固定相,对紫锥菊根粉进行富集纯化。结果显示,经葡聚糖凝胶LH-20提取分离后,高效液相色谱法测定菊苣酸含量为90.22%。紫锥菊根粉经分子印迹聚合物富集纯化后,可同时富集母核结构相同的菊苣酸和咖啡酸。由此可见,本方法可用于紫锥菊根中菊苣酸的提取分离及其分子印迹聚合物的制备。     

紫锥菊提取工艺研究及有效成分含量测定

探索紫锥菊的乙醇法最佳提取工艺,并对菊苣酸含量进行测定。试验选取紫锥菊头状花序,用乙醇进行提取,采用L9(34)正交试验、以有效成分菊苣酸的含量为指标优选工艺参数。结果表明,紫锥菊的乙醇法最佳提取工艺条件为:料液比15倍量、乙醇浓度60%、提取温度90℃、提取1 h。以菊苣酸标准品为对照,以高效液相检测菊苣酸含量,色谱柱:Phenomenex C18110A(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(38∶62),流速:1.00 m L/min,紫外波长:326 nm,HPLC测定纯度为48.41%。此法提取工艺稳定、可行,测定方法简便准确,重复性好,可用于紫锥菊中菊苣酸的质量控制。     

超声波法提取紫锥菊中菊苣酸的工艺优化研究

利用超声波技术对紫锥菊主要有效成份菊苣酸提取工艺条件进行了研究。在提取过程中采用单因素试验和正交试验分析了提取时间、提取次数、提取溶剂用量等对紫锥菊菊苣酸含量有主要影响的几个因素,确定了紫锥菊菊苣酸的最佳提取工艺条件。结果表明,超声波提取紫锥菊菊苣酸的最佳工艺条件为:以体积分数为55%的乙醇作为提取剂,提取时间45 min、提取次数为2次、乙醇用量为紫锥菊药材的8倍,提取物干膏得率为12.2%,菊苣酸含量为1.2%。所确定的最佳提取工艺稳定可行,适于工业化生产。     

添加菊苣酸对牦犊牛血清淋巴细胞转化率和腹泻发生率的影响初探

通过早期断奶犊牛补饲后投喂不同剂量的紫锥菊提取物菊苣酸,定期对犊牛检测牦犊牛淋巴细胞的转化率进行测定,并统计各试验组犊牛腹泻病的发生情况,探究紫锥菊提取物菊苣酸对早期断奶犊牛免疫功能的影响,以期为其今后临床实践提供理论依据。结果表明:一定剂量的菊苣酸能显著提高犊牛淋巴细胞转化率(P 0. 01),可有效预防犊牛腹泻的发生,对犊牛的免疫功能具有一定的促进作用。     

紫锥菊药材的炮制工艺研究

为了研究紫锥菊鲜药材的炮制工艺,使鲜药材最大程度地保留其有效成分,经长期摸索研究,试验采用常压蒸制法对紫锥菊鲜药材进行炮制处理,以菊苣酸含量为考察指标,通过对不同蒸制时间、烘干温度等因素的比较,确定紫锥菊鲜药材的最佳炮制工艺。结果表明:紫锥菊鲜药材洗净、切段后常压蒸制20 min及90℃烘干,与直接晒干相比,菊苣酸的含量提高了104%。说明该炮制方法适用于紫锥菊鲜药材。     

紫锥菊提取物菊苣酸对高寒放牧牦牛抗氧化能力的影响

旨在研究菊苣酸对高寒放牧牦牛抗氧化能力的影响。选取年龄、胎次和体重接近的40头健康牦牛,随机分为4组,对照组自由放牧,1、2、3组每头每天清晨分别投喂100、150和200 mg的菊苣酸胶囊后自由放牧,连续投喂60 d,分别在第0、15、30、45天清晨空腹颈静脉采血。测定血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果表明:投喂紫锥菊提取物显著提高放牧牦牛血清T-AOC能力、GSH-Px活性(P0.05),同时显著降低血清中MDA的含量(P0.05),紫锥菊提取物菊苣酸一定程度上提高放牧牦牛的抗氧化能力。     

超高效液相色谱法测定紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量

为了快速测定紫锥菊根末中主成分单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量建立了超高效液相色谱法（UPLC）。采用ACQUITY UPLCTM C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm)为分离柱,柱温：35℃;以乙腈-0.4%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;流速：0.35 mL/min;进样量：1 μL;检测波长为330 nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对单咖啡酰酒石酸和菊苣酸进行定性定量检测。单咖啡酰酒石酸在0.5~25 μg/mL的范围内线性关系良好（R2>0.999）;方法检出限为0.5 μg/mL,方法定量限为1 μg/mL; 菊苣酸在1~50 μg/mL的范围内线性良好（R2>0.999）;方法检出限为1 μg/mL,方法定量限为2 μg/mL,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的定性定量检测。     

高效液相色谱法测定加味麻杏石甘颗粒剂中盐酸麻黄碱的含量

建立加味麻杏石甘颗粒剂中盐酸麻黄碱的含量测定方法并测定其含量。采用C18色谱柱,以0．01mol／L磷酸二氢钾（用磷酸调pH至2．5）-甲醇（97：3）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为210nm。盐酸麻黄碱在0．2～1．2μg范围内线性关系良好,r=0．9986;平均回收率为100．36％,RSD为1．38％（n=5）。     

紫锥菊提取物——菊苣酸对高寒放牧牦牛血常规的影响

为了研究紫锥菊提取物——菊苣酸对高寒放牧牦牛血常规的影响,试验选取40头健康牦牛,随机分为4组,空白对照组自由放牧,试验1组、试验2组、试验3组每头牦牛每天清晨分别投喂100,150,200 mg的菊苣酸胶囊后自由放牧,进行为期60 d的试验,并分别于投喂菊苣酸胶囊第0,15,30,45天空腹颈静脉采血测定血常规指标。结果表明:添加菊苣酸能显著增加牦牛血液中白细胞数和红细胞数,升高血红蛋白含量,对牦牛机体适应高海拔、低氧环境,提高免疫力和抵抗炎性反应具有积极作用。     

低氧环境紫锥菊提取物-菊苣酸通过PPAR信号通路对SD大鼠肝脏组织脂肪合成的影响

为探究紫锥菊提取物-菊苣酸在低氧环境下影响SD大鼠肝脏脂肪代谢的分子机制。选取60只健康雄性SD大鼠(6～8周龄,(192±7.35)g)(P>0.05),适应性喂养2周后,随机分为对照组、不同浓度CA组(10、20、40 mg/kg),每组15只,连续灌胃49 d。4组大鼠均自由采食和饮水,灌胃第50天对SD大鼠进行麻醉处理后,采集肝脏组织,并通过油红O染色法计算各组大鼠肝脏组织油滴面积占总面积的百分比以及测定PPAR信号通路关键因子PLIN2、PLIN5、PPARα、PPARγ、RXRα的表达情况。油红O染色结果显示：与对照组相比,添加紫锥菊提取物-菊苣酸组极显著降低油红O染色面积(P<0.01);PPAR信号通路关键因子表达结果显示：与对照组相比,添加紫锥菊提取物-菊苣酸组显著降低PLIN2、PLIN5、PPARα、PPARγ、RXRα的mRNA及蛋白表达量(P<0.05),其中以添加10 mg/kg紫锥菊提取物-菊苣酸组对PLIN2、PLIN5、PPARα、PPARγ、RXRα的mRNA及蛋白表达量效果最显著(P<0.05)。结果表明,紫锥菊提取物-菊苣...     

紫锥菊根中菊苣酸提取工艺及对氧化应激肠道细胞的保护作用研究

【目的】优化紫锥菊根中菊苣酸提取工艺,并测定菊苣酸在肠道细胞中的抗氧化效果。【方法】试验选用有机溶剂乙醇作为紫锥菊根粉末(80目)提取溶剂,对提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、提取次数以及原料与溶剂的比例等因素进行分析,得到每个因素下菊苣酸得率和该因素的对应曲线,再在单因素基础上,选择溶剂浓度(30%、40%、50%)、提取温度(60、70、80℃)、提取时间(1、2、3 h)和料液比(1∶12、1∶15、1∶18)4个因素3个水平设计正交试验。用不同浓度H₂O₂(100、200、400、600、800、1 000μmol/L)处理人结肠腺癌细胞(Caco-2)与猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)建立氧化应激模型。分别使用不同浓度菊苣酸(0、100、200、400、600、800、1 000μmol/L)处理氧化应激前后的细胞24 h,应用MTT法,分别测定菊苣酸对两种肠道细胞氧化应激的保护和缓解效果。【结果】菊苣酸最佳提取条件为：50%浓度的乙醇在70℃下采用1∶18的料液比,超声辅助提取2 h,得率为1.89 mg/g。细胞抗氧化试验结果显...     

RP—HPLC法测定加昧白头翁颗粒中秦皮乙素的含量

采用KromasilC18柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0．1％磷酸（12：88,v／v）,流速为1．1mL／min,紫外检测波为334nm,柱温25℃,建立了加味白头翁颗粒剂中秦皮乙素的反相高效液相层析含量测定方法。在所选定的色谱条件下,秦皮乙素各组与辅料、溶剂及复方提取物中其他成分的峰分离良好,秦皮乙素在0．2160-1．2960μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9997,n=6）,平均回收率为98．27％,RSD为1．16％（n=6）。该方法简便、灵敏、准确,可用于加味白头翁颗粒剂的质量控制。     

新兽药紫锥菊根主要活性成分和生理作用分析

紫锥菊根富含菊苣酸、单咖啡酰酒石酸、挥发油、多酚类等活性成分,具有抗炎、抗病毒、提高免疫增强的药理作用,在畜禽绿色养殖方面具有广阔的应用前景,本文从紫锥菊根主要活性成分和生理作用进行分析,为紫锥菊根新兽药的应用提供理论支撑。     

高效液相色谱法测定芩黄颗粒中甘草酸的含量

为了建立芩黄颗粒中甘草酸的含量测定方法并测定其含量,用高效液相色谱法（HPLC）测定芩黄颗粒中甘草酸的含量。采用C18色谱柱,以甲醇-0．2mol／L醋酸铵（65：34,醋酸调节pH值至4．5）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为250nm。结果显示甘草酸在0．499～7．976μg之间呈现良好的线性关系,r=0．9999,平均加样回收率为99．3％,RSD=0．59％（n=6）。本方法重复性好,能准确测定芩黄颗粒中甘草酸的含量。     

紫羊茅和多年生黑麦草不同生长阶段粗蛋白和氨基酸含量动态分析

试验以紫羊茅和多年生黑麦草为研究对象,分析测定了其在分蘖期、拔节期、扬花期和成熟期4个不同生长阶段的粗蛋白和17种氨基酸含量。结果表明：紫羊茅和多年生黑麦草CP及TAA随生长阶段均呈下降趋势,几乎呈直线下降的趋势;17种氨基酸中,16种氨基酸均随生长阶段呈下降趋势,仅谷氨酸是随生长阶段呈现“高-低-高”的变化趋势。紫羊茅和多年生黑麦草赖氨酸含量在分蘖期最高（分别为0．87％、0．99％）,成熟期最低（分别为0．34％、0．39％）。上述结果表明,紫羊茅和多年生黑麦草中粗蛋白和氨基酸含量受生长阶段影响较大;2种牧草应在扬花期收割最佳。     

分光光度法测定莫能菌素含量

研究了分光光度法测定发酵液中莫能菌素含量的方法。检测波长560nm，以无水甲醇为溶剂，3％香草醛溶液为显色剂，显色温度45℃，显色时间20min，莫能菌素浓度在20～140u／mL范围内与吸光度呈线性关系，相关系数0．9996（n=7），回收率为100．2％，RSD为0．747％（n=9）。     

HPLC测定石榴皮提取物颗粒剂中不同时期鞣花酸含量的变化

采用高效液相色谱法测定了石榴皮提取物颗粒剂在不同时期的有效成分鞣花酸含量的变化。色谱柱PT-230A Colume heater Apollo C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,柱温30℃;流动相为乙腈-1.2%磷酸溶液（20∶80）;检测波长254 nm;流速1.0 mL/min。结果显示,鞣花酸含量测定的线性范围0.52～5.20μg（R2=0.99786）,平均加样回收率为97.8%,RSD为1.6%。样品于2008年3月25日测定的颗粒剂鞣花酸含量为0.495 mg/g,2011年3月25日测定的含量为0.439 mg/g。表明该石榴皮提取物颗粒剂稳定性良好,有效期可达到三年以上。该方法简便、准确,可用于中药石榴皮的质量控制。     

分光光度法测定莫能菌素发酵液中油含量

研究了分光光度法测定莫能菌素发酵液中油含量的方法。检测波长为715nm时,莫能菌素发酵液中油含量在0．4～2．0mg／mL范围内,与吸光度呈线性关系,相关系数0．9999（n=5）,回收率为100．3％,RSD为0．872％（n=9）。     

肤康安洗液HPLC含量测定方法研究

目的：建立HPLC法同时测定肤康安洗液中丁香酚和三白草酮的含量方法：采用HPLC分析方法，色谱柱为KromasilC18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-0．1％磷酸溶液，梯度洗脱；流速为1.0mL／min；检测波长：230nm。结果：丁香酚和三白草酮分别在0．6192-9．2887μg（R2=0．9998）、0—3．2040lug（r2=0．1000）范围内线性关系良好，平均加样回收率分别为97．55％、98．92％，RSD分别为l。27％、1．03％（n=6）。结论：肤康安洗液的HPLC含量测定方法简便、灵敏、准确、重复性好，可用于肤康安洗液的质量控制．     

紫外分光光度法和永停滴定法测定复方磺胺氯达嗪钠粉的含量

采用紫外分光光法测定复方磺胺氯达嗪钠粉中甲氧苄啶含量。试验表明，在10—50μg／mL的浓度范围内，吸收度与浓度呈良好线性关系，相关系数r=0．9995，平均回收率（n=5）为99．7％；RSD=0．55％。用永停滴定法测定复方磺胺氯达嗪钠粉中磺胺氯达嗪钠的含量，平均回收率为99．82％；RSD=0．49％。与高效液相色谱法比较，结果基本一致。