芫荽花叶病病原病毒鉴定

 从芫荽(Coriandrum Sativum L.)花叶病株上分离到一病毒分离物(CMV-Co),汁液摩擦接种和桃蚜(Myzus Persicea)均能传毒。人工摩擦接种可侵染5科21种植物,在黄瓜、心叶烟等植物上引起系统花叶;在苋色藜、昆诺阿藜、豇豆等接种叶片上引起局部枯斑。此病毒的钝化温度为55～60℃,稀释限点为10^-3～10^-4,体外存活期2～3天。部分提纯的病毒最大紫外吸收为258nm,最小吸收为238nm,表现为典型的核蛋白吸收,A260/A280=1.26.SDS-不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒其外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25500道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,CMV-Co与黄瓜花叶病毒有明显的血清学反应:用1.5%醋酸双氧铀负染,电镜观察病毒粒子球形(正二十面体),直径为28～30nm.根据上述特征,CMV-Co是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

红掌炭疽病病原鉴定及室内药剂筛选

通过对红掌炭疽病症状及其病原形态进行观察，并对其病原菌进行分离与纯化、培养及鉴定。确定其病原孢子属于半知菌亚门，腔孢纲，黑盘孢目，胶孢炭疽菌属真菌。室内菌丝抑制结果（培养96h）为50％施保功可湿性粉剂50μg／ml，500μg,／ml和1000μg／ml等3个浓度处理对红掌炭疽病病原菌的抑制作用最明显，抑菌率分别为78％，98％和98％；15％三唑酮可湿性粉剂50雌／ml，500μg／ml和1000μg／ml等3个浓度处理的抑菌率分别为36％，71％和82％，其它药剂处理的抑菌率在9％-53％之间。     

红掌细菌性叶斑病的病原鉴定

本文对山东济南商河保护地红掌上发生的1种细菌性病害进行了病原鉴定。通过对红掌上分离的病原细菌进行形态观察、染色试验、致病性测定、生理生化性状等常规细菌鉴定技术,结合细菌16S rDNA序列分析,鉴定该红掌细菌性叶斑病的病原菌为黄单胞菌属地毯草黄单胞菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.cit-ri)。     

红掌细菌性叶枯病的病原鉴定

对来自广东省广州市花卉苗圃场红掌上发生的1种细菌性病害进行了病原鉴定。通过对红掌上分离的病原细菌进行形态观察、染色试验、致病性测定、寄主范围、生理生化性状等常规细菌鉴定技术,结合细菌16S rDNA序列分析,鉴定该红掌细菌性叶枯病的病原菌为地毯草黄单胞菌万年青致病变种(Xanthomonas axo-nopodispv.dieffenbachiae)。     

黑皮果蔗花叶病病原鉴定

在南宁市郊采集到1份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品（NN—Ba2）,经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC—ELISA检测显示NN—Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMVcP基因分别设计合成特异引物,利用RT—PCR对NN—Ba2进行分子鉴定,扩增出大小约900bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN—Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,测序结果在DDBJ上用BLAST进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的核苷酸序列同源性为97．36％～97．77％,根据马铃薯Y病毒科（Potyviridae）病毒种和株系的划分标准,NN—Ba2鉴定为SCMV。田间采集的另外10份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT—PCR检测,证明也感染了SCMV。     

黑皮果蔗花叶病病原鉴定

在南宁市郊采集到l份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品(NN-Ba2),经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC-ELISA检测显示NN-Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMV CP基因分别设计合成特异引物,利用RT-PCR对NN-Ba2进行分子鉴定,扩增出大小约900 bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN-Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,测序结果在DDBJ上用BLAST进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的核苷酸序列同源性为97.36%~97.77%,根据马铃薯Y病毒科(Potyviridae)病毒种和株系的划分标准,NN-Ba2鉴定为SCMV.田间采集的另外10份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT-PCR检测,证明也感染了SCMV.     

云南香料烟花叶病病原分离物的鉴定

从云南保山采集具典型花叶症状的香料烟病株，用病株汁液接种心叶烟，进行单斑分离纯化。电子显微镜观察到杆状病毒粒体（18nm×300nm），三抗体夹心酶联免疫吸附（TAS-EUSA）检测与烟草花叶病毒（Tobaccomma／cv／nu，TMV）抗血清呈阳性反应；用TMV外壳蛋白（CP）基因特异性引物进行RT-PCR扩增，克隆，经序列测定分析，侵染云南保山香料烟的病原分离物CP基因含480个核苷酸，编码159个氨基酸，通过核苷酸和氨基酸序列分析，与TMV-152的相似性最高，核苷酸序列的相似性为98．8％，推导编码氨基酸相似性达到100．0％，亲缘关系最近。根据这些特性，引起云南保山香料烟花叶病的病原分离物是烟草花叶病毒的一个分离物。     

红掌茎基腐病病原鉴定

 1996～1997年云南省热带作物科学研究所1～2年生地栽红掌发生了严重的茎基腐病,致使根、茎、叶柄变褐,叶片黄化,叶柄脱落,植株枯死。从病组织和土壤基质中分别分离到40和33个分离物,经鉴定寄生疫霉Phytophthora parasitica,光孢镰刀菌Fusariumoxyspo-rum为红掌茎基腐的致病菌。     

杭州郊区菜豆花叶病病原的分子鉴定

菜豆黄花叶病毒(bean yellow mosaic virus,BYMV)是菜豆病毒病的一个重要病原,广泛分布于世界各地.该病毒粒子呈线状,通过蚜虫以非持久方式进行传播,也可通过机械传播.BYMV具有马铃薯Y病毒属(genus potyvirus)成员共有的基因组学特性.目前已对多个BYMV分离物基因组全序列或部分序列进行了测定[1～5],其RNA由9 547个核苷酸组成,编码一个由3 056个氨基酸组成的聚合蛋白,此蛋白经裂解产生10个功能蛋白,其中外壳蛋白(CP)由266个氨基酸组成,包含1个天冬氨酸-丙氨酸-氨基乙酸(DAG)序基[1].这个序基是马铃薯Y病毒属成员的一个特征,被认为与蚜虫传播有关,而辅助组分蛋白酶(HC)也被认为与蚜虫传播有关[6,7].与其他马铃薯Y病毒属成员类似,BYMV的3'末端包括了非编码区(3'-UTR),含Poly(A)尾[1].最近我们在浙江杭州郊区发现了菜豆花叶病毒病,本文对其病原作分子鉴定.     

火鹤花上的几种线虫鉴定

记述了从火鹤花根部分离鉴定的咖啡根腐线虫(Pratylenchuscoffeae)、食菌茎线虫(Ditylenchusmyceliophagus)、锡博尔滑刃线虫(Aphelenchoidescibolensis)、蘑菇滑刃线虫(A.composticola)和燕麦真滑刃线虫(Aphelenchusavenae)等5种植物线虫.     

红掌毁灭炭疽菌的分子检测

根据GenBank中炭疽属Colletotrichum不同种的ITS序列差异,设计了毁灭炭疽菌Colletotrichum destructivum的特异性引物F1/ITS4,由此建立的PCR检测体系可以从80个毁灭炭疽菌菌株中扩增得到1条486 bp的特异性条带,而扩增其他近似或相关种的菌株时没有相应的特异性条带.该...     

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培养快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8 min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基分别为1/2MS＋6-BA1.50 mg/L＋2,4-D0.50 mg/L＋NAA0.10 mg/L和1/2 MS＋6-BA1.50 mg/L＋KT1.00 mg/L＋2,4-D0.10 mg/L;最佳愈伤组织继代培养基分别为MS＋6-BA1.00 mg/L＋NAA0.50 mg/L＋2,4-D0.30 mg/L和MS＋6-BA0.50 mg/L＋KT0.50 mg/L＋NAA0.10 mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2 MS＋NAA0.10 mg/L＋IAA0.10 mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。     

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基为1/2MS＋6-BA1.50mg/L＋KT1.00mg/L＋2,4-D0.10mg/L;最佳愈伤组织继代培养基为MS＋6-BA0.50mg/L＋KT0.50mg/L＋NAA0.10mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2MS＋NAA0.10mg/L＋IAA0.10mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。     

喷施ALA对红掌幼苗生长的影响

研究不同浓度的ALA(5-氨基乙酰丙酸)对红掌幼苗生长的影响。结果表明:一定浓度的ALA处理可显著提高红掌叶片叶绿素含量,促进干物质的积累,加快新叶抽生速度,利于茎的横向加粗生长和伸长生长,其中以ALA 300mg/L处理效果最佳。     

利用CTAB法提取红掌不同部位基因组DNA

采用CTAB法,对红掌的叶、叶柄、肉穗花序、佛焰苞、根等5个部位进行基因组DNA提取,利用紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法和RAPD扩增法检测DNA的质量,结果表明,CTAB法适合红掌根和叶的基因组DNA提取,没有蛋白质、酚及色素等杂质的污染,佛焰苞的DNA中有少量蛋白质污染,叶柄DNA中含有较多的蛋白质、酚等杂质,而从肉穗花序中没有提取到基因组DNA。     

红掌细菌性叶枯病病原菌的分离与鉴定

采用组织分离法,从发病的红掌叶片上分离、纯化病原菌,对纯化的病原菌进行菌落形态、致病性、生化特性测定,并对细菌特异基因ABC transporter进行分离及序列分析.结果表明,分离得到的病原菌为地毯草黄单胞菌属细菌,为红掌的致病菌.     

盆栽红掌亚丽桑娜催花技术研究

[目的]探讨喷施不同浓度的磷酸二氢钾和6-苄基嘌呤对亚丽桑那盆栽苗的催花效果。[方法]以亚丽桑那组培穴盘苗为供试材料,喷施不同浓度的磷酸二氢钾和6-苄基嘌呤对亚丽桑那盆栽苗进行催花试验,测量亚丽桑那植株的花芽分化数、叶片数、花枝直径、花掌长度等生物学性状,研究不同药剂处理对亚丽桑那盆栽苗的催花效果。[结果]喷施3mg／L的磷酸二氢钾可促进亚丽桑那组培苗提早开花;3mg／L磷酸二氢钾＋20mg／L6-苄基嘌呤的处理效果最好,花芽分化早、多,成花率高达90％,花枝长且粗壮;当6-苄基嘌吟浓度为40mg／L时,亚丽桑那盆栽苗生长受抑制;6-苄基嘌呤对亚丽桑那盆栽苗的叶片黄化有一定的抑制作用。[结论]该试验获得了提高红掌盆栽质量和开花整齐度的技术,提高了国产红掌盆花的规模化种植水平。     

灰色关联度分析法在红掌基质筛选中的应用

灰色系统理论中的灰色关联度分析法能够全面描述基质处理中的植株生长情况,确定最优处理。本试验对8种无土栽培基质处理与红掌11个生长性状进行关联度分析,以筛选出最优基质配比。结果表明:加权关联度最大的X5,即进口泥炭∶中药渣∶珍珠岩(2∶1∶1),为红掌无土栽培基质最佳配比。     

红掌切花采后冷藏保鲜技术研究

以红掌品种热情(Tropical)为材料,研究采后鲜切花在7、9、11、13、15、17和19℃不同温度下冷藏处理7 d后对其瓶插寿命的影响。结果表明,在11℃以下冷藏处理7 d后其切花出现冻害症状;17℃为红掌鲜切花的最佳冷藏温度,经此温度冷藏处理的鲜切花瓶插寿命达15.1 d,比对照平均延长3.1 d。同时,测定了17℃冷藏处理后的红掌鲜切花的失水量、吸水量、水分平衡值、可溶性总糖含量和丙二醛(MDA)含量变化,分析其与红掌鲜切花寿命和品质的关系。研究结果可为建立红掌鲜切花采后冷藏配套技术提供科学依据。