血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验方法的改进

本实验对原有的各种实验方法进行了较大的改进,以考马斯亮蓝作为染色剂,不仅易脱色,而且电泳图谱色带清晰可辨。     

南疆三种绵羊血清蛋白电泳分析

本研究采用醋酸纤维素薄膜电泳法测定也新疆南部三种绵羊血清蛋白及其各组份的含量。结果表明：新疆南部肉脂兼用型多浪羊血清总蛋白含量高，清球比值低。羔皮型卡拉库尔羊清球比高。但三种绵羊血清总蛋白含量和清球比的差异均不显著。而位于高寒区的肉脂兼用型巴音布鲁克羊γ－球蛋白的含量明显高于其它两种绵羊，差异显著。     

改进点样器对血清蛋白膜电泳分离效果的影响

在醋酸纤维薄膜电泳分离人血清蛋白质实验中,为了使实验取得了廉价、简捷、分离效果更好的效果,改用毛细管以及自制点样器点样,经过多次试验,不仅同时结合GIS-2009(Tianneng)图谱分析仪成像和蛋白质指纹图谱分析,结果显示:改制订书针效果优于毛细管和载玻片,而且点样量在3μL时效果优于2μL和1μL。确定最佳点样为:自制的订书针,点样量3μL。     

低酸度酒精阳性乳患牛血清蛋白组成分析

本实验采用醋酸纤维素薄膜电泳法分离了低酸度酒精阳性乳患牛血清中各蛋白组成成分,并测定了血清蛋白组份的相对百分含量.结果表明:酒精阳性乳患牛血清总蛋白含量没有显著变化(P＞0.05);各血清蛋白组分中,清蛋白、α-球蛋白没有显著的变化(P＞0.05);但β-球蛋白极显著升高(P＜0.01),γ-球蛋白显著升高(P＜0.05).由此可见,酒精阳性乳患牛体内血清蛋白组分发生了变化,这种变化可能是酒精阳性乳患牛体内氧化损伤及甲状腺机能降低所致.     

血清蛋白醋酸纤维膜电泳缓冲液的筛选

旨在筛选适合血清蛋白醋酸纤维膜电泳的最佳电泳缓冲液。方法：选择6种常见电泳缓冲液,采用醋酸纤维膜为支持物分离家兔血清蛋白,确定其电泳最佳电压;在相同实验条件下,观察使用频次和放置一定时间对各种缓冲液稳定性的影响,并对比图谱分离蛋白质区带的数量及清晰度,定量分析蛋白质区带膜条扩展的总距离、点样区距第一条带远端、最远区带与最近区带的距离。结果表明在电压条件为70 V时,各种缓冲液电泳分离血清蛋白均能达到较好水平,其中出现5条清晰区带的概率,Tris-磷酸盐缓冲液为66.66%,巴比妥缓冲液为65.22%、Tris-盐酸缓冲液为8.33%;各缓冲液在使用5次以内、室温条件放置6个月后均对缓冲液稳定性影响不大;图谱区带数量和清晰度、区带分散程度定量分析表明Tris-磷酸、巴比妥缓冲液效果最好,Tris-盐酸缓冲液次之,磷酸盐、硼酸盐缓冲液较差。结论：6种缓冲溶液中,以图谱分离5条蛋白质区带为准,Tris-磷酸盐缓冲液分离血清蛋白图谱区带清晰,与巴比妥缓冲液效果相当。     

新疆南部三种绵羊血清蛋白电泳分析

采用醋酸纤维素薄膜电泳法测定了新疆南部三种绵羊血清蛋白及其各组份的含量。结果表明 :新疆南部肉脂兼用型多浪羊血清总蛋白含量高 ,清球比值低。羔皮型卡拉库尔羊清球比较高。但三种绵羊血清总蛋白含量和清球比的差异均不显著。而位于高寒区的肉脂兼用型巴音布鲁克羊γ -球蛋白的含量明显高于其它两种绵羊 ,差异显著。     

怀孕与非怀孕远东刺猬血清蛋白比较分析

以远东刺猬(Erinaceus amurensis Schrenk)为研究对象,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,比较分析了怀孕与非怀孕远东刺猬个体间血清蛋白的分布和活性.结果表明,非怀孕远东刺猬血清蛋白电泳分离出迁移率为0.009～0.590的20条谱带,怀孕远东北刺猬血清蛋白电泳分离出迁移率为0.005～0.590的2...     

利用醋酸纤维素薄膜电泳显示金针菇酯酶同工酶

[目的]利用醋酸纤维素薄膜电泳分析金针菇酯酶同工酶。[方法]以6种金针菇为材料,采用醋酸纤维素薄膜电泳对其酯酶同工酶进行分析,并与利用PAGE法得到的针菇酯酶同工酶图谱进行对比。[结果]6种金针菇共电泳得到20条酯酶同工酶带,其中相对迁移率不同的共有8条,大小分别为0.580、0.613、0.645、0.709、0.806、0.839、0.871、0.934;6种金针菇中,①号和②号有3条相同的带,④号和⑤号条带完全相同,③号与④号、⑤号有2条相同的带,⑥号与其他5种菌株间相同的条带较少。[结论]该试验结果与PAGE法显示的金针菇酯酶同工酶图谱基本一致,为实现利用醋酸纤维素薄膜电泳技术快速检测各类食用菌酯酶同工酶提供了可能。     

中华蟾蜍冬眠前后血清蛋白含量的变化研究

对中华蟾蜍冬眠前后血清蛋白含量、血清蛋白组分变化进行了测定．结果表明,中华蟾蜍血清蛋白含量冬眠前显著高于冬眠期和冬眠后（P〈0．05）,而冬眠期略高于冬眠后（刚出眠）（P〉0．05）．清蛋白在冬眠前较高,冬眠期和冬眠后较低,γ-球蛋白冬眠期低于冬眠前后．     

刺猬肉的营养成分及其品质评价

对野生动物刺猬（Erinaceuseuropaeus）肉的营养成分及其品质进行了理化及感官检验。结果表明：刺猬肌肉含蛋白质20．2％;脂肪8％;矿物质1％;熟肉率61．2％;肌纤维直径18．95±3．45μm;脂肪熔点20～38℃;碘价94～99。肌肉的感官指标良好,其营养成分及品质可与常用动物肉（猪、牛、羊、鸡、兔肉）相媲美;油脂与常用动物油脂相比,脂肪酸不和程度明显高于动物油脂,与花生油等多种植物油的不饱和程度相当。     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定玉米种子纯度的研究

利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本 种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97;以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种手段。     

Protein Extraction Methods for Two-Dimensional Electrophoresis from Baphicacanthus cusia （Nees）Bremek Leaves-A Medicinal Plant with High Contents of Interfering Compounds

Protein extraction is a critical step for two-dimensional electrophoresis （2-DE）. Different plant samples require different and adaptive protein extraction protocols. The leaves of medicinal plant, Baphicacanthus cusia （Nees） Bremek are notoriously recalcitrant to common protein extraction methods due to high levels of interfering compounds （especially the secondary metabolites and pigments）. This study was aimed to establish a routine procedure for the proteomic analysis ofB. cusia leaves, and a new protocol for the protein extraction was developed by optimizing trichloroacetic acid （TCA）/ acetone extraction method. The efficiency of this protocol was demonstrated by comparison with 3 published protein extraction methods （chloroform/acetone, Mg/NP-40, Tris-base/acetone）. The results showed that the optimized TCA/ acetone precipitation extraction method gave a relatively high protein yield （9.263 mg g^-1 fresh weight）, high-resolution separation, clear protein profiles, the highest proteins spots （1 31 t protein spots）, and displayed less contamination in 2- DE gels. Therefore, the results suggested that the optimized TCA/acetone method was the most effective among the 4 methods for B. cusia leaves.     

PCR结合DGGE技术快速鉴定橘小实蝇及其近缘种

首次采用PCR结合变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对橘小实蝇及其近缘种的线粒体COⅡ和16S rDNA基因序列进行分析.结果表明,通过DGGE可以区分实蝇属不同种类的COⅡ和16S rDNA基因序列.     

我国部分地方鸡种血浆蛋白质(酶)多态性分析

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳和淀粉凝胶电泳法,检测我国12个地方鸡种淀粉酶、酯酶、运铁蛋白及碱性磷酸酶等4种血浆蛋白质(酶)结构基因座的多态性。12个地方鸡种中所测的4个座位均表现出多态。根据检测座位的基因频率,计算群体平均基因杂合度。并用模糊聚类法对所研究的12个地方鸡种进行聚类。结果表明：泰和乌骨鸡和白耳鸡在λ为0．996时首先聚在一起,然后再与狼山鸡、仙居鸡、河南斗鸡、萧山鸡、固始鸡和藏鸡等依次聚为一大类,表明泰和乌骨鸡和白耳鸡有较近的亲缘关系,而北京油鸡与其他鸡种距离较远。     

菲律宾蛤仔凝集素抑菌机制的研究

通过分析菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum凝集素( MCL-T)对细菌的呼吸代谢及细菌中总DNA、总RNA和可溶性蛋白合成的影响,以及MCL-T与金黄色葡萄球菌膜蛋白( OMP)的相互作用及其核酸酶( RNase)活性,研究了MCL-T的抑菌机制。结果表明： MCL-T具有抑制金黄色葡萄球菌Staphylococcus au-reus和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis代谢过程中的磷酸戊糖途径( HMP); MCL-T与金黄色葡萄球菌或枯草芽孢杆菌共同培养时,随着MCL-T质量浓度的增加,金黄色葡萄球菌或枯草芽孢杆菌中的总 DNA、总RNA和可溶性蛋白含量均呈下降趋势;固相吸附测试表明, MCL-T可与金黄色葡萄球菌膜蛋白结合,两者的结合具有浓度依赖关系,该结合位点受N-乙酰-D-半乳糖酰胺( N-acetyl-D-galactosamine, GalNAc)及猪胃黏蛋白(Mucin from porcine stomach, PSM)的抑制, MCL-T具有RNase活性。研究表明, MCL-T通过抑制细菌的呼吸代谢及细菌中总DNA、总RNA和可溶性蛋白来发挥抑菌作用,同时其抑菌活性还与凝集素的OMP结合结构域和RNase活性结构域相关。     

质膜透性与丙二醛(MDA)含量的变化评价甘蔗品种抗旱性初探

通过水分胁迫下丙二醛（ＭＤＡ）含量与质膜透性的变化,以及模拟大田自然干旱环境下的生长、生产表现。初步评价了来自全国９个品种的耐旱、丰产性。经试验分析,认为福农８１－７４５、云蔗８９－１５１、桂糖８９－５、粤糖８６－３６８、云蔗８１－１７３、闽糖８８－１０３、桂糖１１、川蔗８１－５４８的耐旱、丰产性均优于新台糖１０（ＣＫ１）。其中云蔗８９－１５１、桂糖８９－５、福农８１－７４５的耐旱、丰产性与桂糖１１相当。     

PP_(333)诱导黄瓜子叶节差异蛋白表达的分析

【目的】了解和寻找PP333处理所导致的差异蛋白表达,为深入研究PP333的作用规律和机理获取有价值的信息。【方法】应用双向凝胶电泳技术研究PP333处理后黄瓜离体子叶节培养物差异蛋白的表达,结合质谱分析和蛋白质数据库检索,确定所检出差异蛋白质的性质和功能。【结果】双向电泳检测到黄瓜离体子叶节培养物蛋白点有1000个左右,质谱(MALDI-TOF-TOF/MS)分析鉴定出5个有信息价值的差异表达蛋白点,分别为14-3-3蛋白(R2)、氨基肽酶(R7)、甲硫氨酸合酶(R11)、60s酸性核糖体蛋白(R20)和PEPC(R21)。这些蛋白质与代谢过程、蛋白质翻译及信号转导等关系密切。【结论】PP333处理导致多种蛋白质表达发生改变,并通过多种蛋白质的相互协调作用调控植物体的生长发育。     

嗜水气单胞菌3种疫苗免疫的青鱼外周血免疫指标的变化

将福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、菌体外膜蛋白(OMP)和菌体脂多糖(LPS)作为免疫原,分别免疫健康青鱼。在免疫1、2、4、7、14、21、28d后进行外周血的血细胞计数和白细胞分类计数,测定细胞吞噬活性和抗体效价,结果表明:3种免疫原均可诱导红细胞和白细胞数量增加,并引起各种白细胞分类百分比变化,提高吞噬活性和抗体效价;免疫应答早期(第1周)主要是红细胞、单核细胞和中性粒细胞数量明显增加,吞噬细胞的吞噬活性迅速提高,吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI)第4天达峰值,F-AH组、OMP组和LPS组的PP、PI值依次分别为39.84%、46.53%、41.59%及3.94、4.26、3.77;随后则是淋巴细胞大量增殖,第21天淋巴细胞数量和抗体效价达峰值,F-AH组、OMP组和LPS组的抗体效价分别为1∶426.67、1∶341.33和1∶213.33。免疫28d后活菌攻毒的结果表明,OMP组的免疫保护率为75%;LPS组为67.8%,均明显优于F-AH组(50%)。可见3种免疫原均能通过促进青鱼血细胞增殖、提高吞噬细胞的吞噬活性、产生特异性抗体等方式增强机体的免疫保护力。