牛病毒性腹泻病毒Real-timePCR方法的建立及其应用

本研究在牛病毒性腹泻病毒5'UTR基因的保守区设计并合成了1对引物,建立了可以定量检测牛病毒性腹泻病毒核酸的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法建立的标准曲线相关系数R2为0.999,扩增效率为95.9%,熔解曲线为单一峰值,可检测到初始模板中4.1×101copies/μL的牛病毒性腹泻病毒核酸,是常规RT-PCR方法敏感性的100倍。该检测方法与猪瘟病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型病毒等其它牛源病毒均不发生交叉反应;批内与批间重复性试验变异系数均小于2.2%。本试验建立的荧光定量PCR检测方法可用于牛病毒性腹泻病毒的临床诊断。同时,应用本方法对临床病例的各组织器官进行了病毒RNA定量检测结果表明,胸腺等淋巴组织的病毒含量最高,证实病毒主要侵害淋巴器官,此研究可为临床病例的病毒分离提供借鉴。     

牛群爆发口腔黏膜溃疡类疾病的实验室诊断

牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎和牛恶性卡他热能引起牛出现呼吸道、消化道症状,通过临床症状很难鉴别诊断。2014年8月,大庆市某牛场爆发了以口腔黏膜溃疡为特征的传染病。通过PCR和基因测序方法对上述疑似牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎和牛恶性卡他热的病例进行了鉴别诊断,结果确诊牛恶性卡他热是造成该牛群爆发疫病的主要病因,为该病的防治提供了理论依据。     

牛病毒性腹泻病毒抗原抗体检测方法研究进展

随着现代分子生物学与免疫学技术的快速发展与应用,牛病毒性腹泻病毒新型抗原抗体检测方法不断发展和完善对近年来对牛病毒性腹泻病毒的RT—PCR、荧光定量RT—PCR、RT-LAMP、ELISA和胶体金技术等抗原抗体检测方法进行综述,以期为不同实验室寻找适合的诊断方法以及发展新型诊断方法提供参考,为我国牛病毒性腹泻病的综合防控提供合理的科学依据。     

牛病毒性腹泻的症状诊断与防治

正牛病毒性腹泻即粘膜病在养牛业发生率极高。其病原体为牛病毒性腹泻病毒,这种病毒会通过病牛的唾液、排泄物等途径迅速感染牛群,各种年龄的牛都易感染、以幼龄牛易感性最高。牛病毒性腹泻的存在使我国畜牧业的发展受到了严重阻碍,并给我国养牛业带来了严重的经济损失。对牛病毒性腹泻的诊断与防治已成为我国养牛业的重点难点。1牛病毒性腹泻流行特点牛病毒性腹泻是一种极具感染性的疾病。一旦有牛感染病毒性腹泻病毒后,就会通过各种途径在群众中迅速传播。例     

牛病毒性腹泻鉴别诊断与有效防治措施

牛病毒性腹泻在我国牛养殖行业较为常见,多是由牛病毒性腹泻病毒引起,幼龄牛感染率最高,全年均可发病。本文简要介绍牛病毒性腹泻的流行特点、病症和诊断方法,提出针对性防治建议。     

牛病毒性腹泻的发病症状、诊断和防治方法

牛病毒性腹泻对牛免疫机能损害较大,若防治不当容易继发感染细菌性疾病,且该病原体传播途径广,感染性强,对牛群健康破坏较大,必须给予预防.本文对牛病毒性腹泻的病原特征和流行特点进行概述,然后分析急性型与慢性型牛病毒性腹泻的发病症状及病理性变化,从临床鉴别和实验室诊断两个方面分析如何确诊牛病毒性腹泻,最后对牛病毒性腹泻的中西...     

牛病毒性腹泻病毒诊断方法与防治措施

牛病毒性腹泻病毒是牛的易感病毒性传染病,传播迅速,易感性强,牛病毒性腹泻病毒宿主范围很广,除了主要感染牛以外,还可以感染羊、鹿、骆驼和猪。本文主要对牛病毒性腹泻病毒的诊断方法与防治措施进行简要综述,为基层动物疾病防控工作人员及牛饲养人员提供借鉴与参考。     

牛病毒性腹泻诊断方法及综合防治

该文介绍了牛病毒性腹泻病的传染源、传播途径和流行特点,论述了急慢性病例及妊娠母牛的临床症状,介绍了病原菌检查,血清学诊断,鉴别诊断等诊断方法,最后提出提高饲养管理水平,做好免疫接种、检疫工作,净化牛群,做好引种等综合防疫工作,以期为防止牛病毒性腹泻疫病的发生和蔓延提供参考。     

牛病毒性黏膜病流行特点及防控措施

<正>牛病毒性黏膜病一般会造成牛只产生腹泻的情况，又被称为牛病毒性腹泻性黏膜病，是一种全球范围内的急性传染病，犊牛发病率最高，全年均可发病，春秋两季发病率较高。本文对牛病毒性黏膜病的流行病学特征、临床诊断与具体防治措施进行介绍。1病原牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科，瘟病毒属，有囊膜的单股正链RNA病毒，呈圆形。此病毒对氯仿、胰酶和乙醚敏感，     

牛病毒性腹泻流行特点与防治

牛病毒性腹泻又被称为病毒性腹泻黏膜病,是由病毒性腹泻病毒感染引发的一种传染性疾病。任何年龄、品种的牛都可以受到病毒的侵染,其中以幼龄牛的易感性最强,造成的威胁最为严重。本文主要结合实际工作经验,探讨了牛病毒性腹泻的流行特点、诊断和防治措施,希望通过研究对广大同行有所帮助。     

牛病毒性腹泻的发病机理、临床诊治分析

牛病毒性腹泻病毒爆发往往导致牛群持续感染、生产性能下降,给养牛业造成了极大的经济损失。此外,牛病毒性腹泻导致的黏膜病致死率极高,威胁了养牛业的长期可持续发展。对牛病毒性腹泻病的诊断和预防对养牛业十分重要。     

牛病毒性腹泻病毒山东株的分离与鉴定

牛病毒性腹泻病毒是牛病毒性腹泻-黏膜病的重要病原体,该病毒病是极为复杂、呈多临床类型表现的传染病,给世界养牛业造成了巨大的经济损失。本研究从疑似牛病毒性腹泻-黏膜病的粪便中分离得到一株病毒能使MDBK细胞产生细胞病变,经RT-PCR检测及扩增产物测序进一步证实,该病毒为牛病毒性腹泻-黏膜病病毒,TCID50测定该病毒的滴度为107.15TCID50/ml。该病毒株的分离鉴定为牛病毒性腹泻病毒疫苗的研制奠定了基础。     

牛病毒性腹泻的症状诊断和防治措施分析

<正>牛病毒性腹泻是传染性疾病,传染源是带有病毒的动物,包括动物的粪便以及分泌物都可以对这种病毒进行传播,所以,病毒的传播速度是非常快的。这种疾病的潜伏期是7~14天,潜伏期就可以发挥传染作用了,且在染病的初期没有明显的疾病症状,所以,需要强化牛病毒性腹泻的症状诊断工作,并采取有效的防治措施。本论文针对牛病毒性腹泻的症状诊断和防治措施展开研究。牛病毒性腹泻是热性传染病,由于黄病毒科瘟病毒发引起     

牛病毒性腹泻的防治与鉴别诊断

牛的病毒性腹泻是牛养殖过程中比较常见的一种传染性疾病,该种疾病主要是因为牛的粘膜病毒寄生在牛的体内,并大量繁殖生长而出现一种临床症状,其能够对牛的免疫力和抵抗力进行破坏。该种疾病传播的途径就是患病牛和健康牛之间的肢体接触而诱发疾病发生。因此,在牛养殖过程中,为了保证牛养殖产业的健康,做好牛病毒性腹泻并的防治和诊断鉴别有着十分重要的作用和意义。本文主要就牛病毒性腹泻疾病的鉴别和诊断进行了分析,并就该种疾病的防治对策进行了简单的论述,希望通过本次研究对更好的做好牛病毒性腹泻疾病的防治工作有一定的帮助。     

鹿源牛病毒性腹泻病毒核酸疫苗免疫实验研究

试验应用间接ELISA方法检测鹿源牛病毒性腹泻分离株CCSYD核酸疫苗体液免疫效果,应用淋巴细胞转化实验检测其细胞免疫效果,并与鹿源牛病毒性腹泻分离株CCSYD灭活苗和标准株C24V灭活苗进行比较。结果表明:鹿源牛病毒性腹泻分离株CCSYD核酸疫苗产生了较好的体液和细胞免疫应答,免疫前后免疫应答水平差异均显著(P<0.05)。     

牛病毒性腹泻／粘膜病诊断技术研究进展

牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（BovmeViralDiarrheaVirus／MucosalDiseaseVirus．BVDV／MDV）是引起牛病毒性腹泻一粘膜病的病原．该病呈世界性分布,在许多养牛业发达国家尤其严重．造成该病广泛流行的主要传染源是牛群中存在持续性感染牛,因此建立起特异、敏感、简便且快速的诊断方法来检疫、淘汰持续性感染牛是防治该病的关键。近年来．由于各种诊断技术的不断出现,在BVD／MD的病原检测上取得了显著的成就．本文对近年来在BVD／MD检测技术研究的一些进展进行综述。     

牛病毒性腹泻/黏膜病RT-PCR 3种体系的试验研究

根据牛病毒性腹泻/黏膜病病毒5′端非结构蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,建立检测牛病毒性腹泻/黏膜病病毒244 bp片段的RT-PCR 3种体系。该3种体系对牛病毒性腹泻/黏膜病病毒NADL、Oregon C24V和长春184毒株各标准毒株的检测结果均为阳性。对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达0.1 TCID50;而对牛传染性鼻气管炎病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的细胞培养物进行检测,结果均为阴性。证明3种体系方法特异性强,敏感性高。初步结果表明所建立的RT-PCR技术3种体系可用于牛病毒性腹泻/黏膜病的检测及流行病学调查。     

牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒三重RT-PCR方法的建立与应用

为建立快速同步检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒的多重RT-PCR检测方法并应用于临床检测。根据GenBank中三种病毒参考毒株的基因序列,设计3对特异性引物。利用构建的三种病毒的标准质粒进行三种病毒的三重RT-PCR方法,进行特异性、敏感性和重复性检验,并进行临床样品检测。特异性结果显示,建立的牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法可特异性扩增出阳性标准质粒的基因片段,对牛源沙门氏菌、大肠杆菌、牛巴氏杆菌、牛支原体无扩增;敏感性结果显示,对牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒质粒核酸最低检测浓度分别为250、 250和25ng/mL。重复性结果显示,能扩增出一致的目的基因条带。临床样品结果显示,三重RT-PCR方法和单一RT-PCR符合率100%。可见,建立牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,可进行临床检测。     

牛传染性鼻气管炎及病毒性腹泻流行病学调查及防控建议

为了解牛传染性鼻气管炎和病毒性腹泻在昆明地区的感染情况和流行趋势,该研究于2021—2022年采用实时荧光PCR方法对昆明市16个乡镇61家肉牛规模殖场的1394份棉拭子样品进行牛传染性鼻气管炎和病毒性腹泻病毒核酸检测。结果显示,2021年,牛传染性鼻气管炎病毒核酸个体阳性率0.23%、场群阳性率为2.78%,牛病毒性腹泻病毒核酸个体阳性率0.35%、场群阳性率为2.78%;经及时指导养殖场淘汰阳性病牛,2022年牛传染性鼻气管炎和病毒性腹泻病毒核酸全部为阴性。可见,及时发现并积极防控对根除牛传染性鼻气管炎和病毒性腹泻具有重要意义。     

牛病毒性腹泻病毒的检测方法及净化研究进展

牛病毒性腹泻病又称之为牛病毒性腹泻-粘膜病(Bovine vival diarrhea-mucosal disease,BVD),是由牛病毒性腹泻病病毒(Bovine vival diarrhea virus,BVDV)感染引起的一种以腹泻为主的粘膜病。BVDV会破坏牛自身的免疫系统,导致免疫力下降,病牛容易被机会致病菌侵袭,感染其他疾病,造成的经济损失巨大。由于该病流行范围广、危害大。因此,建立准确、高效的BVDV检测方法对于阻断BVDV的传播及实现BVDV的净化具有重要意义。本文对牛病毒性腹泻-粘膜病的检测技术和净化方法进行了简要综述,旨在为规模化牛场提供检测技术参考和BVDV的净化思路。