球孢白僵菌

理化性质：球孢白僵菌属半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、白僵菌属，是一种昆虫病原真菌。产品的有效成分为分生孢子．属微生物杀虫剂。在SDAY培养基上．球孢白僵菌菌落绒毛状、丛卷毛状至粉状，白色至浅黄色，偶成淡粉色。在显微镜下．“之”字形弯曲的产孢结构是其重要鉴别特征。产孢细胞单生或簇生于菌丝或分生孢梗上．基部柱状或膨大呈烧瓶形．顶部变细。其分生孢子球形或近球形．     

球孢白僵菌不同世代菌株胞外蛋白酶与毒力的关系

以蝉蜕、蝇明壳两种培养基培养球孢白僵菌不同世代菌株分析其类枯草杆菌蛋白（Ｐｒ１）和总胞外蛋白酶的产生水平及其与菌株毒力的相关性。结果表明,菌株的Ｐｒ１产生水平达到最高的时间较总胞外蛋白酶早１～２天,在单蜕培养基中,菌株Ｐｒ１产生水平较高,而总胞外蛋白产生水平大大低于蝇明壳培养基中的产生水平。随民代数的增加,Ｐｒ１和总胞外蛋白酶产生水平与其毒力的相关系数分别为０．９２和０．８９,高于 包外蛋白酶与其     

七种化学杀虫剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性研究

本文测定了7种常用化学杀虫剂高效氯氰菊酯、高氯甲维盐、辛硫磷、高效氯氟氰菊酯、阿维菌素、阿维杀虫单、虫酰肼对球孢白僵菌TST05菌株菌丝生长及孢子萌发、生长及产孢的影响,以研究化学药剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性,为化学杀虫剂和白僵菌制剂混合应用提供依据.结果表明,在田间常用浓度下,7种杀虫剂对该菌株的菌丝生长抑制率为27.93％～38.74％.虫酰肼组的孢子萌发率为33.19％,几乎不形成菌落,产孢量仅为0.05×106个/mL;而其余6种杀虫剂组的孢子萌发率为50.34％～70.62％,能形成较致密的菌落,产孢量为(2.51～3.58)×106个/mL.杀虫剂对该菌株的抑制作用随着浓度的降低而减小,田间浓度再稀释5倍后,各处理组孢子萌发率升高到72.08％～84.92％;产孢量为(3.01～9.61)×106个/mL.在田间浓度下,虫酰肼与该菌株不相容;其余6种杀虫剂的相客性较好.并且相客性随着杀虫剂浓度的降低而提高.     

球孢白僵菌脂肪酸、酯酶、脂肪酶及其与毒力的关系

研究12株球孢白僵菌脂肪酸、酯酶和脂肪酶的产生水平及菌株对马尾松毛虫毒力间的关系。结果表明：酯酶产生水平（E）、脂肪酶产生水平（L）及豆蔻酸百分含量（X）等与白僵菌菌株对马尾松毛虫的毒力（LT50）间存在一定的相关性，其相关方程分别为：LT50=2．0931/（lgE-5．1165）＋0．4091；LT50=-6．68L^2＋31．9886L；LT50=13．5192-8．7042X。     

球孢白僵菌Beauveria bassiana B6菌株对桔小实蝇的控制作用

室内研究了球孢白僵菌Beauveria bassianaB6菌株对桔小实蝇Bactrocera dorsalis的控制作用。结果表明:采用地面撒施固体菌剂对地面桔小实蝇老熟幼虫和土壤中蛹的致死作用较弱,但对成虫致死作用明显,在0.5×108~2.0×108孢子/g内,成虫死亡率可达82.89%~94.04%。在蛹期、幼虫期和蛹期施2.25×108孢子/g固体菌剂,2个处理对成虫致死效果很好,成虫死亡率高达91.29%~100%,与对照差异极显著(P<0.01)。沙土表面喷施1.0×108孢子/ml的孢子悬浮液,桔小实蝇总死亡率为75.18%,防效为71.93%;养虫笼内壁喷施1×107~1×108孢子/ml孢子悬浮液,成虫死亡率为81.00%~100%,防效为78.94%~97.94%。因此可以明确该白僵菌固体菌剂对桔小实蝇成虫有一定防效,有望成为桔小实蝇防控的一项有效措施。     

转基因球孢白僵菌发酵产物对野生菌株的增效作用

研究发现,超量表达类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的球孢白僵菌菌株Bb0062-15-4-CDEP-1的发酵产物对野生菌株具有明显的杀桃蚜增效作用。进一步分析增效作用与目的基因表达产物关系的结果显示,加入CDEP-1酶活为44.3±0.6U/μL的发酵产物,可使野生菌株对桃蚜的致死中浓度降低4倍以上,共毒系数(CTC)达404.6。但发酵产物经121℃处理20min,增效作用完全丧失。用饱和硫酸铵沉淀蛋白质分别将透析后的重溶蛋白质和上清液用于增效作用测定,结果证明增效成分主要是蛋白类物质。将梯度稀释的发酵产物与浓度为1×107孢子/mL的野生菌株孢子悬浮液混合进行生物测定,发现各处理的致死中时与CDEP-1的活性呈负相关,相关系数为-0.8946。由此推断,发酵产物中的增效物质主要是目的基因表达产物CDEP-1。     

球孢白僵菌对桃蚜种群数量的影响

在田间网室中研究了球孢白僵菌对分别以4龄无翅若蚜和无翅成蚜为起始的桃蚜种群数量的影响。以无翅成蚜起始的桃蚜种群，在接菌后的第6d，对照和接菌处理之间只有成蚜数量差异显著，虽各龄期若蚜数量和桃蚜总数处理与对照之间差异不显著，但接菌处理的总数量少于对照的总数量；在接茵后的第13d，两者的种群数量水平相当。以4龄无翅若蚜起始的桃蚜种群，在接菌后的第6d，处理和对照之间的种群数量就已接近。     

球孢白僵菌与一些常用市售复合肥料的相容性

为了解5种常用市售复合肥料对球孢白僵菌孢子萌发的影响，调查混有不同浓度肥料的平板培养基上的菌落形成单位和摇瓶培养中的孢子发芽率。结果表明，在2种培养条件下“大洋生态有机肥”（F2）在高、中、低3种剂量下与对照的差异均不显著，“绿营高”（F3）仅在低剂量下与对照无显著差异，而其余剂量都极显著地抑制孢子萌发。其他3种肥料在3种剂量下对孢子萌发都有显著抑制作用。这表明只有F2及低剂量的F3可以与白僵菌分生孢子制剂混合使用。     

几种微胶囊适宜加工材料与球孢白僵菌分生孢子的相容性

采用不同的供试材料与球孢白僵菌孢子粉混合培养的方法,研究了10种不同的高分子材料与球孢白僵菌分生孢子的生物相容性。结果表明,球孢白僵菌孢子悬浮液与甲基纤维素钠、预胶化淀粉、阿拉伯胶和明胶预混6h后,孢子的发芽率与对照之间无显著性差异;与预胶化淀粉、海藻胶、甲基纤维素钠、明胶、羧甲基纤维素钠和阿拉伯胶在室温下混合贮存12个月后,萌发率仍达75%以上,均显著高于对照;加入明胶、预胶化淀粉和甲基纤维素钠对于菌落的直径生长无显著影响;加有预胶化淀粉、阿拉伯胶、明胶等的培养基产孢量与对照相比无显著性差异。综合比较,相容性能最好的材料依次为预胶化淀粉、明胶和甲基纤维素钠。     

生长调节剂对球孢白僵菌产孢和分生孢子性能的影响

球孢白僵菌在农林害虫生物防治中发挥着重要的作用,发酵周期和产孢量是其发酵工艺中的主要评价指标。本试验研究了生长调节剂对球孢白僵菌JG-17菌株产孢的促进作用。结果表明,通过外源法在菌落表层施用微量乙烯利,可以明显提高菌株JG-17的产孢量,以对8日菌龄表层施用100 ng/cm²乙烯利处理最佳,产孢量为未处理对照的6.28倍。经乙烯利处理后形成的分生孢子,其耐热性、抗紫外线能力和对靶标害虫的杀虫活性与未处理对照没有显著性差异。在白僵菌培养过程中科学施用乙烯利,可有效提高白僵菌的产孢效率,研究为真菌生物农药工业化生产的效率提升提供了新的思路。     

胶孢炭疽菌株QZ-97a分生孢子货架期及对温度的耐受力

将不同含水量的胶孢炭疽菌婆婆纳专化型菌株QZ 97a分生孢子粉置于4℃和室温下,密闭或开放贮存。结果表明,4℃下密闭贮藏6个月,分生孢子萌发率和芽管长度无明显降低,室温贮藏降低也不明显。贮藏10个月后,各种贮藏方式孢子的活力都显著下降。但以4℃、含水量4%、密闭贮藏孢子活力较为稳定,420d孢子萌发率为70 4%,芽管长度为贮藏60d时的43 2%。含水量9 6%、开放室温下贮藏的孢子粉活力下降最大。因此,温度和孢子粉含水量是影响孢子货架期的两个主要因素。分生孢子粉对温度有一定的耐受性,随温度增高,敏感性增强,60℃下分生孢子的活力下降显著,处理6min,孢子芽管长度较对照下降50%。     

白僵菌绿僵菌分生孢子对高温的耐受力

试验研究了２株白僵菌和３株绿僵菌的分生孢子在高温短时处理及高温培养条件下的萌发和成活。３５℃短时处理对孢子的萌发和生长基本无影响。４０～５０℃是孢子的敏感区。从高纬度地区吉林采集的菌株Ｂ９对高温最敏感，在４０℃处理１０分钟，发芽率下降８０％。采自非洲的菌株Ｍ１８９对高温的抵抗力最强，在４０℃处理４小时和５０℃处理１小时，孢子的发芽率保持在４０％以上，６０℃处理２０分钟仍有大约１％的发芽率。高温培养结果表明，３５℃时只有Ｍ１８９的成菌落数为６７．７％，其它４个菌株均在１％以下。     

白僵菌可湿性粉剂的研制

以白僵菌孢子粉为原药,硅藻土为主要载体,通过单因素和正交设计筛选合适的润湿剂、分散剂等助剂配方比例,研制出性能优良的白僵菌可湿性粉剂。确定配方为：白僵菌分生孢子粉20%; NNO7%; 农乳32082%; 拉开粉5%; 十二烷基硫酸钠2%; 硅藻土加齐至100%。质量检测结果表明：该配方润湿时间<1min,悬浮率可达到75%以上,其他各项指标均符合可湿性粉剂的要求。     

球孢白僵菌生物学特性与其对小菜蛾致病力相关性分析

为明确球孢白僵菌的各项生物学指标与其对小菜蛾致病力间的相关性,对一株球孢白僵菌菌株GXU-Bb进行单孢分离,测定了菌株GXU-Bb及其分离子菌株GXU-Bb16、GXU-Bb10、GXU-Bb13和GXU-Bb05这5个菌株的生长速率、产孢量、孢子萌发率、胞外蛋白酶水平和几丁质酶水平等多项生物学指标。结果表明,各菌株间生长速率和孢子萌发率无显著差异;产孢量变化范围1.54×10^7-2.98×10^7个/ml;胞外蛋白酶水平变化范围1.04-1.19;几丁质酶水平变化范围1.05-1.14;各菌株间对小菜蛾二龄幼虫的致病力差异较大,校正死亡率变化范围为39.81%-83.79%。将各生物学指标与菌株对小菜蛾二龄幼虫的校正死亡率进行回归分析得出,球孢白僵菌对小菜蛾的致病力与菌株生长速率、孢子萌发率无显著相关关系;与产孢量、胞外蛋白酶水平呈极显著正相关关系;与几丁质酶水平呈显著正相关关系。     

GFP标记的球孢白僵菌在玉米中的定殖

为明确球孢白僵菌在玉米中的定殖分布规律以及不同施用方式和处理浓度对玉米生长发育的影响,本文利用绿色荧光蛋白（GFP）标记的球孢白僵菌,在激光扫描共聚焦显微镜下观测了球孢白僵菌在玉米根部、茎部和叶部的定殖情况,同时检测了不同接种方式在球孢白僵菌不同处理浓度下对玉米生长指标的影响。结果表明,球孢白僵菌在玉米不同组织部位上的定殖有着明显的差异,各球孢白僵菌接种处理中,均以叶部定殖的白僵菌孢子数最多,而茎部均未观测到孢子定殖;玉米根部仅在浸种和灌根处理中可见少量孢子。球孢白僵菌不同接种方式对其在玉米中定殖率的影响差异较大,灌根处理定殖率最高,为76.7%;其次为浸种处理,为73.3%;茎部注射处理及叶面喷施处理定殖率较低,分别为43.3%和36.7%。研究表明,不同施用方式及接种浓度球孢白僵菌孢悬液对玉米生长指标有一定的影响,球孢白僵菌可通过不同接种方式在玉米植株中定殖并扩散,对玉米的生长发育有一定的促进作用,其中以1×10⁶~1×10⁷孢子/mL球孢白僵菌孢悬液浸种或灌根,对玉米苗的促进生长作用最明显。     

球孢白僵菌加增效剂对光肩星天牛的防治效果

光肩星天牛 ( Anoplophora glabripennis Motsch)虫生真菌以其安全有效 ,容易大量生产等优点 ,在生物防治中具有应用潜力。但虫生真菌在野外对温、湿度要求严 ,耐贮性差 ,对害虫致死慢 ,影响了它的广泛应用和商品化生产。为克服上述缺陷 ,提高其致死率 ,我们通过近 5年的试验 ,     

球孢白僵菌与几种化学杀虫剂和除草剂的相容性

针对真菌杀虫剂杀虫较慢、致死率较低的缺点,在IPM中常将其与亚致死量的化学农药混用,为此需不断测定其与各种新上市农药的相容性。本研究测定了当前农药市场上销售的7种杀虫剂和3种除草剂对10株球孢白僵菌Beauveria bassiana孢子萌发率、生长速度和产孢量的影响。结果表明,所有供试杀虫剂和除草剂在常规使用浓度下对球孢白僵菌分生孢子萌发都有显著抑制作用,抑制作用随农药浓度的降低而减弱;8%氯氰菊酯（绿色威雷微胶囊剂CM）、30%草除灵（草除灵悬浮剂BN）和6.9%精噁唑禾草灵（精噁唑禾草灵水乳剂FE）在稀释10倍后对孢子萌发无显著抑制作用。所有杀虫剂和除草剂在常规浓度下对菌丝生长均有显著抑制作用,1%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（威克达乳油EB）、40%毒死蜱（毒死蜱乳油CP）、4.5%氯氰菊酯（高效氯氰菊酯乳油BC）和8%氯氰菊酯稀释10倍后的抑制作用较小,8%氯氰菊酯甚至对RCEF0894菌丝生长有促进作用。所有杀虫剂和除草剂对产孢量均有极显著的抑制作用。综合比较,在与供试农药混用时,菌株RCEF0013和RCEF0383的产孢较好,而菌株RCEF0895、RCEF0896和RCEF0897菌丝生长较快。8%氯氰菊酯、30%草除灵和6.9%精噁唑禾草灵与球孢白僵菌的相容性相对较好,是菌药混用可能选择的对象。