菌根辅助细菌短小芽孢杆菌HR10扩繁条件优化

菌根辅助细菌(mycorrhiza helper bacteria,MHB)短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HR10可与外生菌根真菌(ectomycorrhizal fungi,EMF)互作,对马尾松具有显著促生作用。为将短小芽孢杆菌HR10进行规模化应用,在前期对其增殖扩繁培养基成分优化的基础上,对短小芽孢杆菌HR10培养条件(p H、发酵瓶装液量、发酵温度、接种量)进行了试验优化。结果表明,该菌株最适扩繁条件为:p H 6.5、装液量50%、发酵温度28℃、接种量5%。发酵液生物量在此条件下比前期的培养条件下提高了10.4%。     

两株芽孢杆菌产纤维素酶的研究

通过对筛选得到的两株高产纤维素酶的芽孢杆菌X18和X10-1-2的发酵条件进行优化,得出以下结论:麸皮作为天然纤维素可较大幅度地提高纤维素酶的产量,X18的最佳麸皮质量分数为2.5%,X10-1-2的最佳麸皮质量分数为3%。两株菌的最佳氮源均为豆饼,X18的最佳豆饼质量分数为4%,而X10-1-2的最佳豆饼质量分数为1%。产酶的最佳温度均为30℃。X10-1-2的最佳产酶pH值为5,而X18的Cx酶在pH值6~8范围内产酶最高,本实验采用pH值8。最佳产酶时间X18为20 h,而X10-1-2为60 h。     

两株芽孢杆菌产纤维素酶的诱导机理研究

通过测定各种酶活性研究了不同碳源对两株芽孢杆菌产纤维素酶的诱导作用,发现,这两株芽孢杆菌不能由纤维素材料作单一碳源诱导产纤维素酶,而仅由带有还原基团的单糖或双糖诱导产酶,且纤维素酶系各组分的合成表达是协同发生的。并根据这些结果对芽孢杆菌产纤维素酶的机制进行了假设。     

一株高效石油降解菌的筛选及降解能力初探

为了有效降解石油开采过程中产生的含油污泥中的石油,达到油泥资源再利用的目的,选育高效石油降解菌,为石油污染生物修复提供菌种资源和技术支持。通过连续富集传代培养,从页岩油泥中分离出一株高效石油降解菌YH1-1,经过形态学、生理生化以及16S rRNA序列分析,鉴定YH1-1为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)。该菌在温度30℃、初始培养pH值7.0条件下降解质量浓度50 g/L的油泥,经气相色谱(GC)分析,28 d降解率可达87%,说明该菌可有效降解石油烃。因此,醋酸钙不动杆菌YH1-1在开发研制石油污染生物修复菌剂方面有较好的应用前景。     

地衣芽孢杆菌对麦麸降解作用的研究

通过测定发酵过程中发酵液的纤维素酶活、半纤维素酶活、可溶性总糖和还原糖浓度以及底物残渣质量、残渣结晶度、傅立叶红外光谱和表面结构的变化来研究地衣芽孢杆菌(Bacillus sp. X18)对麦麸的降解作用.发现在发酵过程中此菌体产酶的过程也就是木质纤维素的降解糖化过程.上清液中的纤维素酶活和半纤维素酶活分别在发酵进行到第96和 48 h 时达到最高峰.发酵液中总糖和还原糖含量分别于4和 48 h 达到最高值5 257.79和 1 363.94 mg/L,然后下降到一定程度后保持恒定.该菌株对麦麸长达 5 d 的降解过程中结晶度未发生明显变化.底物残渣傅立叶红外光谱分析表明,此菌株对麦麸中的纤维素、半纤维素和木质素都有不同程度的降解,但以纤维素降解为主.纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为 37.03 %、15.86 % 和 17.03 %.利用扫描电镜对底物残渣表面结构进行观察,可看到该菌株主要降解麦麸内表面蜂巢结构边缘骨架中起支撑作用的成分.     

毛竹根际分离的地衣芽孢杆菌固氮特性研究

从毛竹根际分离到36株固氮菌，经初步镜检其中17株菌为芽孢杆菌，进一步鉴定确定其主要为多粘芽孢杆菌（Bacilluspolymyxa）和地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis），本文主要就其中菌号为G－8、G－12、G－14、G－17四株地衣芽孢杆菌的鉴定及固氮特性进行研究。结果显示：四株菌均为杆状，具芽孢孢孢囊稍膨大，它们的生理生化特性相同，但菌落形态有一些差异。G－8和G－17的最佳固氮温度为35℃左右，G－12和G－14的最佳固氮温度为30℃左右；G－12、G－8和G－14的最适固氮pH为6．0左右，G－17的最适固氮pH为6.0～7.5；四株菌都可利用碳源固氮，但均以葡萄糖为碳源时的固氮活性最高，依次为64．76、437．23、65．42、90．91nmolC2H4h-1，瓶-1。G－12在培养48h，G－8、G－14在培养96h，G－17在培养60h的固氮活性最高分别为138．50、122．01、170．87、109．81nmolC2H4．h-1.瓶-1。     

家畜血红蛋白降解菌分离筛选与鉴定

从多年被废弃畜禽血液浸染的土壤中,分离筛选出16株菌株.根据在酪蛋白/明胶平板上蛋白质水解圈比值大小初步确定8株菌株为被选菌株;并分别在Hb发酵培养液中发酵72 h,测定蛋白酶活力、游离氨基酸含量、可溶性蛋白质含量、Hb降解率,最终确定一株菌株(编号为:L act5.Ⅲ)为最佳菌株;经过菌落形态观察初步确定为细菌,进一步测定生理、生化反应指标,鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌B.cereus.     

中国八个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布

从大兴安岭根河潮查、带岭、千佛山、崂山、黄山、紫金山、武夷山和西双版纳八个自然保护区采集到０—５ｃｍ土层林下土壤样品１２９个，从中分离出大量的苏云金芽孢杆菌。研究表明：不同立地带森林土壤中芽孢杆菌的总数量、苏云金芽孢杆菌的出土率及占所分离芽孢杆菌的分离率间具有一定的差异，但它们与土壤含水量、ｐＨ、单一养分间无明显的相关性。我们还对所分离的苏云金芽孢杆菌所属亚种进行了初步鉴定，对六种有害昆虫进行了毒力测定。     

我国四个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布

从我国四个不同立地带——长白山、百花山、鼎湖山、尖峰岭自然保护区,采集到林下0～5cm土层土壤样品75个,分离到苏云金芽孢杆菌39株。其中芽孢杆菌的总数量和苏云金芽孢杆菌的出土率和分离率有所差异,pH偏中性和含水量稍高的土壤,菌数较高;而与所测的各种土壤养分无明显相关。对39株苏云金芽孢杆菌的鉴定:17株属库尔斯塔亚种,6株属松蠋亚种,16株未定名。毒力测定表明:对杨扇舟蛾和马尾松毛虫幼虫的致死率在50％以上的菌株约占70％;对榆蓝叶甲和黄粉甲幼虫均无明显杀虫活性。     

贝莱斯芽孢杆菌12-5B的石油烃降解特性研究

由北京某加油站柴油污染土壤中筛选出一株高效石油烃降解菌12-5B,经16S rDNA序列对比分析,鉴定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)。在目标污染物正十六烷或柴油初始浓度约为8000 mg/L的无机盐培养基中,贝莱斯芽孢杆菌12-5B对上述2种石油烃污染物均具有较好的降解能力,7 d去除率达到90%以上。其最佳培养条件为温度30℃、pH=7和外加有机氮源。贝莱斯芽孢杆菌12-5B可在LB培养基中快速生长,高营养培养后可保持较高的石油烃降解能力,具备开展现场微生物修复的潜力。     

耐碱芽孢杆菌YNUCCTCRQ1木聚糖酶及其产生菌的系统发育分析

从云南腾冲火山热泉中筛选到一株产木聚糖酶芽孢杆菌YNUCCTCRQ1。其木聚糖酶的最适反应温度为80℃，最适pH值7．5。该木聚糖酶在pH值2～12、温度73℃以下比较稳定。Ca^2 、K^ 、Mg^2 、EDTA对该木聚糖酶有较强的促进作用，Co^2 、Ni^2 、Cu^2 、Mn^2 和Hg^2 对该酶有较强的抑制作用。对该菌株16S rDNA的1471bp片段的序列分析结果表明，芽孢杆菌YNUCCTCRQ1与Gene Bank中的嗜碱芽孢杆菌(Baeillus halodurans)C-125和DSM 497T最为接近。     

毛竹根际分离的多粘芽孢杆菌固氮特性的研究

对从毛竹根际分离到的菌号ＧＷ１,ＧＷ－５,ＧＷ－１０,ＧＷ－１６的４株菌进行鉴定和固氮特性研究,从其菌体形态及生理化特性确定为多粘芽孢杆菌。它们固氮的最适温度,ＧＷ－１为３０－３５℃,ＧＷ－５,ＧＷ－１６为３０℃,ＧＷ－１０为３５℃,最适固氮ｐＨＧＷ－１,ＧＷ－１０为７．５左右,ＧＷ－５为７．０左右,ＧＷ－１６为６．０－７．５之间。     

纤维素降解芽孢杆菌筛选及产酶条件优化

[目的]筛选沼气发酵液中高产纤维素酶菌株,并对产酶条件进行优化,为沼气发酵利用和纤维素酶的工业化开发提供高效菌株.[方法]利用刚果红平板染色法初筛,纤维素酶活测定进行复筛,从沼气发酵池中分离产纤维素酶菌株,并结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析进行鉴定.对菌株产酶培养基中碳源、氮源、硫酸镁和...     

一株拟茎点霉(Phomopsis sp.)拮抗菌的筛选鉴定

为筛选出拟茎点霉(Phomopsis sp.)的生防菌,探索拟茎点霉病原菌的有效生物防治方法,从武威7个乡镇采集45个土样,采用土壤稀释平板法进行微生物分离和平板对峙培养法进行筛选,对选出的抑菌效果最好的菌株LKYHC-6采用形态学及分子生物相结合的方法进行鉴定。结果表明,筛选出的拮抗细菌LKYHC-6菌落在LB培养基上呈现乳白色、中间凹陷、边缘隆起、杆状、革兰氏染色呈阳性,16S rDNA序列分析得到该菌株的序列长度为1 493 bp,构建系统发育树结合形态学特征将拮抗细菌LKYHC-6鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus);对LKYHC-6抑制效果分析时发现,该菌株对供试的拟茎点霉病原菌(枫香拟茎点霉、胡桃楸拟茎点霉、富士拟茎点霉、乌饭树拟茎点霉)都有抑制作用,抑菌带大小分别为11、15、13、16 mm。故拮抗菌株LKYHC-6在拟茎点霉引起的病害防治中具有极大的生防潜能。     

苏芸金芽孢杆菌孢子囊超微结构的研究

用电子显微镜观察了分属于苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)23个 H-血清型的30个亚种和3株新分离菌株孢子囊超薄切片的超微结构。结果表明苏芸金杆菌30个亚种的芽孢和伴孢晶体在孢子囊中形成的部位、形状及数量有所不同。大部分亚种的伴孢晶体位于孢子囊的一端,以单个晶体存在于孢外膜之外,只有幕虫亚种(Subsp.finitimus)的伴孢晶体位于孢外膜之内。在孢子囊中晶体的形状分别为菱形、方形、圆形、不规则形。其数量大多数为一个。从不同森林土壤中分离到的87052、85020、85040三株菌,其中87052菌株伴孢晶体为圆形,与已知圆形伴孢晶体的亚种形态特征相似,其它两株菌在形态特征上与已知 30个亚种在孢子囊的超微结构上有着一定的差异。     

解磷芽孢杆菌的筛选及其解磷能力的测定

对鄂尔多斯沙漠中几种典型固沙植物根际分离所得的95株芽孢杆菌利用溶磷圈法初步筛选,得到具有解磷能力的菌株有41株,其中26株具有较高溶磷能力的菌株,经过钼蓝比色法测定其溶磷量,获得3株高效溶磷菌:NTGB-Ⅱ-GM-2,NTBB-Ⅳ-GM-3和NTGB-Ⅲ-G-11,其解磷能力分别为对照的9.25倍,7.48倍和7.2倍,明显高于其他菌株.通过分析发现这3株菌的溶解磷能力与pH值显著相关。相关方程式为Y溶磷量=-4203.893XPH 34426.346(n=15,0.05>P=0.038>0.01,r=0.54)。另外,综合分析两种方法测定芽孢杆菌溶解无机磷的能力发现,在固体培养基上生长出溶磷圈的菌株,都表现出了不同的溶解磷的能力,但是在液体培养基摇床振荡培养条件下测得的菌株溶解磷的能力与在固体培养基上采用透明圈观察法测定的结果不完全相同,液体培养可能更合理。     

紫茎泽兰干粉对枯草芽孢杆菌生长的影响

紫茎泽兰(Ageratina adenophora)在我国广泛分布。为探究其资源利用新方法,本实验对紫茎泽兰根、茎、叶粉末作为培养基的添加物,通过检测微生物在培养基内繁殖数量和速度的变化,探索紫茎泽兰粉末是否能够促进培养基内枯草芽孢杆菌的繁殖。结果表明,紫茎泽兰根、茎、叶干粉对培养基内枯草芽孢杆菌生长有一定的促进作用,干粉能够更有效地提升枯草芽孢杆菌在LB液体培养基内的繁殖速度。     

苏云金芽孢杆菌83016菌株的研究

通过对83016菌株生理生化特性、不同培养和发酵条件下制备物室内毒力测定方法比较及小试产品对松毛虫等5种森林害虫林间防治试验结果表明,该菌株属苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种;三种不同制备方法的室内生测比较,以光密度测定法较其它两种方法简便可靠,适用于进行大量菌株筛选;83016菌株发酵产物和小试产品对马尾松毛虫等害虫有较高的毒性。     

坚强芽孢杆菌的筛选及抗菌活性

采用三层琼脂法初选对枯斑盘多毛孢P esta lotia funerea有抗生作用的细菌菌株共10株,4株P seudom onas spp.对枯斑盘多毛孢的抗生作用小于6株B acillus spp.;在B acillus spp.中,以B5菌株拮抗带最大,初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属的坚强芽孢杆菌B acillus f irm us,对峙培养显示B5对枯斑盘多毛孢有明显的抑菌圈(平均6 mm);B5产生的非挥发性物质对枯斑盘多毛孢菌落的抑制总的表现为稀释度越小,菌落直径生长越小,抑制作用越大,抑制中量为1∶1 000~1∶10 000;B5产生的多糖、粗脂肪、蛋白质对枯斑盘多毛孢孢子萌发有抑制作用,粗脂肪可完全抑制枯斑盘多毛孢的孢子萌发(抑制率为100%),多糖在24 h可完全抑制孢子萌发,蛋白质相对较差,48~72 h抑制率为85%左右.     

高吸水性竹纤维结合枯草芽孢杆菌在沙化草地的应用

沙地因缺水少肥导致牧草存活率底,生长缓慢。高吸水性竹纤维结合枯草芽孢杆菌对沙化地植被的恢复效果,结果如下：（1）与对照组相比试验组月均土壤湿度高38.06%,月均土温低2.89%,0～10cm处土层细菌、真菌数量比对照组高126.69%和50.25%,(2)试验组牧草全氮、全磷、全钾和产量比对照组增加114.49%、35.74%、44.47%和75.76%,试验组土壤铵态氮、有效磷、速效钾、有机质均高于对照组,但不显著;（3）试验组披碱草存活显著高于对照组,单位面积内植株数量超过对照组345.04%,结果表明高吸水性竹纤维结合枯草芽孢杆菌够有效的提升沙地土壤水分、养分含量,提高沙地上植株存活率。