平邑甜茶与二倍体苹果杂交F_1染色体数目分离及有关性状分析

无融合生殖型平邑甜茶(M.hupehensis. 2n=51)与融合型冬红果(M.pumila. 2n=34)和M9(M.varparadise, 2n=34)的杂交后代,经田间形态观察与鉴别,在301个实生后代中,发现有268个母本遗传型(即由母本珠心细胞发育形成的无性个体)和33个有性杂种植株。经镜检后者体细胞染色体数,其中有25个四倍体植株、7个三倍体植株和1个非整倍体植株。这些杂种植株表现了不同程度的无融合生殖能力。     

野生平邑甜茶变异性研究

调查了野生于蒙山的平邑甜茶的分布及其变异性,结果表明:平邑甜茶的分布环境多样,但各种生境下的平邑甜茶单株间的植物学性状无显著差异。根据叶片面积,平邑甜茶可分为大叶型和小叶型两种。小叶型平邑甜茶的过氧化物酶同工酶比大叶型多了Rf=0.26、0.33和0.37的3条带,但少了Rf=0.57的一条带。在同一分布地点内的平邑甜茶的POD同工酶酶谱表现一致。     

平邑甜茶小孢子母细胞减数分裂的观察与研究

平邑甜茶为天然三倍体植物,是苹果重要的乔化砧木。文章对平邑甜茶小孢子母细胞减数分裂进行观察,进一步研究其可育性,为种质资源的创新及研究高倍性育种奠定基础。     

平邑甜茶MhWRKY15基因cDNA克隆及其生物信息学分析

以平邑甜茶为材料,通过RT—PCR和RACE技术,获得平邑甜茶WRKY15基因的全长cDNA,命名为Mh—WRKY15（GenBank登陆号：GU576874）。生物信息学分析表明,该基因全长1091bp,包含810bp的完整开放读码框,编码269个氨基酸,属于WRKY类转录因子的第Ⅱ组,为WRKY15家族成员;其编码...     

小金海棠雌蕊无融合生殖发育的解剖学结构观察

对小金海棠花期前后的雌蕊石蜡切片后进行观察,结果表明,小金海棠为倒生胚珠,厚珠心,双层珠被;孢原细胞和珠心组织细胞都可以发育,不经减数分裂发育成胚囊母细胞,进一步发育成单核胚囊,经3次有丝分裂发育成7细胞8核的胚囊,其中的二倍性卵细胞短暂休眠后不经受精直接发育成胚,中央细胞不受精发育成核型胚乳,属于未减数胚囊无融合生殖。同一胚珠中胚囊母细胞多途径起源或多胚囊发育现象普遍,但多数败育,推测多胚囊结构间竞争所造成的发育细胞的解体,是小金海棠果实出种率低或种子空瘪粒多的重要原因。     

硫磺对苹果连作土壤环境及平邑甜茶幼苗生长的影响

以盆栽的试验方式,研究了在老龄苹果园土壤中添加不同量(0、0.1、0.3、0.5 g·kg^-1)的硫磺对土壤微生物环境及再植平邑甜茶(Malus hupehensis Rehd.)幼苗的影响,为减轻苹果连作障碍提供理论依据。温室和露地盆栽结果显示:硫磺对改善连作土壤环境及促进平邑甜茶幼苗的生长具有良好的效果,但不同添加量促进效果不尽相同,其中以0.3 g·kg^-1的促进效果最为显著。与对照相比,0.3 g·kg^-1的硫磺处理浓度下平邑甜茶幼苗株高、地径、鲜质量、干质量分别增加了60.83%(26.03%,露地数据,下同)、26.78%(19.66%)、73.44%(62.15%)和93.32%(72.93%);根长、根表面积、根体积、根尖数、根系呼吸速率提高了1.47倍(1.82倍)、2.28倍(2.05倍)、2.05倍(2.74倍)、1.73倍(1.67倍)、2.12倍(1.98倍)。硫磺处理后叶片叶绿素含量、光合参数、土壤酶的活性均有不同程度提高。0.3 g·kg^-1硫磺处理具有最高的细菌与真菌...     

“平邑甜茶”组织培养微嫁接技术研究

以苹果"平邑甜茶"(Malus hupehensis var.pingyiensis)为微嫁接砧木,"寒富"(Malus domesticacv.‘Hanfu’)为接穗,研究了附加不同浓度6-BA的培养基、接穗不同生理状态、接穗具有叶片数量、不同接穗/砧木组合对嫁接成活率和嫁接口愈合的影响。结果表明:最适于微嫁接的培养基为MS+IAA 0.3mg/L+BA 1.0mg/L,选用继代培养40d的接穗和砧木,并且接穗部分具有2片真叶时的嫁接成活率最高;用"平邑甜茶"作为砧木的嫁接成活率高(81.3%),嫁接口愈合最好。该研究为下一步的转基因sRNA信号在砧木与接穗间的传递运输研究奠定基础。     

苹果无融合生殖砧木病毒检测

利用RT-PCR方法检测无融合生殖砧木采种母树的带毒状况。结果表明,平邑甜茶、小金海棠、青砧一号、青砧二号等砧木的采种母树不同程度带有苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)等3种潜隐病毒,带毒株率0~13%。应当重视由此可能给苗木繁殖和研究利用带来的不良影响。     

平邑甜茶后代双胚苗的倍性鉴定及核型分析

为了确定平邑甜茶双胚苗的倍性特征和核型特点,采用压片和流式细胞仪观测的方法对平邑甜茶后代中双胚苗进行染色体倍性观察和核型分析。结果表明:4株供试材料均为三倍体,2n=3x=51,染色体为小型,染色体长度比差异不大;核型组成由中部着丝点染色体(m)和亚中部着丝点染色体(sm)组成;株系8-1、8-2、12-1和12-2的核型公式分别为2n=3x=45m+6sm,2n=3x=48m+3sm,2n=3x=27m+24sm,2n=3x=33m+18sm;染色体相对长度和着丝点指数的变异范围分别为1.21%～2.68%和34.19%～42.37%,1.44%～2.63%和35.59%～44.08%,1.36%～3.02%和32.85%～42.18%,1.43%～2.87%和34.23%～44.02%;核型分别属于1B、1A、2B和1B类型,表现为株系之间的核型不完全相同。本研究为丰富无融合生殖型砧木的育种理论,获得新的苹果无融合生殖型砧木提供有益的借鉴。     

平邑甜茶MhVPE基因ihpRNA干扰载体的构建及转拟南芥验证

 根据平邑甜茶液泡加工酶（vacuolar processing enzyme）基因MhVPE（GenBank登录号为FJ891065）cDNA序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物F1/F2和R1/R2,以pMD-MhVPE质粒为模板,分别克隆了用于构建干扰载体的正反义片段pMD-F和pMD-R。将该正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建成了含有内含子发夹结构的ihpRNA表达载体pART-RNAi-MhVPE。通过农杆菌介导,用花序浸泡法转化拟南芥进行验证,经过抗性筛选和PCR检测,得到17株转基因阳性植株;半定量RT-PCR结果显示所获得的转基因拟南芥植株中AtVPE同源基因的表达量明显降低,表明该干扰载体能够有效抑制VPE基因的表达,MhVPE基因的ihpRNA干扰载体构建成功,为进一步鉴定该基因的功能奠定了基础。     

核桃无融合生殖研究进展

1孤雌生殖的概念孤雌生殖(parthenogenesis)也称单性生殖,即卵不经过受精也能发育成正常的新个体。孤雌生殖是植物无融合生殖的一种主要生殖方     

核桃（Juglans regia）的无融合生殖能力

对早实核桃类型及晚实核桃类型１０份材料,花前套袋不授粉处理,观察其坐果率。证明两种类型核桃品种均具有无融合生殖能力,且雌先型无融合生殖能力低于雄先型,不同年份之间也有差异。     

韭菜无融合生殖诱导初步研究

在被子植物中，韭菜(Allium tuberosum Rottl．exSpr．)的生殖过程比较特殊，早在20世纪30年代Moдилевский发现韭菜的卵细胞、助细胞、反足细胞和珠被细胞都具有胚胎发生能力，在每个胚囊中都有多胚发生，但在种子成熟时，一般只保留合子胚或不定胚。胡适宜提出韭菜中具有无融合生殖现象，但对此方面的研究还很少。     

无融合生殖苹果属植物的某些特性

本文对苹果属植物( Malus)中具有无融合生殖特性的锡金海棠( M.sik-kimensis)、变叶海棠(M.toringoides)、三叶海棠(M.sieboldii)和湖北海棠( M.hupehensis)等4个种的7个类型进行了生物学特性观察及过氧化物酶同工酶测定,发现无融合生殖的种类具有如下特点:1.生长发育整齐一致,2.过氧化物酶同工酶酶谱整齐度高;3.去雄套袋能结实。用无融合生殖的种类做砧木嫁接苹果品种,生长比较整齐。特别是用平邑甜茶做砧木的果树,生长势强,产量高,具有较高的生产利用价值。但所嫁接的品种接穗应选用无病毒的。     

核桃(Juglans regia)的无融合生殖能力

对早实核桃类型及晚实核桃类型１０份材料,进行花前套袋不授粉处理,观察其坐果率。证明两种类型核桃品种均具有无融合生殖能力,且雌先型无融合生殖能力低于雄先型,不同年份之间也有差异。     

平邑甜茶幼苗生长、根构型及吸收特性的容器调控

 以平邑甜茶[Malus hupehensis (Pamp.) Rehd.] 幼苗为材料, 研究了栽培容器形状对幼苗新梢生长、幼苗根构型特征及根系营养吸收特性的影响。结果显示, 生长在“深窄盆”中的幼苗新梢生长量最大, 主根粗, 侧根多且短, 毛细根丰富, 对钙及锌的吸收能力较强, 但根系活力及根系对磷、铁的吸收能力较弱; “等高径盆”中幼苗新梢生长量小, 根冠比接近1, 主根细短、一级侧根少且粗长, 对钾的吸收能力较强; “浅宽盆”幼苗根冠比最大, 一级侧根数量、长度和粗度居中, 二级侧根粗长, 根系活力及根系对磷、铁的吸收能力较强, 但对钾、钙及锌的吸收能力弱。     

平邑甜茶(Malus hupehensis)胚囊种类与发生特性

应用石蜡切片技术对结果期平邑甜茶的胚囊发生与形成过程进行了详细观察,以确定胚囊种类和发生特性。结果表明,平邑甜茶胚珠倒生,大孢子母细胞在盛花期前3～5d的花蕾期能减数分裂形成四分体并由合点端的大孢子发育成有性胚囊;到盛花期,多数有性胚囊败育,少数发育为八核胚囊。平邑甜茶的无性胚囊原始细胞始于盛花期前后靠近合点端的珠心细胞,并很快发育为单核无性胚囊,盛花后5～7d的坐果初期形成无性的八核胚囊。无孢子生殖胚囊可以单个发育,也可以多个发生而形成复合胚囊;其原始细胞发生的持续时间为10d左右。     

多菌灵与微生物有机肥复合对连作平邑甜茶幼苗及土壤的影响

为探索多菌灵与微生物有机肥对苹果连作障碍的缓解效果,以连作土盆栽平邑甜茶幼苗为试材,研究了多菌灵、微生物有机肥对平邑甜茶幼苗生长和土壤环境的影响。结果表明:与连作土对照相比,多菌灵和微生物有机肥复合施用可提高根系呼吸速率,促进根系生长,提高幼苗生物量,其中株高提高了38%,呼吸速率提高了36%;细菌/真菌值达到连作土对照的19.07倍;改变了土壤真菌群落结构,其中复合处理具有较高的优势度指数与较低的多样性、均匀度、丰富度指数;微生物有机肥、多菌灵与微生物有机肥复合施用对土壤酶有显著促进作用。因此,多菌灵与微生物有机肥复合施用可以更好地缓解苹果连作障碍。     

平邑甜茶叶片不定芽再生及NO的效应

以平邑甜茶继代组培苗叶片为材料,研究了一氧化氮供体——硝普钠(SNP)、6-BA、NAA、2,4-D、ZT和光暗条件对平邑甜茶叶片不定芽再生的影响。结果表明,6-BA、ZT、NAA和暗培养均有利于叶片不定芽的分化;在含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中,加入6.0和12.0 mg·L^-1的SNP可极显著地诱导叶片不定芽的分化;以MS+ 6.0 mg·L^-1 BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 0.2 mg·L^-1 ZT+ 6.0 mg·L^-1 SNP为培养基,暗培养15 d,叶片不定芽分化效果最好,再生率达67.8%。