菊花营养生长期观赏性状的RAPD和ISSR标记

（College of Horticulture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China）     

卡特兰DUS测试性状与SSR标记的关联分析

为挖掘与卡特兰（Cattleya）表型性状显著相关的分子标记,对160份卡特兰品种的63个DUS（特异性、一致性和稳定性）测试性状进行鉴定描述,用筛选得到的22对核心SSR引物对这些品种进行遗传多样性分析,并利用TASSEL2.1软件的一般线性模型（generallinearmodel,GLM）和混合模型（mixed linear model,MLM）依次对供试品种8个主要观赏性状进行关联分析。研究结果显示,22对核心SSR引物共得到293个等位变异位点,变异幅度在3～28之间,PIC值平均为0.8531,平均Shannon’s信息指数（I）为2.3280。基于Nei’s遗传距离进行聚类分析,可将160份卡特兰品种分为两大种群。GLM模型分析共检测到17个标记分别与4个性状相关联;MLM共检测到15个标记分别与6个性状相关联;共有15个标记被两种模型同时检测到与表型性状相关联。SSR42和SSR9这两个标记在两种模型中多次出现,与花长度、花颜色和中萼片性状等多个性状相关联,体现了“一因多效”现象。     

樱桃种质SCoT分子标记与叶片表型性状关联分析

利用本研究中建立的樱桃SCoT标记分析体系,进行适宜引物筛选,进而对12个樱桃品种进行SCoT分子标记、叶片表型性状遗传多样性及两者关联分析.结果 显示:从102条SCoT标记引物中筛选出46条适宜樱桃遗传分析的标记引物,筛选率达45.1％;参试的18条SCoT引物共获得等位位点数77个,其中多态性位点65个,多态性比...     

与苹果果皮红色性状相关的RAPD分子标记的筛选

用355条10bp随机引物来筛选与苹果果实红色性状连锁的分子标记。通过分离群体分组分析,在果实红色与非红色2个对比基因池间进行了扩增筛选,初步选出49个多态性引物,进一步对这些多态性引物进行群体上的分析发现S519可以扩增出大约1000bp左右的一条与红色性状相关的DNA特异带。对本研究的73个来自3个不同杂交组合的F1后代个体分析表明,该标记判断果实红色性状的符合率为76.7%。鉴于获得的多态性标记对果皮颜色预测的准确率不高的现状,我们采用了双标记组合分析方案,即用S5191000分别与以往获得的3个与果色性状相关的标记(S12891200、S12351000和S21071200)配对组合进行判断,从而使得标记对目标性状预测的正确性大为提高。另外,对总共获得的4个RAPD标记在9个栽培品种上进行了分析,大多数品种的表现与理论一致。     

菜心重要农艺性状与SSR分子标记的关联分析

菜心是华南地区的主要蔬菜,利用分子标记辅助育种发掘出与重要农艺性状相关的分子,不仅可以加速优良品种的选育进程,还可以定向地优化目标性状,培育出高产优质的菜心品种.本研究选用148 份来自宁夏银川和广东南沙田间种植的菜心种质材料,采集株高、株质量、薹高、薹质量和薹粗5 个重要农艺性状的数据;利用SSR 标记对其进行基因分...     

菊花观赏性状的配合力分析

选用3个切花菊品种为母本,4个盆栽小菊为父本,以3 × 4不完全双列杂交（NC II）设计衍生的12个家系实生苗为材料,估算了菊花（Dendranthema × grandiflorum）7个观赏性状的配合力和群体遗传参数。结果表明：（1）花径、舌状花数和舌状花长主要由加性基因效应控制,株高和叶长主要由非加性基因效应控制,叶宽和舌状花宽可能由加性和非加性两种基因效应共同控制。（2）‘早意红’在7个观赏性状上均具有正向的一般配合力（GCA）效应,综合表现较好;在培育重瓣性高的品种时,‘Herby’ 可以作为重要亲本;‘Herby’ב玉满堂’,‘青心红’ב早意红’和‘红雀舌’ב03-11-2’杂交组合在大部分性状上具有正向的特殊配合力（SCA）效应,杂种后代综合表现较好。（3）群体配合力方差及其对杂种贡献率表明,除舌状花宽外,其他6个观赏性状具有不同程度的母本效应;7个观赏性状广义遗传力（h2B）差异较大,其中舌状花宽最小,为59.56%,舌状花数最大,达80.40%;除舌状花数的狭义遗传力（h2N）达到80.40%外,其他6个性状的低于50%,说明舌状花数的遗传稳定性高,早期世代时应增加选择压。     

生菜资源表型性状变异及其与SSR标记的关联分析

从世界范围内搜集的300多份生菜资源中筛选30份优质资源作为研究对象,调查12个表型性状变异,并进行SSR分子标记分析,探究表型性状与SSR标记之间的相关关系,以期为生菜分子标记辅助育种提供参考依据。结果表明:调查的30份资源表型性状均存在极显著差异,平均变异系数最大的为株幅(40.256%)。12个表型性状将30份生菜资源分成两大类,30份资源的遗传距离变化范围为0.083~0.667。14个多态性EST-SSR标记在30份生菜资源中扩增的条带数为3~8,HO和HE的平均值分别为0.156和0.680,PIC值变化范围为0.466~0.771。同样,14个标记将30份资源分成两大类,30份资源间的遗传距离为0.032~2.629,表型性状聚类结果与SSR标记聚类结果不相关。以单一性状聚类结果与SSR标记聚类结果进行相关性分析,大部分标记均与表型性状有相关性,且大部分引物组合表现为累积效应。     

菊花观赏性状的配合力分析

选用3个切花菊品种为母本,4个盆栽小菊为父本,以3X4不完全双列杂交（NCII）设计衍生的12个家系实生苗为材料,估算了菊花（Dendranthema×grandiflorum）7个观赏性状的配合力和群体遗传参数。     

二十四个朱顶红品种观赏性状分析及杂交育种研究

以24个朱顶红品种为试材,采用定期观测的方法,研究了不同品种的主要观赏性状以及品种差异对杂交结实率的影响,以期为新的具有自主知识产权的朱顶红品种的选育提供参考依据。结果表明:不同品种间的朱顶红在观赏性状上存在差异,花色主要有大红色、粉色、白色、红白相间等,花类型包括单瓣和重瓣不同品种,部分品种如"白色"和"圣诞快乐",品种间花葶高度相差较大,"白色"花葶长达52.80cm,"圣诞快乐"仅17.69cm,分别可作为切花或盆花选育的良好材料。根据优势互补原则,设计了34个杂交组合,对杂交结果进行了统计,"圣诞快乐""法拉利""红狮"等品种具有良好的杂交结实率,其中"圣诞快乐"作为母本时,有5个杂交组合的结实率均在88.09%以上,是后续杂交育种优良亲本材料。     

石蒜属资源观赏性状分析及杂交育种研究

以18个石蒜属资源为试材,采用定期观测结合流式细胞仪倍性鉴定的方法,研究了不同石蒜属资源的主要观赏性状、倍性以及不同杂交组合对结实率的影响,以期为新的具有自主知识产权的石蒜品种的选育提供参考依据。结果表明:不同石蒜属资源在观赏性状上存在差异,花色主要有大红色、蓝紫色、白色、黄色等,部分资源如长筒石蒜和中国石蒜,花葶长达56.41~62.24 cm,花大健壮,是用作切花的良好材料。对石蒜属资源的倍性进行分析,鉴定到二倍体种质12份,三倍体种质6份。根据优势互补原则,设计了64个杂交组合,对杂交结果进行了统计,换锦花、中国石蒜、红蓝石蒜和长筒石蒜等资源具有良好的杂交结实率,是后续杂交育种优良亲本材料。     

运用RAPD对核桃属种间亲缘关系的研究

用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术对核桃属内９个种及近缘属的２个种进行基因组ＤＮＡ多态性分析,共选用２０个１０ｂｐ随机引物扩增出３１１个ＤＮＡ片段,其中铁核桃Ｊ．ｓｉｇｉｌｌａｔａ,甘肃枫杨Ｐ．ｍａｃｒｏｐｔｅｒａ显示出自身特征性标记,利用这些片段进行遗传关系分析,根据ＵＰＧＭＡ方法构建聚类树状图。研究结果表明：铁核桃为核桃属中一个独立种;核桃属内组间和种间亲缘关系与经典分类学的结果完全一致;     

菊花品种表型性状与SSR和SCoT分子标记的关联分析

利用16对SSR和10对SCoT引物对99个菊花品种的基因组变异进行扫描,分析其群体结构,并采用一般线性模型GLM和混合线性模型MLM方法对10个表型性状进行关联分析。供试群体Shannon’s指数为1.46~2.52。群体遗传结构分析将99个菊品种划分为5个亚群。GLM分析发现有8个SSR位点与7个表型性状相关联(P0.01),其中与3个花部性状(花序直径、花序高度、舌花宽度)相关位点5个,与4个营养性状(叶柄长度、叶片长度、托叶大小及叶一级刻度)相关位点4个,各位点对表型变异的解释率在0.06~0.40之间;3个SCoT位点与花序直径相关联。MLM分析发现3个SSR位点与4个表型性状相关联。MLM中检测到的标记JH42、JH81和JH86在GLM中同样被检测到,但解释率稍低。     

17种绣线菊核型特征及核型参数分析

以17种(品种)绣线菊为材料,利用改良去壁低渗法分析染色体特征并作相关性和聚类分析,探讨核型特征与种间进化关系。研究结果表明:供试绣线菊染色体数稳定,为2n=18和2n=36,染色体基数为9,主要由中部着丝点染色体(m)和近中部着丝点染色体(sm)组成。绒毛绣线菊、石蚕叶绣线菊、楔叶绣线菊染色体中有随体结构;核型类型为1A、1B、2B,染色体平均臂比范围为1.26～1.64,最长与最短染色体比值范围为1.67～3.51,着丝点指数范围为38.96%～44.26%,核型不对称系数范围为56.14%～60.69%;按核型不对称系数从高到低排序其进化程度,石棒绣线菊、绒毛绣线菊和楔叶绣线菊等进化程度高,珍珠绣线菊、石蚕叶绣线菊和三亚绣线菊等进化程度低;核型参数的重要性排序为核型不对称系数平均臂比臂比大于2的比率染色体最长/最短值核型类型着丝点指数均值;17种绣线菊核型参数在种间存在差异,可作为绣线菊属植物分类依据;核型特征聚类分析将17种绣线菊分为4组。     

青花菜相同亲本的DH 与F2 群体遗传多样性的比较

 以表型差异明显的两个青花菜（Brassica oleracea var. italica）高代自交系为材料杂交获得F₁,通过游离小孢子培养技术和人工自交方法,分别构建了由176个DH系组成的DH群体和由176个单株组成的F₂群体。采用性状分离分析和群体遗传多样性分析方法,对两个群体13个主要农艺性状的平均值、变异系数及性状分离区间等遗传表现进行分析。结果表明：13个主要农艺性状均是受多基因控制的数量性状,在DH群体和F₂群体中均发现了正向和负向两个方向的超亲基因型,两群体的平均变异系数和遗传多样性指数相近。可见,通过DH 技术育种不仅可以加快亲本的纯化进程,而且可获得广泛分离的育种资源,从而提高育种效率。     

枸杞RAPD反应体系的优化

现以枸杞基因组DNA为模板,对其RAPD反应体系进行优化以确定最佳反应体系。结果表明:在总体积25μL中Mg2+(2.5 mM)、模板DNA(25 ng)、引物浓度(0.6μM)、dNTPs(0.25 mM)和TaqDNA聚合酶(2.0 U)时,PCR扩增效果最好并能获得较清晰的枸杞DNA指纹图谱。     

十八个麝香百合基因型遗传差异性的RAPD分析

对18个麝香百合基因型的遗传差异性进行了RAPD分析,筛选具有优良性状的新品种,并尝试使用RAPD标记技术的DNA指纹图谱作为DUS测试的分子生物学依据.结果表明:14条引物共扩增出142条带,其中多态性条带106条,多态百分比为74.65%,总体多态百分比不是很高,说明各基因型之间遗传差异较小.对RAPD扩增结果进行聚类分析,这18个基因型可以分成4类.一些引物扩增的结果显示,部分基因型具有特异性条带,说明RAPD技术在DUS测试中可以从分子生物学性状来鉴定新品种的特异性.     

大白菜裂球性状的遗传与RAPD标记

以有裂球现象的杂交一代大白菜单株自交构建的F2群体为试材,研究了大白菜裂球性状的遗传规律及其分子标记。调查统计分析表明:延长生育期20d为大白菜裂球性状的最佳分析时期,其F2群体中不裂球与裂球植株符合3∶1分离比例,说明裂球性状是受1对隐性主基因控制的,同时发现分离后代单株间裂球的速度和程度存在差异,说明裂球性状还受到微效基因和环境条件的影响。同时以06J31×92S24产生的F2群体为材料,采用BSA法进行裂球性状RAPD标记,从600个随机引物中筛选出1个与裂球基因紧密连锁的RAPD标记S15-222。连锁分析发现,标记S15-222与裂球基因间的遗传距离为8.876cM,可用于大白菜耐裂球材料的分子标记辅助选择。