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根据GenBank登陆大豆天冬酰胺合成酶(AS-B)基因序列(登录号:GMU55874)设计特异引物,通过PCR扩增从大豆(Glycine max)cDNA中克隆出AS-B基因。将该基因克隆到pET30a(+)载体,构建重组表达载体pET30a-AS,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS,并进行表达条件优化。结果表明,在16℃条件下,经0.5mmol·L-1IPTG诱导14 h,大部分重组AS-B以可溶性蛋白的形式存在。经Ni-NTA亲和层析和Sephadex G50脱盐后,重组蛋白产率为23.4 mg·L-1,纯度>90%,以L-谷氨酰胺和NH4Cl为氮源供体时,其比活力分别为2.32和2.60μmol·min-1.mg-1。研究结果为研究大豆AS-B结构与功能和酶催化动力学机制及建立AS-B抑制剂的高通量筛选平台奠定基础。 相似文献
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[目的]为降低L-天冬酰胺酶Ⅱ的生产成本提供依据。[方法]通过PCR反应扩增大肠杆菌JM109成熟区的L-天冬酰胺酶II基因(ansB),将扩增片段与pMD18-T载体连接,构建重组质粒pMD18-T-asp。对pMD18-T-asp与质粒pET-22b进行双酶切后,将它们连接起来,转化感受态细胞,筛选重组表达载体pET-22b-asp。利用重组表达载体pET-22b-asp转化BL21(DE3),并对其发酵条件以及分离、纯化工艺进行了初步研究。[结果]成功克隆长度为960 bp的L-天冬酰胺酶II基因。重组表达载体pET-22b-asp也构建成功,并在BL21中得到表达。在重组菌接入TB培养基后2 h加入IPTG、培养基的初始pH值为7.2、装液量为12%,L-天冬酰胺酶Ⅱ酶活最高。重组天冬酰胺酶的纯化收率为82%,比活力达196 U/mg。[结论]重组天冬酰胺酶的胞外表达大大简化了其分离步骤。 相似文献
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氮素代谢对小麦生理特性的影响研究进展 总被引:1,自引:1,他引:1
阐述了氮素对小麦光合作用、氮素循环、籽粒产量、品质等方面的影响,并认为,在育种中应选育高效吸收和利用氮素的双高效基因型品种,同时采用合理的氮肥运畴。 相似文献
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论述了植物淀粉生物合成酶的酶学特性,主要包括ADPase催化合成ADP-葡萄糖、GBSS合成直链淀粉、多种SSS合成支链淀粉、SBE参与支链淀粉形成、DBE参与支链淀粉的合成等内容。 相似文献
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玉米硫素营养状况及应用研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
随着全球气候的变暖和土壤缺硫现象的加剧,进一步加强玉米硫素营养的研究十分必要。综述了玉米硫素营养状况以及硫对玉米产量及品质的影响、硫素在玉米生理代谢中的作用、硫与玉米的抗逆性等方面的研究进展,提出了下一步的研究重点和方向。 相似文献
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药用植物抗旱研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
从生长发育、生理生化、有效成分等方面概述了近年来药用植物对干旱胁迫响应的研究成果,提出了提高药用植物抗旱性的途径,以期为药用植物抗旱机理研究和探索提供一定理论依据。 相似文献
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