淡水鱼肌球蛋白Ca2+-ATPase热稳定性的季节变化

对来自春季（4月份）、夏季（8月份）、秋季（11月份）和冬季（1月份）的草鱼（Ctenopharyngodon idellus）和鲢（Hypophthalmichthys molitrix）骨骼肌肌球蛋白进行提取和纯化,通过测定肌球蛋白在不同热变性温度下Ca^2＋-ATPase的变性速率常数（KD）,考察了两种淡水鱼肌球蛋白热稳定性的季节变化.研究结果表明,两种鱼肌球蛋白Ca^2＋-ATPase的活性均显示夏季鱼＞春季鱼＞秋季鱼＞冬季鱼.在35 ℃、40 ℃、45 ℃和50 ℃的热变性温度下,测定了两种鱼的肌球蛋白Ca^2＋-ATPase变性速率常数（KD）,证明了肌球蛋白的热变性符合一级反应速度方程.经35 ℃热变性的肌球蛋白的KD值显示了冬季鱼约为夏季鱼的4倍,而秋季鱼和春季鱼介于冬季鱼和夏季鱼之间,且秋季鱼的KD值略低于冬季鱼,而春季鱼的KD值略高于夏季鱼.在40 ℃、45 ℃和50 ℃的热变性温度下,对各种肌球蛋白测得的KD值的变化趋势与上述结果相似.本研究证明了淡水鱼肌球蛋白的热稳定性夏季鱼明显优于冬季鱼,而春季鱼和秋季鱼分别与夏季鱼和冬季鱼的相似.     

淡水鱼肌球蛋白Ca2+-ATPase热稳定性的季节变化

对来自春季（4月份）、夏季（8月份）、秋季（11月份）和冬季（1月份）的草鱼（Ctenopharyngodon idellus）和鲢（Hypophthalmichthys molitrix）骨骼肌肌球蛋白进行提取和纯化,通过测定肌球蛋白在不同热变性温度下Ca^2＋-ATPase的变性速率常数（KD）,考察了两种淡水鱼肌球蛋白热稳定性的季节变化.研究结果表明,两种鱼肌球蛋白Ca^2＋-ATPase的活性均显示夏季鱼＞春季鱼＞秋季鱼＞冬季鱼.在35 ℃、40 ℃、45 ℃和50 ℃的热变性温度下,测定了两种鱼的肌球蛋白Ca^2＋-ATPase变性速率常数（KD）,证明了肌球蛋白的热变性符合一级反应速度方程.经35 ℃热变性的肌球蛋白的KD值显示了冬季鱼约为夏季鱼的4倍,而秋季鱼和春季鱼介于冬季鱼和夏季鱼之间,且秋季鱼的KD值略低于冬季鱼,而春季鱼的KD值略高于夏季鱼.在40 ℃、45 ℃和50 ℃的热变性温度下,对各种肌球蛋白测得的KD值的变化趋势与上述结果相似.本研究证明了淡水鱼肌球蛋白的热稳定性夏季鱼明显优于冬季鱼,而春季鱼和秋季鱼分别与夏季鱼和冬季鱼的相似.     

草鱼肌原纤维蛋白加热过程中理化特性的变化

考察草鱼肌原纤维蛋白在加热过程中各理化特性的变化规律和机理。结果表明:随着温度的上升,浊度呈S型曲线增加,48℃时上升迅速;黏度呈反S型曲线下降,46℃时下降剧烈;Ca2+-ATPase活性下降,在36～42℃略有上升,46℃时完全失活;总巯基含量从40℃开始显著下降,60～70℃时下降显著。分别于45、55和65℃恒温加热,Ca2+-ATPase活性和黏度随时间延长而下降,浊度上升,温度越高变化越显著;大于50℃恒温加热,总巯基随时间延长而显著下降。草鱼肌原纤维蛋白的DSC扫描图谱在46.37℃和62.59℃出现2个焓变点。SDS-PAGE电泳表明草鱼肌原纤维蛋白在加热过程中(大于45℃)产生了二硫键,说明草鱼肌球蛋白在加热过程中发生了构象变化和分子聚集从而导致了肌原纤维蛋白的热变性。     

漂洗水温对淡水鱼鱼糜蛋白质热变性的影响

以青鱼、草鱼、鲢、鳙、卿5种淡水鱼为研究对象，研究淡水鱼糜加工中漂洗水温对蛋白质热稳定性的影响。实验结果表明：⑴5种鱼肉经漂洗后的肌原纤维Ca^2 -ATPase活性及凝胶强度均随漂洗水温上升而降低，并且在水温达15℃时有一加速下降的转折点；⑵鲫蛋白质受漂洗水温影响最小，其余依次为草鱼、青鱼、鲢、鳙。     

漂洗水温对淡水鱼鱼糜蛋白质热变性的影响

以青鱼、草鱼、鲢、鳙、卿5种淡水鱼为研究对象，研究淡水鱼糜加工中漂洗水温对蛋白质热稳定性的影响。实验结果表明：⑴5种鱼肉经漂洗后的肌原纤维Ca^2 -ATPase活性及凝胶强度均随漂洗水温上升而降低，并且在水温达15℃时有一加速下降的转折点；⑵鲫蛋白质受漂洗水温影响最小，其余依次为草鱼、青鱼、鲢、鳙。     

GAPC2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

研究采用PCR法以拟南芥cDNA为模板扩增GAPC2基因片段,克隆至原核表达载体PET28a（＋）上,经0．25、0．5mMIPTG分别在37℃和20℃诱导后,再使用SDS-PAGE电泳检测融合蛋白的表达水平。结果表明：原核表达载体PET28a（＋）-GAPC2构建正确,并且能在大肠杆菌BL21中成功表达,其融合蛋白分子量为37KD。     

牛myf6基因真核表达载体的构建及在成肌细胞中的表达

【目的】构建牛myf6基因真核表达载体,并观察myf6真核表达载体转染鲁西黄牛成肌细胞后基因的表达和细胞形态的变化。【方法】在质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点插入myf6基因构建真核表达载体pIRES2-EGFP-myf6,用脂质体技术转染鲁西黄牛成肌细胞,通过G418 筛选出稳定转染的细胞株。利用Western印记、Real-time PCR技术检测成肌细胞转染前后myf6基因、肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的表达量。【结果】与对照组相比,转染质粒的成肌细胞myf6蛋白和mRNA的表达量提高（P＜0.01）,肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的mRNA表达量提高（P＜0.01）。细胞形态观察显示成肌细胞融合为肌管。【结论】构建的真核表达载体pIRES2-EGFP-myf6能在成肌细胞中高效表达,myf6基因促进了成肌细胞向肌肉细胞分化。     

水稻谷氨酰胺合成酶同工型基因转录表达量与启动子结构关系分析

研究选用籽粒蛋白质含量差异显著的5个品种(系),比较分析品种间GS同工型基因在灌浆过程中籽粒和叶片表达特性及启动子序列与结构特点。结果表明,不同品种间OsGS同工型基因表达量差异显著;OsGS1;1和OsGS1;2基因在籽粒和叶片中大量表达;OsGS1;3和OsGS2基因分别仅在籽粒和叶片中大量表达;在灌浆过程中籽粒和叶片中OsGS同工型基因m RNA表达量均呈单峰曲线变化,灌浆前期m RNA表达量平稳升高,中期出现峰值,后期快速降低,且高蛋白质含量品种m RNA表达量高于低蛋白质含量品种。籽粒蛋白质含量差异显著品种间OsGS同工型基因启动子序列同源性高达99%以上;品种间有性杂交子代OsGS同工型基因启动子序列可发生碱基变化,但启动子核心元件无变化。在调控元件数量和功能上OsGS同工型基因启动子保守性很强,启动子在结构和功能上不易发生遗传变异,籽粒OsGS同工型基因m RNA表达量变化受OsGS基因启动子调控影响较小。     

差示扫描量热法检测猪、牛、羊肉加热终点温度

【目的】利用差示扫描量热法（differential scanning calorimetry,DSC）对猪肉、牛肉和羊肉样进行扫描,寻找其热处理温度与热相图之间的关系,探究一种灵敏、高效的EPT检测方法,为肉制品在实际生产流通中的EPT检测提供理论依据。【方法】将一定体积（2.0 cm×1.0 cm×1.0 cm）的猪肉、牛肉、羊肉块分别进行不同温度（猪肉、羊肉：50℃、60℃、70℃和75℃;牛肉50℃、55℃、65℃、70℃和75℃）的热处理,当达到相应的中心温度时停止加热,冷却至中心温度为4℃,从中心取约100.0 mg肉样（以生肉样为对照）于热分析铝坩埚中,将肉样在坩埚底部压实,并加盖密封,以空坩埚作为参比,4℃条件下隔夜平衡。从40℃加热到80℃,升温速率为1℃/min,样品室氮气流量20 mL·min^-1,保护气流量60 mL·min^-1,进行DSC扫描,由此获得不同温度热处理肉样的DSC热相图。【结果】未经热处理的生猪肉、羊肉、牛肉样经扫描分别得到3个峰,对应不同的起始温度（猪肉：50.83℃、60.54℃、71.02℃;羊肉：50.76℃、59.82℃、70.46℃;牛肉：50.25℃、56.29℃、71.92℃）和变性焓（猪肉：0.4656 J·g^-1、0.1394 J·g^-1、0.2053 J·g^-1; 羊肉：0.0899 J·g^-1、0.3116 J·g^-1、0.3842 J·g^-1;牛肉：0.1078 J·g^-1、0.4151 J·g^-1、0.3662 J·g^-1）。当热处理温度为50℃时,3种肉样的热相图与未经热处理生肉样相比,未出现显著变化;当热处理为60℃（牛肉为55℃）时,3种肉热相图中第1个峰消失,第1个峰和第2个峰的起始温度变化不显著（P＞0.05）,但变性焓显著降低（P＜0.05）;当热处理为70℃（牛肉为65℃和70℃）时,3种肉热相图中第2个峰也消失,第3个峰起始温度变化不显著（P＞0.05）,变性焓显著降低（P＜0.05）;当热处理温度达到75℃时,猪、牛、羊肉样的3个峰完全消失。可以发现,随着热处理温度的升高,肉样峰对应的变性焓值逐渐降低,不同温度热处理肉样的热相图差异明显,本研究对不同温度热处理肉样检测成功。【结论】通过不同温度处理后肉样的DSC变性峰和变性焓,可知3种肉的热变性程度对温度有特异性。因此,可采用DSC法判定畜肉的热变性程度,从而应用于肉制品加工过程中EPT的检测。     

南海鸢乌贼肌原纤维蛋白加热过程中理化性质的变化

为研究南海鸢乌贼Symplectoteuthis oualaniensis肌原纤维蛋白在加热过程中理化性质的变化,以南海鸢乌贼胴体肌肉为原料,对其肌原纤维蛋白在加热过程中浊度、溶解度、Ca~(2+)-ATPase活性和总巯基(-SH)含量进行了测定,并对该蛋白质在整个加热过程中SDS-PAGE电泳图的变化进行了研究。结果表明:在25~35℃时,鸢乌贼肌原纤维蛋白的浊度、溶解度、Ca~(2+)-ATPase活性、总巯基含量的变化均比较缓慢;在35℃后继续升温,浊度、Ca~(2+)-ATPase活性、总巯基含量均发生明显变化;总巯基含量在40~50℃时出现短暂升高现象后又急剧降低,溶解度在50℃时开始明显降低;在25~35℃时,随着温度的逐渐升高,鸢乌贼肌原纤维蛋白的肌球蛋白重链(MHC)略有减少,副肌球蛋白(PM)和肌动球蛋白(Actin)基本上未发生变化,但在35℃后,鸢乌贼肌原纤维蛋白开始产生大分子物质,逐渐发生变性。     

大中华鳋感染引起草鱼鳃粘液成分的变化

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和明胶酶谱分析,对感染大中华鳋的草鱼与未感染大中华鳋的健康草鱼鳃粘液进行比较分析。结果表明：健康草鱼和感染大中华鳋的草鱼鳃粘液图谱中有2条带出现差异,感染大中华鳋的草鱼鳃粘液在32kD-34kD处具有蛋白酶活性,而未感染大中华鳋的草鱼鳃粘液在32kD-34kD处没有蛋白酶活性。     

脆肉鲩与普通草鱼肌肉显微结构观察

【目的】观察对比脆肉鲩与普通草鱼肌肉显微结构的差异,为脆肉鲩的肉质加工提供科学依据。【方法】采集脆肉鲩和普通草鱼的背部白肌、背部红肌和腹部白肌,经石蜡组织切片和苏木素-伊红染色后,显微镜下观察肌纤维的形态特征,用肌纤维直径和密度两个指标衡量脆肉鲩与普通草鱼的肌纤维差异。【结果】脆肉鲩和普通草鱼背部白肌、腹部白肌及背部红肌的基本结构相同。脆肉鲩背部白肌的肌纤维直径（67．6μm）显著小于普通草鱼（109．4μm）（P〈0.05,下同）,肌纤维密度（249条／mm2）N显著大于普通草鱼（121条／mm2）;在腹部白肌和背部红肌的肌纤维直径、肌纤维密度方面,脆肉鲩与普通草鱼无显著差异（P〉0．05）。【结论】脆肉鲩肌肉的肌纤维直径及密度与其肌肉硬度具有一定相关性。     

温度、盐度、非离子氨对不同驯化时间蒙古裸腹溞存活、生殖和种群增长的影响

为了进一步了解在室内海水中长期培养对蒙古裸腹溞Moina mongolica种群增长能力所产生的影响,研究了晋南品系不同采集时间的两溞种（1982溞和2006溞）对极端环境的耐受性,以及在温度为25～32℃、盐度为15～35、非离子氨（NH3-N）为1.05～6.62 mg/L条件下两溞种的生殖和种群增长能力？？果表明：1982溞较2006溞更具有较强的耐极端环境的能力;温度对两溞种生殖和种群增长的影响差异均显著,两溞种的生殖指标和内禀增长率无明显差异,其最适温度均为28℃;在盐度为15～35时,两溞种的生殖和种群增长差异不显著;非离子氨的影响显著,驯化时间增长能改变溞对非离子氨的适应能力？说明在海水中长期培养蒙古裸腹溞对该溞的种群增长能力不会产生明显的不良影响,但在高温、高盐、高非离子氨条件下,1982溞表现出较强的耐受性,更适合作为海水大规模培养的对象。     

临界生长温度锻炼对棉苗中POD活性及抗冷性的影响

为了研究临界生长温度锻炼对棉苗抗冷性的影响,本文将棉苗经过不同低温(12℃、14℃、16℃)锻炼7 d后,对其进行较长时间(7 d)的低温(4℃)胁迫,然后测定与抗冷性密切相关的过氧化物酶(POD)活性以及丙二醛(MDA)含量;并从理论上探讨了与其相关的可能机理。结果表明经不同(12~16℃)低温锻炼7 d后,在冷胁迫下所有参试棉花品种的幼苗,其过氧化物酶(POD)活性都比相应的对照有不同程度的增加,丙二醛含量都比相应的对照明显降低。其中尤以锻炼温度为12℃时效果最明显。由此可以认为:用临界生长温度(12℃)锻炼棉苗,由于提高了POD活性、降低了MDA含量,从而保护了膜结构,提高了棉苗对4℃低温的耐受能力。     

塔里木河流域叶尔羌高原鳅热耐受性的初步研究

为了研究不同温度对叶尔羌高原鳅热耐受性特征的影响,在水温分别为10、20、30℃的条件下,对叶尔羌高原鳅进行2～4周的驯化,以1℃/h的变温速率连续观测试验鱼的耐受温度.结果表明:各驯化温度下的最高临界温度(CTmax)、最高致死温度(LTmax)分别为35.0、36.0、36.5℃和37.4、38.0、38.5℃,最低临界温度(CTmin)和最低致死温度(LTmin)分别为;6.7、7.0,7.5℃和0.3、0.5、1.0℃.随着驯化温度的提高,致死温度的上限和下限也提高,即耐高温的能力增强,耐低温的能力减弱.经计算,叶尔羌高原鳅在各驯化温度下的温度耐受幅分别为28.3、29.0、29.0℃;在10℃～20℃的驯化温度范围内高、低温驯化反应率分别为0.10和0.05,而在20℃～30℃驯化温度范围内高、低温驯化反应率分别为0.03和0.05;热耐受区域面积为576.5℃;表明叶尔羌高原鳅的热耐受性明显有赖于驯化温度.     

全植物蛋白饲料中添加植酸酶对草鱼生长、非特异性免疫及消化酶活力的影响

选用初始体重为（39.68±3.05）g的草鱼作为试验对象,在全植物蛋白基础饲料中,设5个不同的植酸酶添加水平（500、750、1 000、1 250、2 500 U/kg）,另设2个对照组,对照组1（D1）：全植物蛋白基础饲料添加无机磷（Ca（H2PO4）2）,对照组2（D2）：全植物蛋白基础饲料不添加植酸酶和无机磷,开展了为期8周的饲养试验。研究了植酸酶对草鱼生长、非特异免疫及消化酶活力的影响。结果表明：对照组1鱼体的特定生长率最大,FCR显著低于其它各组（P〈0.05）;与对照组2相比,当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时,草鱼的饲料系数显著降低、蛋白质效率、特定生长率得到显著提高（P〈0.05）。当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时,血清超氧化物歧化酶（SOD）活性显著大于对照组2（P〈0.05）,对照组1的血清SOD活性显著高于其它各组（P〈0.05）;血清及肝胰脏中各组碱性磷酸酶（AKP）活性无显著性差异（P〉0.05）;添加植酸酶后肝胰脏中SOD活性增强,且当植酸酶含量为1 250 U/kg时,肝胰脏SOD活性显著高于对照组1和对照组2（P〈0.05）。当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时,草鱼肝胰脏和肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性都明显增强。结果得出,当植酸酶添加水平为1 000~1 250U/kg时,全植物蛋白饲料中添加植酸酶有助于草鱼的生长、非特异性免疫机能的提高,并能有效增强草鱼肝胰脏和肠道中的消化酶活性。     

不同水温和饲料蛋白质水平对镜鲤血清生化指标的影响

研究了不同水温和饲料蛋白质水平对镜鲤Cyprinus specularis血清生化指标的影响。试验中设3个温度梯度（18、22、26℃）,每个温度下投喂5种含不同蛋白质水平（质量分数为29%、31%、34%、38%、40%）的饲料,共15组,每组设3个重复,每个重复放14尾鱼,共饲喂60 d。结果表明：镜鲤血清中的肌酐（CREA）浓度随饲养水温的升高而降低,在22、26℃下CREA浓度显著低于18℃下（P〈0.05）;血清中总胆固醇（CHOL）浓度随水温的升高而升高,在22℃和26℃下CHOL浓度显著高于18℃下（P〈0.05）;血清中甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDH）、谷草转氨酶（AST）浓度和AST/ALT在22℃下比18℃和26℃下有所降低,但无显著差异（P〉0.05）。各水温环境下,血糖（GLU）、总蛋白（TP）、球蛋白（GLB）、白蛋白（ALB）浓度随饲料中蛋白质水平的增加而升高;在18℃下,LDH浓度随蛋白质水平的增加而逐渐降低,其中38%蛋白质组显著高于29%蛋白质组（P〈0.05）;在22℃下,CHOL浓度随蛋白质水平的增加而降低,其中40%蛋白质组显著低于其它蛋白质组（P〈0.05）;在26℃下,40%蛋白质组的谷丙转氨酶（ALT）活性显著高于31%和34%蛋白质组（P〈0.05）。这表明22℃下比18、26℃下更有利于镜鲤的营养代谢,18、22、26℃下,饲料中蛋白质的质量分数分别为38%、40%、40%时,有利于改善镜鲤血清生化指标。     

草鱼♀×鳡♂F_1代胚胎发育及胚后发育研究

[目的]为草鱼杂交育种提供参考。[方法]用草鱼卵与鳡精子进行人工杂交,观察和记录杂交后代胚胎与胚后发育情况。[结果]杂交一代的平均受精率、孵化率和成活率分别为(75.8±6.2)%、(41.9±8.2)%和(9.3±3.7)%。在水温20.1~21.6℃下,受精卵经34 h 25 min孵化。初孵仔鱼全长(5.8±0.12)mm,出膜3~4 d开始摄食轮虫和藻类。经65 d培育发育成幼鱼,鳞片出齐,全长(74.0±2.1)mm。[结论]草鱼♀×鳡♂F1代胚胎发育介于双亲之间,其形态与母本草鱼相似,生长比草鱼快,与父本鳡相近。     

山核桃等3类果蓬原料机制炭燃烧性能分析

利用TG-DTG-DSC热分析联用技术,对油茶Camellia oleifera,板栗Castanea mollissima和山核桃Carya cathayensis等3类果蓬制备的机制炭燃烧性能分析结果表明:3类果蓬机制炭燃烧失重开始所需的温度分别为435.4,448.1和412.3 ℃,较马尾松Pinus massoniana和杉木Cunninghamia lanceolata为原料制备的普通机制炭519.8 ℃低71.7~107.5 ℃,燃烧速率曲线峰值和峰值温度、放热曲线的峰值和相应的峰值温度均表现为普通机制炭＞油茶、板栗果蓬机制炭＞山核桃果蓬机制炭,即果蓬类机制炭可燃性优于普通机制炭;着火温度、最大释热量、最大燃烧速率和着火后最大失重速率及其相应温度5个参数大小排列均呈现为普通机制炭＞板栗果蓬机制炭＞油茶果蓬机制炭＞山核桃果蓬机制炭,其中山核桃果蓬机制炭着火温度408.6 ℃,较普通机制炭504.4 ℃低95.8 ℃,普通机制炭最大释热量95.12 Wg－1,比最大释热量分别为87.76,92.07,84.82 Wg－1的果蓬类机制炭高3.05 ~ 10.30 Wg－1,即生产中可以通过调节果蓬原料的添加量制备不同着火温度和燃烧特性的机制炭。图4表2参12