纤维素酶活力测定方法的比较研究

对 18种酶制剂的滤纸酶活力、组分酶活力及辅助酶活力分别进行了测定。结果发现测定Cx酶活力、C1酶活力均与滤纸酶活力有相关性 ,其相关系数分别为 92 %和 85 %。其相关方程为 :滤纸酶活力 =0 .0 97×Cx酶活力 - 986 ,这一结果可使我们利用Cx酶活力的测定结果来推算出滤纸酶活力 ,从而解决了滤纸酶活力测定法的限制因素     

琼脂糖扩散法测定加酶饲料中微量纤维素酶活力的研究

通过采用琼脂糖扩散法，对加酶饮料中所含的微量纤维素酶活力进行测定，并与其他方法进行了比较，试验结果表明，该方法具有灵敏度高，特异性好，操作简单，所需设备少等特点，可在加酶饲料进行纤维素酶活力的测定中推广使用。     

里氏木霉产纤维素酶条件的优化

研究采用里氏木霉菌株30911、40358和40359,设计了9个影响里氏木霉产纤维素酶活性因素,对里氏木霉的纤维素酶活性进行了液体摇瓶发酵试验。结果表明,培养基中微晶纤维素和小麦麸皮的最适添加量分别为:微晶纤维素20 g·L-1,小麦麸皮80 g.L-1,微晶纤维素与小麦麸皮最适配比为1:4;接种孢子悬液浓度1×107个·mL-1,培养温度28～30℃,pH 5.5,培养时间72 h,摇瓶转速180 r·min-1,250 mL三角瓶中装液量为50～75 mL。     

绿色木霉液体发酵生产纤维素酶条件的优化

目的:研究表明,纤维素酶对于纤维素的分解可应用于环保、畜牧、食品加工等多个领域,对于改善人们的生活有重大意义。找到绿色木霉生产纤维素酶的最佳发酵条件,为绿色木霉产纤维素酶的生产提供理论依据。方法:将一株高产绿色木霉进行滤纸酶活测定,对其液体发酵条件进行研究,以3因子4水平正交试验对其发酵温度、发酵时间、发酵初始pH值进行分析优化。结果:发酵过程中发酵时间影响结果为:1 d时酶活为23.56U/g;3 d时酶活为43.57U/g;5 d时酶活为80.24U/g;7 d时酶活为68.79U/g。发酵初始pH值影响结果为:pH为4.5时,酶活为65.31U/g;p H为5.0时酶活为73.06U/g;p H为5.5时酶活为81.21U/g;pH为6.0时酶活为72.09U/g。发酵温度影响结果为:温度为25℃时酶活为11.24U/g;温度为30℃时酶活为79.05U/g;温度为35℃时酶活为68.69U/g;温度为40℃时酶活为47.67U/g。结论:通过正交实验分析得出发酵时间5 d,初始p H值5.5,温度30℃条件下绿色木霉菌所产纤维素酶的较多,其酶活可达到82.25U/g。     

不同日粮条件下水牛瘤胃真菌纤维素酶活力的体外研究

在系列１（青草、干草、稻草）和系列（稻草添加精料及非蛋白氮）日粮条件下，分别测定了３头装有永久性瘤胃瘘管的去势公水牛瘤胃真菌子数量，体外培养１２０ｈ的混合真菌胞外羧甲基纤维素酶（ＣＭＸａｓｅ）滤纸酶（ＦＰａｓｅ）的活力变化。结果表明：青草期瘤胃真菌数量及ＣＭＣａｓｅ和ＦＰａｓｅ活力均显著高于稻草期（Ｐ＜０．０５）；干草期ＣＭＣａｓｅ和ＦＰａｓｅ活力居中。稻草添加精料日粮时，稻草日粮（Ⅰ期）添加混精     

白灵菇胞外纤维素酶适宜作用条件的研究

[目的]研究白灵菇胞外纤维素酶的最适作用条件。[方法]利用纤维素酶水解纤维素产生的纤维二糖、葡萄糖等还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕红色的氨基化合物,利用分光光度计,在540nm波长下测定。[结果]白灵菇深层发酵产生的滤纸酶在反应时间为1h、温度55℃,pH值为5.0时酶活性较高;Cx酶在反应时间0.5h,温度45℃、pH值为4.5时比较适宜。[结论]该研究为进一步揭示白灵菇胞外酶的生化特性和遗传育种提供了依据。     

纤维素降解菌的筛选及酶活力测定

从延安市宝塔区杨家湾长期堆积牛粪和秸秆的腐殖土中筛选到17株纤维素降解菌,经刚果红培养基、赫奇逊培养基复筛,得到TC-2、TC-4、TC-5、TC-6、TC-8、TC-11、TC-12、TC-13共8株可分解纤维素的菌株,对其进行纤维素酶活力(CMCA)和滤纸酶活力(FPA)的测定。结果表明,菌株TC-11产生的两种酶的酶活力均较高,可作为进一步研究的试验菌株。     

纤维素酶高产细菌的筛选、鉴定及酶学特性分析

从武夷山森林腐烂枯叶及附近土壤中筛选分离得到1株产纤维素酶活力较高的菌株CS-7。通过形态特征观察和16S r DNA序列分析,将其鉴定为蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus)。对菌株CS-7所产纤维素酶的相关酶学特性进行研究,结果表明,该菌株所产纤维素酶CMC酶活为7.91 U/m L,FPA酶活为2.40 U/m L;酶的最适反应温度和最适反应p H分别为60℃和6;在40~50℃温度范围内热稳定性较好;在p H 5.0~7.0范围内p H稳定性较好。研究结果表明,CS-7菌株是能产生耐高温中性纤维素酶的菌株,具有进一步研究开发利用的潜力。     

咪唑型离子液体溶液中纤维素酶荧光活性测定

为考查纤维素酶在离子液体溶液中的酶活,采用荧光光谱分析法对离子液体中纤维素酶的荧光活性测定,研究离子液体的浓度、类型对纤维素酶的活性影响。结果表明:纤维素酶在咪唑类离子液体溶液中荧光活性随离子液体浓度的升高而降低。离子液体为[C4 mim]Cl、[C4 mim]Br,且浓度为0.1 mol/L使纤维素酶的荧光强度减低最小,即对酶活性影响最小。     

纤维素酶测定方法的研究

本研究较全面地概括了纤维素酶的各种测定方法,对于酶的不同组分有不同的测定方法,这些方法大都为经验性方法。     

高产纤维素酶木霉菌株的筛选

以前期筛选获得的20株木霉菌株为试验对象,通过刚果红羧甲基纤维素钠(CMC-Na)培养基筛选出11株产纤维素酶能力较好的菌株,对其进行酶活性检测,发现菌株SS003产生的纤维素酶活性最高,并研究了温度和pH对该菌株所产的纤维素粗酶活性的影响。结果表明,SS003产生的纤维素酶最适反应温度为55~60℃,最适pH为3.0。     

纤维素酶活力测定方法研究进展

纤维素酶是一类能够水解纤维素的β-1,4-葡萄糖苷键生成葡萄糖的多组分酶的总称,传统上将其分为3类:内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。纤维素酶是一种复合酶,准确测定纤维素酶活力的大小,对于研究纤维素酶的特性及应用具有重要意义。该文对纤维素酶测定的常用方法进行了综述和评价。指出单一的酶活力测定方法不能确切的反映该酶的作用机制和活力,只有诸活力的综合测定方能全面的反映酶制剂对纤维素的作用。     

添加外源纤维素酶对土壤原生纤维素酶活性的影响

采用室内模拟法研究了以玉米秸秆作底物,在pH 6.5、温度27℃的环境中,向土壤施加外源纤维素酶对土壤原生酶活性及其底物酶解率的影响。结果表明：加酶处理总酶活高于不加酶处理酶活,且加酶后的土壤原生酶活性在第3～7天高于不加酶的土壤原生酶活性。各处理酶活在第4天达到高峰后逐步降低。同时添加外源纤维素酶有助于提高土壤原生纤维素酶的底物酶解率。     

产纤维素酶绿色木霉F-UV264产酶条件优化

对诱变菌株绿色木霉F-UV264产纤维素酶条件进行了研究,结果表明:以1%(NH4)2SO4和2%酵母膏为氮源,并加入3%表面活性剂,2%Mandels营养盐,麸皮与稻草粉比例为1∶3,加水量为干料的4倍,可提高酶的产量。该菌株最适产酶培养条件为pH值4.6~5.6,30℃条件下发酵96~135 h纤维素酶的酶活性达到较高水平。此研究可为工业化生产纤维素酶提供依据。     

黑曲霉高产纤维素酶菌株的高通量筛选

以黑曲霉GSICC 60108为出发菌株,经紫外和电子束诱变处理后,采用纤维素-刚果红平板初筛和新建立的高通量微孔板法进行复筛以获得高产纤维素酶菌株.结果表明:试验得到1株稳定高产的纤维素酶菌株黑曲霉EBR-106;所建立的复筛方法的标准曲线在葡萄糖质量浓度为0～10 mg/mL的范围内线性良好(r=0.999 75)...     

秸秆纤维素酶水解率测定方法的研究

实验设计了以砂芯坩锅为反应器,建立了用差重方式进行纤维素酶水解率的测定新方法,与常规方法测定还原糖方法计算纤维素酶水解率进行了比较研究,差重法比还原糖法的酶水解率普遍高,避免了产物复杂而使还原糖法计算酶水解率偏低的现象.     

产中性纤维素酶真菌的鉴定及其酶学性质的初步研究

通过CMC平板初筛、摇瓶发酵复筛,从土样中筛选到1株能够产中性纤维素酶的真菌,经18SrRNA基因序列分析初步确定该菌株为瓶霉菌(Phialo phora sp.).该菌株在适宜的条件下摇瓶培养72 h,产生的内切葡聚糖酶活力可达到2.95 IU/mL.酶学性质初步研究显示,菌株所产内切葡聚糖酶活力的粗酶液最适pH值为6.0～7.0,且在此pH范围内具较高的稳定性;粗酶液的反应温度以40℃左右为宜,且在50℃以下具有较高的温度稳定性;Mn2 、Fe3 对酶反应有促进作用,Hg2 、Pb2 对酶反应有抑制作用.     

微量元素对里氏木霉DWC—5产纤维素酶的影响

采用正交试验法,使里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）ＤＷＣ－５在５０℃,转速１１０ｒ．ｍｉｎ＾－１的摇瓶中发酵５－７ｄ。研究了铁、锰、锌、钴４种微量元素对里氏木霉ＤＷＣ－５纤维素酶产生的影响。结果表明：对ＣＭＣ酶活、ＦＰ酶活影响显著性的主次顺序依次为铁〉铁〉锌〉钴〉锰。微量元素的最佳组合对于ＣＭＣ酶活：Ｆｅ,Ｚｎ,Ｃｏ,Ｍｎ的用量分别为５．０,４．５,３．８,４．０ｍｇ．Ｌ＾－１,Ｃ