桦褐孔菌液体深层发酵条件优化研究

以生物量为指标,研究了对桦褐孔菌液体深层发酵影响较大的主要因素,即温度、发酵时间、初始pH、接种量、摇床转速,并运用中心旋转组合设计法对发酵条件进行了优化,确定了其最佳范围。结果表明,5个因子对生物量的影响由大到小依次为初始pH、发酵时间、接种量和摇床转速、温度,而当温度、发酵时间、初试pH、接种量和摇床转速分别为28.6℃,125 h,5.9,10.5%和135r/min时,获得的生物量最大,为22.91 g/L。     

桦褐孔菌发酵产物的抑菌活性

测定了桦褐孔菌(Inonotus obliguus(Pers.:Fr.)Pilát)发酵产物对植物病原菌的抑菌活性.结果表明:桦褐孔菌发酵产物对7种病原菌均有抑制作用;发酵时间为23d的桦褐孔菌发酵产物对落叶松枯梢病(Botryosphaeria laricina)、杨树烂皮病(Cytospora chrysosperma)的抑制率最高;桦褐孔菌发酵产物的主要抑菌活性物质存在于发酵上清液醇提物中;醇沉级别为70％的醇提物中50 g·L-1的多糖对病原菌的抑制率最高,当质量浓度为55g·L-1时能抑制50％以上落叶松枯稍病原菌孢子的萌发.     

桦褐孔菌菌丝液体培养条件的研究

试验研究了碳源、氮源、琼脂、天然物质在桦褐孔菌菌丝体液体培养基中的配比。结果表明:培养基配方以葡萄糖20.0 g/L、淀粉50.0 g/L、蛋白胨3.5 g/L、KH2PO43.0 g/L、MgSO41.5 g/L为最佳,菌丝生物量达0.181 2 g/100 mL。在最佳培养基配方基础上,桦褐孔菌菌丝体摇床培养5 d、培养液装量为容器的1/3时菌丝体生物量达到最大值,为0.041 4 g/50 mL。     

桦褐孔菌培养条件的研究

对桦褐孔菌菌丝生长的营养需求及发酵条件进行了初步研究,结果表明,固体培养采用PDA培养基为最佳配方;发酵试验确定最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为玉米浆,合适的碳氮源配比为葡萄糖2%,玉米浆1%。同时对发酵瓶接种方法和接种量进行对比试验,确定菌悬液接种法效果好,适宜接种量为2%。这些结果将为桦褐孔菌进一步研究提供科学依据。     

桦褐孔菌研究综述

概述了国内外桦褐孔菌的生物学情况,介绍了桦褐孔菌的人工栽培及其在抗癌、预防艾滋病、治疗糖尿病、抗衰老、增强免疫力等方面的研究现状,对其今后的研究发展方向进行了展望。     

8个桦褐孔菌菌株比较试验

对8个桦褐孔菌菌株的栽培特性进行了研究。结果显示,8个桦褐孔菌菌株的品种特性不尽相同,菌核形成早晚、整齐度以及生物学效率等存在明显差异。JL01菌核形成快、齐,各栽培袋菌核形成时间、快慢差异较小,个数最多,生物学效率最高为48.3%,种性最好J;L03J、L04种性较差,均不适合栽培。     

桦褐孔菌碱溶多糖提取工艺条件优化研究

[目的]优化桦褐孔菌碱溶多糖的提取工艺。[方法]以桦褐孔菌为原料,通过稀碱法提取碱溶多糖,以多糖得率为指标,采用单因素分析和正交试验测定碱溶多糖的最佳提取工艺条件。[结果]试验得出,桦褐孔菌碱溶多糖的最佳提取工艺为碱液浓度0.5mol/L、料液比1∶30 g/ml、提取温度80℃,在此条件下,桦褐孔菌多糖得率可达3.83%。[结论]研究可为桦褐孔菌的开发利用提供理论依据。     

营养条件对桦褐孔菌菌丝生长及多糖含量的影响

进行了不同碳源、氮源、微量元素对桦褐孔菌菌丝生长及多糖含量影响的试验．结果表明，桦褐孔菌菌丝生长的最适碳源为麦芽糖和葡萄糖，不同氮源和微量元素对菌丝生长均无明显影响；选用麦芽糖、Ca（NO3）2或蛋白胨、CuSO4或MnSO4的培养基菌丝多糖含量最高．     

桦褐孔菌的培养特性研究

对桦褐孔菌(Inonotus obliquus)菌丝生长的营养需求及培养条件进行了初步研究，结果表明，菌丝生长的最佳氮源为麦皮，不能利用硝态氮；最佳碳源为米粉，合适的碳氮比为15∽50：1，最适pH为9～10；光照(光强为500Ix)对桦褐孔菌菌种的萌发和菌丝生长有明显的抑制作用。这些结果将为桦褐孔菌的发酵生产提供科学依据。     

桦褐孔菌的人工驯化栽培

对由野生桦褐孔菌茵核分离得到的纯茵种,采用不同配方进行母种、原种、栽培袋培养基对比试验及菌核形成条件的研究。结果表明：母种培养基以葡萄糖、黄豆粉综合培养基为最好；原种培养基以玉米粒为最好；茵核人工代料栽培培养料以桦木屑52%、玉米芯26%、麦麸20%、白糖1%、石膏1%、水分65%为最好,生物学效率达30%。     

超声波辅助提取桦褐孔菌抗氧化活性物质的工艺优化

[目的]优化桦褐孔菌中抗氧化活性物质的超声波辅助提取工艺。[方法]以溶剂体积分数、超声处理时间、超声功率和液料比为试验因素,以DPPH自由基清除率为抗氧化活性评价指标,进行单因素和正交试验,确定最佳提取工艺。[结果]各因素对提取效果的影响大小顺序为：溶剂体积分数〉超声处理时间〉超声功率〉液料比。最佳超声辅助提取工艺为乙醇体积分数60%,超声处理时间30min、超声功率为500 W、液料比30 ml/g;在此最佳条件下,DPPH自由基清除率可达75.39%±1.12%。[结论]超声波辅助提取法是一种有效的桦褐孔菌抗氧化活性物质提取方法。     

桦褐孔菌原生质体制备与再生

采用正交设计方法对桦褐孔菌原生质体最佳制备与再生条件从酶条件、酶解时间、温度等5个方面进行了研究。试验结果表明:其原生质体制备最佳条件是以液体静置培养6d的菌丝体,0.6mol·L-1KCl作为渗透压稳定剂,在30g·L-1溶壁酶作用下,32℃酶解4h,制备率达2.675×107个·mL-1;再生最佳条件是液体静置培养10d的菌丝体,0.6mol·L-1NaCl为渗透压稳定剂,在30g·L-1溶壁酶作用下,32℃酶解2h,再生率为6.83%。     

桦褐孔菌多糖的提取及含量测定方法的研究

采用水提醇沉法提取桦褐孔菌粗多糖,并利用苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖为标准品,测定桦褐孔菌菌核及其粗多糖中多糖的含量.结果表明,桦褐孔菌粗多糖得率为17%,桦褐孔菌菌核中多糖含量为2.068%,桦褐孔菌粗多糖中的多糖含量为22.43%.该方法桦褐孔菌粗多糖得率高,加样回收率在99%以上,且5 h内显色稳定,重现性好,适合用于中药桦褐孔菌多糖的提取及含量测定.     

桦褐孔菌菌株遗传多样性分析方法的比较

以菌丝培养特性和ISSR分子标记对采自不同国家和地区的21株桦褐孔菌菌株进行了遗传多样性分析,并对2种方法的聚类结果进行了比较分析。结果表明,菌丝培养特性标记的聚类结果与ISSR分子标记聚类结果基本一致,均与地理分布有较强的相关性,但ISSR分子标记结果与纬度相关性较大,菌丝培养特性标记的聚类结果与生态环境相关性较大。因此,建议在桦褐孔菌的遗传多样性分析和种质鉴定中采用分子标记,并辅之以其他标记的研究方法。