安徽省部分地区鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

2007年3月～12月从安徽省不同地区临床疑似鸭疫里氏杆菌感染病/死鸭中分离到26株鸭疫里氏杆菌,通过细菌形态、PCR鉴定、培养特性、生化试验和动物试验,鉴定为鸭疫里氏杆菌.各地区分离株表现为较一致的形态特征和相似的生理生化特性.对不同地区分离到的26株鸭疫里氏杆菌进行了14种常用抗菌药物的药敏试验,结果26株鸭疫里氏杆菌分离株对青霉素G、氨苄青霉素、先锋噻肟、阿莫西林和罗红霉素等几种药物敏感性较高,对庆大霉素和卡那霉素的耐受率最高,对阿米卡星、复方新诺明、链霉素和新霉素等均不同程度地产生了耐药性.本研究为安徽省鸭疫里氏杆菌病的药物防治提供了理论依据.     

广东地区鸭疫里氏杆菌的血清型及抗药性情况调查

对2006~2008年间从广东省规模化鸭场罹患鸭传染性浆膜炎的病鸭中分离的鸭疫里氏杆菌的血清型和抗药性流行情况进行了调查和分析。在122个鸭场中共分离鉴定出鸭疫里氏杆菌86株。平板凝集试验结果表明血清1型菌株有81株,占总分离株的94.18%;其他血清型有8型2株,4型、3型和10型各1株,提示血清1型仍是广东省流行的优势血清型。以纸片法测定所分离菌株对氟苯尼考等13种常用抗菌药物的敏感性,结果显示广东地区鸭疫里氏杆菌抗药性严重,其中仅对阿莫西林、氨苄青霉素、头孢噻吩和氟苯尼考相对敏感,敏感菌株的比例分别为82.55%、77.91%、82.55%和81.39%,对其他抗菌药物均有抗性,75.58%的菌株同时对5种以上的抗菌药物具有多重抗药性,且不同地区鸭疫里氏杆菌分离株的药物敏感性也存在明显差异。     

硫酸头孢喹肟对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌活性测定

试验应用试管二倍稀释法测定硫酸头孢喹肟可溶性粉对鸭疫里默氏杆菌(RA)的最小抑菌浓度(MIC),并设盐酸环丙沙星可溶性粉、盐酸多西环素可溶性粉和氟苯尼考可溶性粉为对照药物。结果显示,硫酸头孢喹肟可溶性粉对鸭疫里氏杆菌有较强的抗菌活性,MIC为0.082μg/mL,抗RA效果优于盐酸环丙沙星可溶性粉、盐酸多西环素可溶性粉和氟苯尼考可溶性粉。头孢喹肟作为第四代头孢菌素类药物,抗革兰氏阴性菌作用强,可用于临床治疗鸭疫里氏默杆菌感染。     

川渝两地鸭疫里氏杆菌分离鉴定及药效试验

从四川、重庆地区临床典型鸭传染性浆膜炎发病鸭中分离细菌6株,通过形态、生化、培养特征、动物试验,鉴定为鸭疫里氏杆菌菌株,并对6株菌进行了14种抗菌药物的药敏试验,结果该菌对先锋霉素、甲砜霉素、六茜素、氧氟沙星高度敏感,不同地区的鸭疫里氏杆菌对不同抗菌药的敏感程度呈在差异性,为四川、重庆地区鸭传染性浆膜炎的药物防治提供了理论依据。     

鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

传染性浆膜炎又称鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)病[1],是鸭、鹅、火鸡等多种禽类的一种急性接触性传染病。1～4周龄小鸭易感,死亡率高。目前,鸭疫里氏杆菌病已成为危害养鸭业的主要的细菌性传染病之一。笔者通过细菌形态、培养特性和生化试验对临床分离出的12株细菌进行鉴定,并采用微量稀释法测定了临床常用的14种抗菌药物对这12株细菌的最小抑菌浓度,以期为防止耐药菌株的传播提供重要     

不同地区鸭疫里氏杆菌的分离鉴定与药敏试验

为了解不同地区鸭疫里氏杆菌病的流行情况,并进一步测定这些地区鸭疫里氏杆菌对常用抗菌药物的敏感性。本试验从广东云浮、广东开平、浙江常山3个地区疑似传染性浆膜炎病鸭中进行了细菌分离,通过鉴别培养、染色镜检、生化试验等对分离菌进行鉴定。采用微量稀释法测定了分离菌株对常用药物的最小抑菌浓度。结果从3个地区共分离鉴定出16株鸭疫里氏杆菌。药敏试验结果表明,3个地区鸭疫里氏杆菌均对头孢类和氟苯尼考高度敏感,对多西环素、大观霉素比较敏感;对恩诺沙星,新霉素等其他受试药物呈不同程度的耐药。本研究为鸭疫里氏杆菌的分离鉴定与药物敏感性测定提供了系统方法,为临床选择合理药物防制鸭传染性浆膜炎提供了理论指导。     

鸭疫里氏杆菌的耐药性综述

鸭疫里氏杆菌引起的鸭传染性浆膜炎对养鸭业造成了很大危害。抗菌药物的过度使用,使耐药问题日益突出,临床上已经发现了对多种抗菌药物不敏感的现象。文章从耐药性的判断、同地区不同分离株、不同地区分离株、不同时间跨度所得分离株等角度分析鸭疫里氏杆菌的耐药性。     

血清5型鸭疫里氏杆菌在我国的发现及其病原特性研究

1994年1月至2000年10月，从全国25个省、自治区、直辖市的5－90日龄患典型鸭疫里氏杆菌病的种鸭和商品鸭中分离到89株血清5型鸭疫里氏杆菌。对其病原学特性研究结果表明，血清5型鸭疫里氏杆菌病在我国鸭群感染范围极广；分离菌株对雏鸭具有很强的致病性，对小白鼠无致病性；各地分离菌株表现出一致的形态特征和非常相似的生理生化特性；各地分离力株耐药谱很广，但对头孢类药物和利福平高度敏感。用分离菌株制备的灭活疫苗免疫雏鸭具有很好的免疫原性。     

豫北地区临床分离鸡大肠杆菌的体外抑菌作用测定

为了有效地治疗鸡大肠杆菌病,采用微量倍比稀释方法测定了17种抗菌药物对临床分离的豫北地区15株鸡大肠杆菌的体外最小抑菌浓度（MIC）,并根据其MIC及MIC范围（MICRange）使用SPSS 13.0中Probit过程计算出17种抗菌药物的MIC50和MIC90。结果表明：多粘菌素B的抑菌作用最强,MIC50、MIC90分别为0.11、0.87μg/mL;加替沙星的抑菌作用次之,MIC50、MIC90分别为2.53、3.88μg/mL,其它3种药物恩诺沙星、左氧氟沙星、环丙沙星的抑菌作用相当,但不及加替沙星,MIC50、MIC90分别为10.11-11.79μg/mL、15.16-21.13μg/mL;多西环素和阿莫西林等12种抗菌药物的抑菌作用较小,MIC50、MIC90分别为18.53-388.50μg/mL和30.59-713.42μg/mL。     

鸭疫里氏杆菌的分离鉴定

2009年4月从扬州某鸭场分离到一株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性和玻片凝集试验确定其为ⅩⅤ型鸭疫里氏杆菌。动物致病性试验表明,鸭疫里氏杆菌分离菌株可以通过肌肉注射、皮下注射和滴鼻三种途径感染试验鸭,使攻毒鸭发生100%死亡,说明该鸭疫里氏杆菌分离株具有很强的致病性。     

Isolation,Identification and Drug-sensitivity Test of Riemerella anatipestifer from Different Areas

In order to understand the prevalence of the duck infectious serositis in different regions,and further to determine the sensitivity of the commonly used drugs for the Riemerella anatipestifer in these area.Bacteria were isolated from suspected infected ducks in Yunfu, and Kaiping in Guangdong province and Changshan in Zhejiang province.The isolated bacteria were identified by differential culture, microscopic examination and biochemical test. Micro dilution method was carried out in drug sensitivity test, and the MIC values of the isolated strains to the commonly used drugs were determined.As a result, a total of 16 strains of Riemerella anatipestifer were isolated and identified from three areas. Data of the MIC showed that all isolates were highly sensitive to cephalosporins and florfenicol;Doxycycline andspectinomycin were sensitive too,but enrofloxacin, neomycin and other tested drugs showed different degrees of resistance.The present study provided a systematic method for the isolation and identification of the Riemerella anatipestifer and for the drug sensitivity test.At the same time, it also provided theoretical guidance for the rational drug control of the duck infectious serositis.     

鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

从通辽地区养鸭场病死鸭的脑、肝、脾脏组织和心脏血中分离到4株细菌,经对分离菌进行染色、形态观察及生化鉴定,其中3株鉴定为Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌,1株为Ⅱ型鸭疫里默氏杆菌。经动物回归试验,表明该菌对雏鸭有较强的致病力。对4株鸭疫里默氏杆菌进行了12种常用抗菌药物药敏试验,结果4株鸭疫里默氏杆菌分离株对头孢曲松、头孢唑啉、复方新诺明高度敏感,对强力霉素、新霉素、红霉素中度敏感,对庆大霉素、卡那霉素、四环素、环丙沙星、氨苄青霉素、丁胺卡那等均不同程度地产生耐药性。     

鸭疫里默氏杆菌PCR快速检测方法的建立

在鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白保守区设计了一对特异性引物,建立PCR方法,对5株已知血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌和6株临床分离未定型的里默氏杆菌菌株以及病死鸭病料组织进行检测,结果表明不同样品都可扩增出592bp的特异目的条带,而对鸭源大肠杆菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门氏菌的扩增结果均为阴性,说明该PCR法具有较好的特异性,可用于快速鉴定鸭疫里默氏杆菌,也适用于病料的直接检测.     

鸭疫里默氏菌铁依赖抑制子基因的克隆及序列分析

本研究根据鸭疫里默氏菌铁依赖抑制子(RaDtxR)基因序列特征设计特异性引物,利用PCR方法从已鉴定为2型鸭疫里默氏菌RA-FJ株的基因组DNA中扩增目的基因片段,胶回收PCR扩增片段,克隆到pMD18-T载体后进行序列测定.采用生物信息学软件对测序结果进行分析,结果表明所获得的RaDtxR基因编码完整的开放阅读框,全基因长度为654 bp,编码217个氨基酸.所编码的蛋白大小为24.82 ku,理论等电点为5.69,不稳定系数为38.45,属于稳定蛋白质类.将其与GenBank中已发表的RaDtxR基因序列进行核苷酸同源性比对分析,结果显示其与鸭疫里默氏菌疫苗株RA-CH-1株(GenBank登录号:CP003787)的核苷酸同源性为100.0%,与其他4株核苷酸同源性均为99.8%,仅在186位处存在无义突变.利用该基因对福建省农业科学院畜牧兽医研究所分离鉴定的鸭大肠杆菌、禽多杀性巴氏杆菌和沙门氏菌进行扩增,结果显示均未扩增到条带,对福建省农业科学院畜牧兽医研究所分离鉴定的1型、2型、3型、11型和13型鸭疫里默氏菌均可扩增出特异性目的条带,表明RaDtxR基因可作为鸭疫里默氏菌鉴别诊断的靶基因.试验结果表明,本研究成功克隆到鸭疫里默氏菌RaDtxR基因,为研究其功能奠定基础.     

山东部分地区3型鸭疫里氏杆菌感染流行病学调查

利用血清3型鸭疫里氏杆菌制备兔抗高免血清和平板凝集诊断抗原,对收集的2010年3月~10月来山东畜牧兽医职业学院动物医院就诊的鸭传染性浆膜炎疑似病例进行血清3型鸭疫里氏杆菌分离培养及鉴定。同时,采集山东养殖量较大的9个县、市、区的13个养殖场372份鸭血清,利用平板凝集试验对3型鸭疫里氏杆菌的流行情况进行血清学调查。结果显示：共分离得到39株鸭疫里氏杆菌,且19株为血清3型,占鸭疫里氏杆菌总数的48.7%;在采集的血清样本中,3型鸭疫里氏杆菌阳性率为21.7%。可见,3型鸭疫里氏杆菌在山东上述地区感染较为普遍。     

荧光定量PCR方法检测鸭疫里默氏菌在组织中的分布规律

为揭示鸭疫里默氏菌在鸭组织中的分布规律,用荧光定量PCR检测法,对人工感染鸭疫里默氏菌鸭组织中鸭疫里默氏菌进行检测。结果表明,获得的熔解曲线为单一的峰,扩增曲线为"s"形,标准曲线扩增效率为99.7%。人工感染鸭疫里默氏菌1、2、3、5、9、14 d鸭脾脏、脑、心脏、肺脏和肝脏组织中的鸭疫里默氏菌载菌量均在2 d达定殖高峰,载菌量多少按组织排序依次为脑>心>脾>肺>肝,按时间排序依次为2 d>3 d>1 d>5 d>9 d>14 d。     

Exclusion of strain 670/89 as type strain for serovar 20 of Riemerella anatipestifer

Classical phenotypic characterisation and numeric analysis of whole-cell fatty acid patterns of twenty-one type strains of hitherto reported Riemerella anatipestifer serovars revealed that the type strain of serovar 20 does not belong to the species Riemerella anatipestifer sensu stricto and, therefore, it has to be excluded as a representative Riemerella anatipestifer serotype strain.     

Antimicrobial susceptibility of Riemerella anatipestifer isolated from ducks and the efficacy of ceftiofur treatment.

The in vitro susceptibilities of 50 field isolates of Riemerella anatipestifer from ducks to ceftiofur and 16 other commonly used antimicrobials were determined. The MIC90 values (MIC refers to minimum inhibitory concentrations) for the antimicrobials used in this study are as follows: penicillin was 16 microg/ml; ceftiofur was 32 microg/ml; cephalothin, chloramphenicol, flumequine, and kanamycin were 64 microg/ml; nalidixic acid, nitrofurantoin, and sulfamethoxazole were 128 microg/ml; amikacin, ampicillin, gentamicin, lincomycin, spectinomycin, streptomycin, tetracycline, and trimethoprim were > or = 256 microg/ml. The therapeutic efficacy of ceftiofur against a highly lethal experimental R. anatipestifer infection in ducks was also evaluated. All experimental ducks were infected through the infraorbital sinus with 1 ml of 9 x 10(9) CFU of R. anatipestifer. Ceftiofur (0, 0.25, 0.5, 1, and 2 mg/kg) was injected subcutaneously 5 hours after infection. A single dose of 2 mg/kg resulted in 73% survival as compared with 10% survival in the infected, but untreated controls.