虾蛄多肽酶解工艺的优化及其体外免疫活性研究

[目的]研究虾蛄多肽的免疫活性.[方法]采用胰蛋白酶水解虾蛄的生物组织,通过单因素试验和正交试验探索其最佳酶解条件,采用MIT试验研究虾蛄多肽对小鼠巨噬细胞的细胞活性,并通过中性红吞噬试验分析虾蛄多肽的免疫调节能力.[结果]虾蛄多肽的最佳酶解条件为:温度62.5℃、pH 9.5、酶解时间8h、加酶量0.08％,此时虾蛄多肽对RAW264.7有最高的细胞活性,并对小鼠巨噬细胞的吞噬能力表现出一定的促进作用.[结论]该研究为从海洋蛋白中获取高生物活性的酶解产物和具有免疫活性的多肽提供了一定的科学依据.     

海南狗牙花有效部位提取和体外抗肿瘤活性研究

[目的]初步筛查海南狗牙花抗肿瘤活性部位.[方法]采用MTT比色法测定海南狗牙花4种提取物分别对人非小细胞肺癌细胞(A549)和人乳腺癌细胞(MCF-7)体外生长抑制作用.[结果]海南狗牙花4种提取物对2种肿瘤细胞呈现不同的抑制活性,乙酸乙酯提取物的抗肿瘤活性最强,石油醚提取物次之,正丁醇萃取物较弱而萃取后的水层无抗肿瘤活性.[结论]该研究为深入研究海南狗牙花中具有抗肿瘤活性的单体化合物提供科学依据.     

一株野生粗毛纤孔菌的分类鉴定及其发酵上清液的抗肿瘤活性

[目的]对一株野生粗毛纤孔菌进行分类学鉴定,并分析其发酵上清液抗肿瘤活性,为粗毛纤孔菌的开发利用及抗肿瘤活性机制研究提供理论依据.[方法]通过形态特性观察、ITS序列分析及系统发育进化树构建等方法对一株野生粗毛纤孔菌(简称IH3菌株)进行分类学鉴定,并利用B16、Hep-3B、Hela、MCF-7、HCT-116和4T16种肿瘤细胞及正常细胞HUVEC分析该菌株发酵上清液的抗肿瘤谱.从石油醚、乙酸乙酯和正丁醇中筛选出萃取抗肿瘤活性物质的最佳有机溶剂,利用液相色谱分离技术分离抗肿瘤活性组分,并利用MTT(四唑盐)法分析活性组分对不同肿瘤细胞的半致死浓度(IC50).[结果]IH3菌株的形态特性与粗毛纤孔菌相似,且其ITS序列与粗毛纤孔菌(MF183947.1)的相似度最高,为98%,鉴定为粗毛纤孔菌.系统发育进化树分析结果也显示,IH3菌株属于纤层孔菌属类群,与3个粗毛纤孔菌菌株的亲缘关系较近.IH3菌株的发酵上清液对不同肿瘤细胞的抑制活性排序为:B16>Hep-3B>Hela>MCF-7>4T1=HCT-116.正丁醇萃取的IH3菌株发酵上清液抗肿瘤活性组分对B16肿瘤细胞的抑制率最高,达80%,说明正丁醇对发酵上清液中抗肿瘤活性组分的萃取效果最佳.利用液相色谱分离方法可有效获得纯度较高的单一抗肿瘤活性组分(WIH3),该活性组分对B16、Hep-3B、Hela和MCF-7肿瘤细胞的半致死浓度(IC50)分别为29.322、37.387、47.029和58.009μg/mL.[结论]IH3菌株被鉴定为粗毛纤孔菌,与已发表的粗毛纤孔菌菌株存在遗传差异,可能为粗毛纤孔菌的新亚种,其发酵上清液具有广谱的抗肿瘤活性.     

一株放线菌发酵产物抗肿瘤活性的研究

[目的]研究一株放线茵发酵产物的抗肿瘤活性。[方法]采用HepG2作为肿瘤细胞模型进行抗肿瘤活性检测。[结果]用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取发酵液离心后的沉淀和上清液,分别得到6个浸膏样品。发现用乙酸乙酯萃取上清液得到的5号样品抗肿瘤活性最高,在没有分离纯化的情况下G1 50达到0．76μg,／ml。对5号样品进行分离后得到物质A,在其浓度为10．00μg／ml时,对肿瘤细胞抑制率为26．50％。[结论]此株放线菌发酵产物具有高效抗肿瘤活性,可以进行深入研究。     

鹅不食草抗肿瘤活性的研究

[目的]研究鹅不食草的抗肿瘤活性成分.[方法]利用柱色谱和反相HPLC等手段进行分离纯化,应用NMR等方法鉴定结构及进行了MTT法抗肿瘤试验.[结果]从鹅不食草中分离鉴定了化合物1（Dihydrohelenalin）、化合物2（Helenalin）、化合物3（Brevilin-A）、化合物4（Amicolide C）和化合物5（Arnicolide D）,并且均具有一定的抗肿瘤细胞活性.[结论]5个化合物有一定抑制肿瘤细胞生长作用.     

核桃外果皮不同萃取部位对人宫颈癌HeLa细胞抑制作用研究

[目的]研究核桃外果皮不同萃取部位对人宫颈癌细胞的抑制作用,筛选核桃外果皮抗肿瘤活性部位.[方法]采用MTT法,选用人宫颈癌HeLa细胞,对核桃外果皮不同萃取部位进行抗肿瘤活性筛选.[结果]石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位对HeLa细胞的IC50分别为158.81、40.43、130.49和137.67 mg/L,水相部位对HeLa细胞无抑制作用.[结论]核桃外果皮石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位对HeLa细胞均有抑制作用,其中氯仿萃取部位对HeLa细胞具有较强的抑制作用,初步认定氯仿萃取部位为核桃外果皮的抗肿瘤活性有效部位.     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性。采用正交实验方法,以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16（45）正交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGC80-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bcl-2表达的影响。结果表明：当料液比为1：4、pH为8.5、加酶量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5 h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1：4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温度为40℃、酶解时间为2 h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bcl-2的表达。紫贻贝酶解多肽具有抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的。     

梨石细胞含量与PAL活性和果实硬度的相关性研究

[目的]探讨梨石细胞含量与PAL活性和果实硬度的相关性.[方法]以8个梨品种和3个品系为试验材料,测定不同品种(品系)石细胞含量、果实硬度和PAL的活性,并分析石细胞含量与果实硬度和PAL活性之间的相关性.[结果]梨不同品种(品系)果实硬度在5.91～10.63 kg/cm2,石细胞含量在0.14～0.67g/100g.PAL活性为1.44 ～9.43.[结论]石细胞含量与PAL活性呈极显著正相关,相关系数为0.819.石细胞含量与果肉硬度之间存在正相关,相关系数为0.413.     

两种海洋贝类多糖的提取及其生物活性评价

[目的]提取翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖并评价其生物活性,为这两种贝类多糖的开发利用提供科学依据.[方法]采用酶解法提取翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖,并采用苯酚—硫酸比色法测定其多糖中的总糖含量;通过纸片扩散法、清除羟基自由基(·OH)试验和MTT法分别评价两种多糖的体外抑菌活性、抗氧化活性及抗猪蓝耳病毒(PRRSV)活性.[结果]翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖提取率分别为0.21％和0.14％,其多糖中的总糖含量分别为90.2％和90.1％.翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖对·OH均有一定的清除作用,且随多糖质量浓度的增加而逐渐增强;对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均无明显的抑制作用;对PRRSV均无明显的阻断、抑制及直接杀灭作用.[结论]翡翠贻贝多糖和牡蛎多糖均具有一定的抗氧化活性,但不显示有意义的体外抑菌和抗PRRSV活性,可将其作为抗氧化剂资源予以研究.     

胰蛋白酶制备乌贼缠卵腺抗氧化活性多肽的研究

[目的]探讨胰蛋白酶制备乌贼缠卵腺抗氧化活性多肽的工艺及体外抗氧化活性.[方法]以乌贼缠卵腺为原料,用胰蛋白酶进行酶解,采用单因素和正交试验优化乌贼缠卵腺抗氧化活性肽的提取工艺;将酶解液超滤分成4个分子段,通过体外检测DPPH清除率、·OH清除率和还原力评价其抗氧化活性.[结果]胰蛋白酶酶解乌贼缠卵腺在加酶量2000 U/g、pH为8.5、料液比1:3、酶解时间8 h条件下得到的酶解物对DPPH的清除率最大.酶解液经超滤得到的<3 kD分子段的多肽具有良好的DPPH清除能力、·OH清除能力和还原能力.[结论]胰蛋白酶酶解制备的乌贼缠卵腺多肽具有较好的体外抗氧化活性,可作为抗氧化肽的理想来源.     

产销通路的建立及招商引资意见

针对大陆农业发展存在的不足有必要建立产销通路 ,并提及物流在流通环节的重要性。最后就大陆各地的招商引资提出了意见     

植物学与分子生物学研究创新型实验项目的设计与实施

以农杆菌渗入烟草表皮瞬间表达绿色荧光蛋白的观察实验为例,对植物学与分子生物学研究创新型实验的选题设计、教学过程和效果进行了探讨。该实验项目的实施培养了学生的团队精神、科学素养和创新意识,提高了实验设计和实际操作能力,是生物科学特色专业实验教学改革的有益尝试。     

耐低温兼性厌氧蛋白酶产生菌192的筛选、鉴定及酶学性质

为了提高厌氧水解效率,采用双层平板法筛选出一株耐低温兼性厌氧蛋白酶产生菌192.经形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),对其产酶条件进行了初步研究.结果表明,该茵的最适生长温度为30℃,生长8～12h达对数期,初始pH 7.5时酶活力最高.蛋白酶最适反应温度为45℃、pH 7.0,酶活力最高达39.3 U/mL.该酶在50℃以下,pH 6.0～9.0性能稳定.在60℃以上热稳定性很差,70℃保存lh酶活力全部丧失.     

苦荞的成分功能研究与开发应用

苦荞具有丰富的营养价值 ,它既能食用 ,又能防病、治病 ,为许多其它主要食物所不及。我国有丰富的苦荞资源 ,对苦荞的深入研究和开发应用有利于改善和提高人们的食物结构 ,同时也有助于促进贫困山区的脱贫致富。本文就苦荞的营养价值、药用价值和开发应用等方面的问题进行了阐述     

《机械原理》与《机械设计》实验教学改革实践

《机械原理》和《机械设计》两门课程的实验教学在培养学生的综合设计、创新设计能力等方面,有其他课程不可替代的重要作用,针对两门课程传统实验教学中存在的问题,提出了以独立设课为中心的实验教学改革和实践方案,取得了显著的效果。     

副猪嗜血杆菌分离鉴定与PCR检测方法的建立及应用

从养猪场送检的猪肺病料中分离到3株疑似副猪嗜血杆菌(HPS)可疑菌株。经形态镜检、染色特性、生化和部分生物学特性试验,初步鉴定为HPS。在细菌学鉴定基础上,设计合成3对引物,分别以3株分离菌株的DNA为模板进行PCR扩增,结果均扩增出822 bp8、24 bp和1.9 kb的预期特异性条带。以HPS GD株作为参考阳性菌株,以P1、P2为引物,设计优化PCR反应程序,建立HPS PCR检测方法,并应用于临床病料检测。结果表明,所建立的HPS PCR检测方法特异与敏感性高、适用性强,可应用于HPS感染的诊断和检测。     

万寿菊病虫害的发生与防治措施

万寿菊又名金盏花、臭芙蓉 ,千寿菊、蜂窝菊 ,属菊科万寿菊属一年生草本植物。黑龙江省八五三农场人工栽培万寿菊主要是取其花朵作为提取黄色素的原料。在正常条件下 ,种植万寿菊可实现公顷产鲜花 2 2 .5t以上、产值可达 135 0 0元左右、利润可达6 0 0 0元左右 ,经济效益较好。     

秸秆切碎灭茬机的设计与试验

针对双轴击切式破碎秸秆和根茬所存在的问题，本文提出单轴压切原理和非等长刀切碎模型，并对秸杆切碎灭茬机的关键参数进行了优化设计。该机田间试验表明切碎率达91．4％，根茬破碎率达86．5％。该机的应用必将促进一年两熟平作旱区保护性耕作技术的发展。     

土壤铅、镉单一和复合污染及与钙、锌交互作用对韭菜生长和铅镉积累特性的影响

通过盆栽试验研究了重金属铅、镉单一和复合污染及其与常量元素钙、微量元素锌的交互作用对韭菜植株生长发育和Pb、Cd在其根、叶中迁移富集规律的影响。韭菜中Pb、Cd的含量用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测得。结果表明,韭菜对Pb或Cd的吸收量与土壤单一Pb或Cd污染程度正相关;Pb/Cd之间存在复杂的交互作用,低浓度复合时相互促进吸收,高浓度复合时优先吸收Cd而抑制韭菜对Pb的吸收;锌在高浓度Pb/Cd污染时表现出优良的拮抗作用,可有效降低Pb、Cd的生物有效性并促进韭菜生长。韭菜根是富集Pb、Cd的主要部位,但受代谢方式、迁移率等因素的影响,因而在根、叶中的分布存在差异;根与叶中Cd的浓度比为1.5左右,Pb浓度比主要为2.5~4.5之间,显示Cd更易迁移至韭菜叶组织中。     

秦川牛GH 、INS 的测定及体尺、体重分析

随机选取14头秦川牛(其中1.5岁的公、母牛各4头,2.0岁的公、母牛各3头),按性别分为两组。采用放射免疫法测定血液中生长激素(GH)、胰岛素(INS)的水平,并对每头牛的体高、体斜长、胸围、胸深、尻宽、腰角宽等体尺指标及体重进行测量并分析,结果表明:在1.5时公、母秦川牛体内的生长激素和胰岛素差异不显著(P>0.05);而在2.0岁时公、母秦川牛体内的生长激素和胰岛素差异显著(P<0.05);并且随着年龄的增加,秦川牛体内的生长激素呈下降趋势而胰岛素则呈增加趋势,且生长激素和胰岛素呈差异不显著的负相关(P>0.05)。通过对体尺指数进行分析得出:较1.5岁而言,2.0岁秦川牛体躯发育程度更大,胸围更宽,尻部增幅明显,骨骼等体躯部分生长速度相对减慢,而肌肉等体量部分增长速度则相对加快,符合肉牛的生长发育规律以及秦川牛中、晚熟的特点。将实测体重与经济性能划分标准比较,发现秦川牛仍属于役肉兼用型品种,但经过近几年的选育,体重有了很大的增加。